基于PCR的两步法丝状真菌基因敲除方法

基因敲除是研究真菌基因功能的重要方法之一,目前,丝状真菌敲除多采用基因两侧的同源臂对基因组的靶标进行同源替换,然后采用抗生素对转化子进行筛选,但这存在着筛选效率低、假阳性率高、操作复杂等问题。本研究以稻瘟菌为研究对象,采取以下步骤对此进行优化:1)构建HPH-GFP(潮霉素-绿色荧光蛋白)融合表达载体; 2)分别用带有接头序列的引物克隆待敲除基因上、下游片段; 3)克隆上、下游片段与HPH-GFP组成嵌合体片段; 4)嵌合体片段转化真菌原生质体; 5)对敲除突变体进行筛选。结果表明,该法操作简便、高效,除了用潮霉素HPH作为筛选标记外,还可用GFP作为荧光筛选标记,极大提高了筛选效率,可用作丝状真菌基因功能研究。     

影响核桃嫁接成活的气象因素

决定核桃嫁接成活率高低的因素除砧木、接穗、酚类物质等自身因素外,还与气象因素中的湿度、温度、光照、降水、风有着密切关系。现将影响核桃嫁接成活的气象因素介绍如下。1湿度对嫁接的影响湿度条件包括嫁接本体含水量的高低、土壤湿度和空气湿度的大小。湿度适宜,嫁接容易成活。根据《果树嫁接新技术》,当“嫁接口周围相对湿度达70%~90%,满足嫁接口愈合萌发所需湿度条件,促进愈伤组织形成和提高嫁接成活率”。     

优质稻米高产栽培技术

为了使优质稻米得到高产丰收,结合黎平县德顺乡实际,从种子处理、苗床准备、播种、本田管理及病虫害防治等方面介绍了优质稻米生产与管理技术。     

茄子新品种驻茄15号的选育

驻茄15 号是以自交系P04-11 为母本，以高代自交系驻Q-25 为父本配制而成的中早熟绿茄一代杂种。植株生长势强，果实卵圆形，纵径15.0 cm 左右，横径10.6 cm 左右，平均单果质量0.52 kg，果皮绿色、光亮，肉质硬度中等，商品性好，一般每667 m² 前期产量1 100 kg 左右，总产量5 300 kg 左右，田间对青枯病、绵疫病、黄萎病的抗性强于对照郑研早青茄，适宜河南省及周边省份春、秋设施及露地栽培。     

浅析规模化猪场后备母猪不发情的原因及应对措施

新建的规模猪场面临的最棘手的问题就是后备母猪不发情。后备母猪不发情的比例越大,生产成本越高,要想降低生产成本最有效的措施就是降低后备母猪不发情的比例。一、后备母猪不发情的原因1.体况差,膘情不够。     

几种甘草黄酮含量测定方法的比较与评价

[目的]在以芦丁为对照品的4种甘草黄酮含量测定方法中,选择一种最适宜的测定方法。[方法]对4种方法的重现性进行比较,并对甘草提取液中总黄酮含量测定的结果与以甘草苷为对照品测得的结果进行比较。[结果]在以芦丁为对照品的4种甘草黄酮含量测定方法中,硝酸铝显色法重现性最好,且与以甘草苷为对照品测得的甘草黄酮含量的差异最小。[结论]硝酸铝显色法可作为一种切实可行的甘草黄酮含量测定方法。     

不同地区牦牛心肌、骨骼肌CCO、SDH活性测定

为了进一步从细胞分子水平探讨牦牛高原低氧适应的生物学机制以及为高原疾病的诊疗提供理论依据,试验采用酶联免疫法测定了青海省玛多县、泽库县牦牛的心肌、骨骼肌组织及其线粒体中细胞色素氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果表明:玛多牦牛心肌、骨骼肌线粒体中SDH活性均高于泽库牦牛,玛多、泽库牦牛骨骼肌线粒体中SDH活性差异显著(P<0.05),泽库牦牛心肌、骨骼肌组织SDH活性均高于其线粒体中SDH的活性,且差异极显著(P<0.01);玛多、泽库牦牛心肌、骨骼肌线粒体中CCO活性差异不显著(P>0.05),泽库心肌、骨骼肌组织中CCO活性显著或极显著高于线粒体中CCO的活性(P<0.05或P<0.01)。在高原低氧环境下,随着海拔的升高,牦牛心肌、骨骼肌组织及其线粒体中SDH活性增强,而CCO有氧代谢保持相对稳定的水平,表明牦牛对高原低氧环境具有显著的适应性。     

NaCl胁迫对黄心菜种子萌发及幼苗生长的影响

探究NaCl胁迫对黄心菜种子萌发及幼苗生长的影响,为筛选耐盐种质资源、培育优良品种提供依据。以淮南塌地乌3号为试验材料,在0(CK)、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4 mol·L^-1NaCl浓度下进行种子萌发及幼苗生长胁迫试验,分别测定其种子萌发和幼苗相关的表型与生理生化指标。结果表明,黄心菜种子的发芽势、发芽率、胚根长、胚芽长随着NaCl浓度的升高极显著降低,与黄心菜幼苗期相比,其发芽期对盐胁迫更为敏感;在幼苗期,随着NaCl胁迫浓度的增加,黄心菜的根鲜干质量、地上部质量、叶宽表现为低浓度促进生长、高浓度抑制生长。幼苗的叶长、株高、叶宽则显著低于对照且随着胁迫浓度的增加逐渐降低,SPAD值呈现先显著增加后降低的趋势,MDA含量、脯氨酸(Pro)含量均显著高于对照,POD活性显著高于对照且呈现显著升高而后逐渐降低的趋势。综上所述,0.05 mol·L^-1NaCl显著抑制黄心菜种子的发芽率与发芽势的升高,但对黄心菜胚芽生长有显著促进作用。NaCl胁迫处理浓度大于0.2 mol·L^-1时显著抑制幼苗的地上部鲜质量、干...     

上海率先基本实现农业现代化的重要途径--"信息农业"研究

采用文献分析、实证研究和理论研究相结合的方法，探讨了上海发展信息农业与率先基本实现农业现代化的关系，分析了上海发展信息农业的基础条件和存在问题，提出了上海发展信息农业的决策建议，论述了建设上海农业信息系统的构思，可供有关部门参考。     

奶牛四胃变位的诊断及治疗

<正>1四胃变位病简介四胃变位病在临床上分为左方变位、右前方变位、右后方变位、活动性变位4种类型。临床上以左方变位和右后方变位多见,其他两种少见。所以本文主要讨论左方变位和右后方变位。