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为建立以Balb/c小鼠为动物模型的 PCV-2疫苗免疫效力检验方法,选取4周龄 SPF级雌性Balb/c 小鼠20只,随机分成4组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组),每组5只,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别背部皮下1点,背部皮下2点和背部皮下、腿部肌肉2点接种 PCV-2疫苗0.1、0.2、0.2 mL/只,Ⅳ组空白对照组不接种;各免疫组分别于首免疫后7、14、21 d 加强免疫一次,免疫后7、10、14、21、28、35、42 d 采血分离血清,用 ELISA 方法测定PCV-2特异性抗体,确定最佳免疫途径和免疫剂量。另选取4周龄 SPF 级雌性 Balb/c 小鼠,随机分成免疫组、攻毒对照组和健康对照组,免疫组和攻毒对照组于二免后14 d 用 PCV-2强毒株进行攻毒,比较各试验组小鼠在临床症状、病理变化、相对日增重、PCV-2核酸载量等方面差异性,确定小鼠动物模型检测指标。抗体测定表明,一免背部皮下、腿部肌肉2点免疫0.2 mL/只,间隔21 d 加强免疫为最佳免疫程序,免疫后35 d 抗体水平达到峰值,显著高于Ⅰ和Ⅱ组。对照组小鼠免疫攻毒后出现消瘦、被毛凌乱、精神紧张等临床症状,淋巴结肿胀、出血、肺脏出血等病理变化,相对日增重显著降低,PCV-2核酸载量差异在103以上等临床变化。本研究以 Balb/c 小鼠为动物模型建立了 PCV-2疫苗免疫效力检验方法,优化了小鼠免疫途径及剂量,确定了相应的检测指标及技术参数,为 PCV-2疫苗免疫效力检验奠定了基础。 相似文献
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正灌注桩凭借其承载强度高、穿透力强、施工便捷、造价较低等优势,已经被广泛地应用于建筑工程的建设中。然而,由于建筑物基础施工面临着地质复杂性、岩土非均质性和工程隐蔽性的难题,再加上施工人员素质参差不齐,在灌注桩钻孔、清孔、混凝土灌注等施工过程中,常出现诸多问题,进而直接影响整个工程的质量。1.灌注桩施工质量控制流程1.1前期准备施工方案的审核。(1)根据地质报告研究、现场勘测结果、相关规范标准修正出 相似文献
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禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2蛋白表达、纯化及其间接ELISA方法建立 总被引:1,自引:0,他引:1
PCR扩增irp2主要抗原表位区,构建pET-32α-irp2表达载体,转化BL21(DM3)细胞诱导表达。以纯化irp2蛋白为抗原建立ELISA检测方法,确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液与封闭条件和临界值等参数,进行ELISA性能检测及应用。结果显示,PCR扩增出约519bp特异性irp2主要抗原表位基因,经菌液PCR、双酶切及DNA测序显示成功构建pET-32α-irp2表达载体。irp2目的蛋白获得有效表达,相对分子质量大小约34 500,亲和纯化后纯度达90%以上。Western blot显示目的蛋白irp2与抗血清在约34 500出现特异性显示条带。确定ELISA抗原包被质量浓度3.25mg/L、血清稀释度1∶80,封闭液为5%脱脂奶粉,封闭条件37℃1h+4℃10h,临界值为0.320。性能检测显示,其敏感性可达1∶5 120;与鸡白痢沙门菌、鸡传染性鼻炎、鸡霉形体、鸡巴氏杆菌、HPI-大肠杆菌等血清无交叉反应特异性,批内、批间变异系数分别为3.40%~6.71%和5.20%~8.44%;与PCR方法对124份血清平行试验其符合率93.8%;对1 425份临床血清样品irp2抗体阳性检出率37.4%。结果表明,建立了可检测血清中irp2蛋白抗体的间接ELISA方法,适用于临床血清样品进行快速抗体检测,为HPI大肠杆菌的流行病学调查和致病性大肠杆菌免疫机制研究奠定基础。 相似文献
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随着农业生产的迅速发展,大中型农业机械在社会和经济发展中起着越来越重要的作用,但有很多原因制约和影响着大中型农业机械的高效使用,如设备老化、结构单一、管理跟不上形势发展,技术水平落后等原因,那么,如何能高效使用大中型农业机械呢?本人认为应从如下方面入手: 相似文献
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星子县供电公司严格遵循电力要先行方针,牢记“真诚服务共谋发展”的服务理念,全力支持地方招商引资政策,把支持星子县旅游经济开发当成公司重点工作和重要任务,最大限度满足旅游经济发展的需求 相似文献
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试验旨在探究等干物质的青贮苜蓿替代苜蓿草粉对肉兔生长性能、养分表观消化率和抗氧化性能的影响。选取100只体重相近、(30±2)日龄的伊拉肉兔随机分为5组,分别为对照组(无青贮苜蓿)、A组(8%青贮苜蓿)、B组(12%青贮苜蓿)、C组(16%青贮苜蓿)、D组(20%青贮苜蓿),每组20个重复,每个重复1只。预试期5 d,正式试验期35 d。结果显示,与对照组相比,B组肉兔的平均日增重、末重以及对粗脂肪、酸性洗涤纤维、粗蛋白、粗纤维的表观消化率显著提高(P<0.05),料重比显著下降(P<0.05)。B组肉兔血清中以及肌肉中的丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05)。研究表明,使用一定比例等干物质的青贮苜蓿替代苜蓿草粉可以提高肉兔生长性能、养分表观消化率、血清与肌肉的抗氧化能力,替代比例为12%效果较好。 相似文献