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[目的]建立针对黏菌素耐药基因mcr-1的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法,为监控mcr-1基因携带细菌提供技术支持.[方法]针对mcr-1基因保守序列设计特异性引物和MGB探针,构建重组质粒作为阳性标准品,优化引物、探针浓度及Rox参比染料用量、退火温度等反应条件,建立针对mcr-1基因的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法,并通过特异性、敏感性、重复性试验及临床应用验证其实用性.[结果]TaqMan-MGB荧光定量PCR最佳反应体系20.00μL:Premix Ex TaqTM 10.00μL,Rox参比染料(50×)0.25μL,引物MCR-1F/MCR-1R(10μmol/L)各0.50μL,MCR-1-P探针(10μmol/L)0.50μL,重组质粒pMCR-1(模板)2.00μL,灭菌双蒸水6.25μL.扩增程序:95℃预变性20 s;95℃10 s,60℃20 s,进行40个循环.该检测方法能特异性扩增出mcr-1基因,其检测敏感性为2.85拷贝/μL,是常规PCR的100倍,组内和组间重复性试验的变异系数为0.37%~1.18%,均小于1.20%.采用建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR对82株广西鸡源致病性沙门氏菌分离株进行检测,结果未发现有携带mcr-1基因的菌株.[结论]针对mcr-1基因建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于临床筛查mcr-1基因,为监控mcr-1基因携带细菌提供技术支持. 相似文献
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<正>2008年10月9日涿州市某养鸡户饲养的5000只46日龄蛋鸡发病,鸡群减食,每天死亡4~6只,于是来我处就诊。1临床症状病鸡精神倦怠,呆立,不愿活动,两翅下垂,缩颈,眼半闭呈嗜睡状态,羽毛竖立无光泽,局部脱落或用手一摸即脱掉,肛门被绿色或黄白色粪便污染。在翼下、 相似文献
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旱作条件下披碱草属植物叶的生理生化特征分析 总被引:8,自引:6,他引:8
在无控制的野外旱作条件下,比较了披碱草属6种野生植物在内蒙古干旱与半干旱区生理生化特性,并对同一地区引种的不同种及分布于不同地区的同一种植物进行了对比分析。结果表明,材料XJE1和XJP5能够保持较好的水分状况,具有较高的相对含水量,而GSD4保水能力不及其他几种材料;BJT3和XJP5叶绿素含量较高,而GSD4叶绿素含量较低。渗透调节物质Pro以BJT3、XJP5和GSS2显著高于其他材料,而MDA含量以BJT3相对较高,比XJE1高近3倍;保护酶SOD活性以材料GSD4较高,其次为BJT3,GSS2较低,POD活性以XJP5较高,其次为BJT3,NMN6较低。经隶属函数综合分析发现,披碱草属6种植物中,除GSD4和NMN6之间隶属函数值差异不显著外,其他材料之间都比较显著,其隶属度值由大到小的顺序为XJP5>BJT3>XJE1>GSD4>NMN6>GSS2。并且来自同一地区的披碱草属2种不同植物的生理特征表现一定的趋同,而来自不同地区的同一种植物表现出一定适应性分化。这些结果都表明,植物为了适应不同的生态环境,各种生理生化指标都会进行相应的调节,共同起作用来保护植物免受伤害。 相似文献
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披碱草与老芒麦苗期抗旱性综合评价 总被引:3,自引:0,他引:3
盆栽模拟土壤干旱条件,对采自我国不同生境的披碱草(Elymus dahuricus Turcz.)与老芒麦(Elymus sibiricus L.)10份野生种质材料苗期形态学和生理生化指标进行研究,旨在了解干旱胁迫下苗期抗旱特征及其抗旱能力,为披碱草属种质材料抗旱新品种选育、种质资源的开发利用提供理论依据。结果表明,随干旱胁迫日数增加,植株高度、叶面积、相对含水量和叶绿素都明显下降,而电导率、脯氨酸、SOD和POD都明显上升。经抗旱隶属度分析,10份材料抗旱性可分为3类:第一类为相对抗旱,包括SXD1、XJD2、NMD3、NMD4、GSD5、GSS1和JLS2共7份材料;第二类为中等抗旱,包括NMD6和SXS3共两份材料;第三类NMS4为相对易感。经相关分析筛选出对抗旱性影响显著的指标为:相对含水量、叶面积、相对电导率和叶绿素含量。 相似文献
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石台县"猪-沼-茶"生态农业模式浅析 总被引:1,自引:0,他引:1
针对实施农业示范县的契机,提出了适合于石台县山区农村推广猪-沼-茶的生态模式. 相似文献
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内蒙古牧羊人酒业有限责任公司位于塞北名城呼和浩特市的金川高新经济技术开发区,占地1万多m^2。公司在内部实行的是以科、工、贸为一体,产、学、研相结台的现代经营管理模式。立足于发展地方农副产品和保护绿色生态环境,充分利用当地纯鲜牛奶原料,以高科技为依托,精工细作,从而酿造有深厚品牌化的奶酒系列精品。 相似文献
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近几年来,随着农牧业产业化战略的深入实施,呼和浩特市农业经济得到快速发展,农业结构不断优化,农民收入稳定增长。“伊利”,“蒙牛”,“牧星”,“兆君”,“华欧”等农字号品牌在国内和国际市场的声誉日益提高,这些龙头企业成为内蒙古牧业产业化发展的脊梁。 相似文献
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<正>针对临潭县农民专业合作社发展现状和存在的问题,通过分析研究,并提出具体的建议和对策,以期对农民专业合作社的合理发展、规划、管理、运作有所帮助,带动和促进地方农村经济发展。临潭,古称洮州,地处甘南藏族自治州东部,是农区与牧区、藏区与汉区的结合部。临潭是甘南州的一个农业大县,全县辖16个乡镇,141个行政村,农业人口13.72万人,耕地面积26.2877万亩,主要种植的农作物是小麦、青稞、豆类、油菜、 相似文献