PRRSV变异株ORF6基因与IL-18共表达真核质粒的构建及其表达

针对白细胞介素18(IL-18)基因和本实验室分离的PRRSVJL/07/SW毒株全基因序列,分别设计了2对特异性引物,扩增出IL-18基因和ORF6基因。将2个目的基因克隆于真核表达载体pEGFP-N1中,成功构建了重组真核质粒pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6,阳性质粒转染Marc-145细胞进行筛选。通过表达载体在转染细胞中的高效转染,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)快速、准确的反映出阳性质粒在细胞质中的正确表达,再通过SDS-PAGE和Western blot鉴定构建的真核表达质粒pEGFP-IL18-ORF6的正确性。结果表明,ORF6基因和IL-18基因在Macr-145细胞中能有效表达。结论,所构建的真核质粒pEGFP-IL18-ORF6结构正确,能够在Marc-145细胞中高效表达,而且表达产物具有特异免疫学反应。     

独立学院《兽医微生物学》教学改革初探

针对独立学院学生的特点,并结合教学中的体会及经验,就独立学院《兽医微生物学》的教学内容、教学方法和教学手段及学生能力的培养等方面提出了一些改革的建议,以期为独立学院的教学提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株ORF5基因在大肠杆菌中的表达

根据测定的猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株(PRRSV GD)的序列,设计一对引物。用保存的PRRSV GD 的ORF5 的克隆产物pMD ORF5 质粒作为模板,扩增ORF5基因。将该片段定向插入到原核表达载体pBAD/gⅢC中,转化大肠埃希菌。重组质粒经PCR和酶切鉴定后,用阿拉伯糖诱导表达。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明ORF5基因得到表达。     

多体动力学建模方法对发动机主轴承载荷计算影响

使用模态综合法,在ADAMS中建立刚柔混合的4100QB柴油机多体动力学模型,研究了多体动力学建模方法对发动机主轴承载荷计算的影响。通过比较不同模型间主轴承载荷的差异,探讨了发动机曲轴和机体的柔性、发动机安装方式和联轴节等建模因素对主轴承载荷计算的影响。结果表明:曲轴、机体柔性及发动机安装方式对轴承载荷计算影响显著;柔性联轴节对主轴承载荷的影响可以忽略。最后利用实测的气缸体表面节点振动数据验证了多体动力学计算结果的有效性。     

抗菌肽模式肽PGYa的分子设计、克隆及在毕赤酵母中的分泌表达

在α-螺旋抗菌肽序列比较和两亲性分析的基础上,提取序列模板,计算机辅助（螺旋轮法）设计出新型抗菌肽模式肽PGYa(Peptide以Gly开头,以Tyr-NH2结尾),然后选用毕赤酵母偏爱密码子,设计合成了PGYa基因（rPCR法）。所合成的基因全长为94bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型酵母表达载体pPICZα-A-PGYa。在AOX1 (醇氧化酶)启动子调控下,PGYa蛋白获得分泌表达,其表达量达到132 mg/L。初步抑菌（E.coli DH5α）活性显示：PGYa有较好的抗菌活性。     

细沟侵蚀研究综述

细沟侵蚀作为坡面土壤侵蚀的一个重要过程,近２０年来引起了许多研究者的重视,他们在细沟侵蚀研究理论基础及方法等方面做了大量的工作。与其他侵蚀过程相比,人们对于细沟侵蚀的认识仍然很低。本文系统介绍了细沟侵蚀研究的重要成果及其研究现状。     

中国二段海鞘科相关属种的次生代谢产物最新研究进展

二段海鞘科物种在我国有记录的有二段海鞘属、拟薄海鞘属、膜海鞘属和Diplosoma共4属11种。本文简介了中国二段海鞘科品种分布及资源状况,概述了2001年以来关于该科此4属物种的次生代谢产物及其生物活性的研究进展,并对中国资源的化学成分与药用价值研发前景进行了展望。     

南方中蜂饲养过程中的雄蜂管理

雄蜂是蜂群中的雄性个体,是蜂王在雄蜂巢房中产下的未受精卵(单倍体)孵化而来的,他属于蜂群周年生活的季节性蜂。雄蜂的品质和体质的好坏,对与其交配蜂王所组成新分群的后代遗传性状和品质优劣有直接的影响。因此,在中蜂的饲养过程中如何有效地管理雄蜂已显得至关重要。笔者将中蜂饲养过程中所获得的一些粗浅体会写出来与大家探讨。1雄蜂的培育南方中蜂一般在“大寒”前后开始春繁,此时自然界有零星的蜜粉源,如农田中的菜花等。强群一般在2月份就达到了一定的蜂量,并开始修造雄蜂巢脾培育雄蜂了。这时是选育种用雄蜂的关键期,应在晴暖无风的…     

鼻腔免疫疫苗的前景和未来面临的挑战

与传统接种方式的疫苗相比,鼻腔免疫疫苗有更多的优势,主要包括:接种方式便捷,无需处理针头,使从业人员免受针刺损伤,接种者对鼻腔疫苗产品的接受度较高等,这令鼻腔免疫技术得到迅速发展.鼻腔免疫疫苗未来面临的主要挑战是:如何将体外试验数据转化为临床效果;制定接种方案时,应特别关注如何让这种独特的黏膜接种途径满足更多疾病、更多...     

猪胸膜肺炎放线杆菌快速PCR检测方法的建立

根据猪胸膜肺炎放线杆菌 (Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的 apx A基因序列设计了 1对可扩增 1个4 2 2 bp片段的特异性引物 ,成功地建立了一种检测 APP的快速 PCR方法 ,并确定了其特异性和灵敏性。对血清 1～ 13型等 13个 APP标准株均能扩增出预期 4 2 2 bp的特异性条带 ;对猪副嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌的扩增结果为阴性。对 APP菌液最低检出浓度为 6 8CFU/ m L(D6 0 0 为 0 .0 0 3)。 12株临床分离菌的 PCR扩增结果与生化鉴定结果是一致的。该方法能从病料中分离培养 8h的混合菌群中快速检测APP,可用于 APP的快速诊断和流行病学的调查。