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目的 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) DNA快速检测方法。方法 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列,设计特异性的ERA探针和引物,经过反应条件的优化,建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法。结果 ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即可得出检测结果;特异性强,对阳性样品拷贝数的检测下限均为102 μL−1;与我国非洲猪瘟诊断技术标准中的方法对比,结果符合率为100%。结论 本研究建立的 ERA检测方法可以用于ASFV的快速检测,为流行病学调查和现场检测提供了一种快速有效的检测方法。 相似文献
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根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+)-rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49 ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。 相似文献
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农业机械的研发与推广应用推动了农业生产自动化,其自动化程度越来越高。农业机械推广及农业生产自动化具有缓解农民劳动负担、提增农业生产效率的现实意义,应从多个角度优化农业机械推广及农业生产自动化的路径,以期提升农业机械推广效率,并在农业生产自动化中发挥优势作出贡献。 相似文献
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近年来,随着人民生活水平的不断提高,对牛肉及其制品的需求大增,肉牛养殖在我国各地悄然升温。由于肉牛繁育供应地相对局限,因此我国南北各地肉牛的流通频繁,尤其是我国南方地区,需要从山东、吉林等北方地区引进。笔者近几年遇见诸多长途运输后肉犊牛群体发病现象,通过调查了解,在我国的广东、广西、贵州、福建、武汉、湖南等地均有类似病例发生。病牛多表现呼吸系统症状,体温升高,口腔溃疡,间或腹泻,甚至发生死亡,损失惨重。现将其运输、发病情况、治疗、预防措施及体会简介如下。 相似文献
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以活性发为载体,添加氯酸钠、硫酸亚秩和氧化锌制作果蔬保鲜剂,方法简单,原料价廉易得,在贮存水果、蔬菜时使用,效用长久,保鲜效果好,很值得推广、普及、应用。(1)原料配方①活性炭,用作载体,用量为60%。②氨酸钠,白色粉末,是一种强氧化剂,为本剂的主要成分,用量为20%。③硫酸亚秩和氧化锌,它们是保鲜的活性剂,用量分别为10%。(2)配制方法将活性炭、氨酸钠、硫酸亚铁和氧化锌混合均匀,然后加少量水搅匀,在100C~1!OC的条件下干燥.制成直径2~3mm的颗粒,即为保鲜刘成品。(3)包装及使用将成品保鲜剂按sg、10g… 相似文献
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华龙区岳村乡寨里村位于濮阳市城区东北部,属典型的近郊农业村,现有农户310户,1340人,耕地约122.67hm2.2007年,该村组建蔬菜农民专业合作社以来,蔬菜种植迅速走上规模化生产、组织化经营的道路,寨里村也成为远近闻名的现代农业发展龙头村. 相似文献
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为了掌握凉州区奶牛口蹄疫的疫苗免疫效果和野毒感染情况,本研究采用阻断ELISA方法对2017-2019年采集于凉州区的奶牛血清样品进行了O型、亚洲Ⅰ型、A型口蹄疫疫苗的免疫抗体检测和口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测.结果显示,凉州区奶牛O型、亚洲Ⅰ型、A型口蹄疫疫苗的免疫合格率分别为94.58%、92.95%、91.06%... 相似文献