辣椒脉斑驳病毒的多基因联合检测与鉴定

【目的】辣椒脉斑驳病毒（Chilli veinal mottle virus,ChiVMV）是辣椒生产上危害严重的病毒,也是口岸检疫的重要病毒之一。本文旨在建立一种快速检测ChiVMV的多基因联合检测方法,实现ChiVMV的快速、准确鉴定。【方法】利用DAS-ELISA、RT-PCR方法对印度进境辣椒进行检测以确定是否携带有ChiVMV。根据ChiVMV外壳蛋白（coat protein,CP）和圆柱状内含体蛋白（cytoplasmic inclusion protein,CI）保守区域分别设计引物,筛选两个基因（CP和CI）的特异性引物组合,通过设定不同的引物用量组合以及对退火温度等条件进行优化,探索最佳的反应条件,建立多基因联合检测方法。利用建立的多基因联合检测体系对包含ChiVMV在内的辣椒病毒进行检测,以验证该体系特异性。同时对ChiVMV阳性样品的不同浓度cDNA进行扩增,测定其检测灵敏度。此外,对田间辣椒样本进行检测,以验证体系的实际应用效果。【结果】通过对印度进境辣椒的DAS-ELISA检测,发现样品提取液与ChiVMV呈阳性反应;利用CP861-F/CP861-R特异性引物对进行RT-PCR,扩增出与预期大小相一致的特异性片段,确认该批辣椒样品携带有ChiVMV。多基因联合检测体系中,应用引物对CP337-F/CP337-R、CI655-F/CI655-R分别扩增出长度为337、655 bp的特异性目的片段。经优化后的反应体系和程序为cDNA 2 μL、CP337-F/CP337-R各0.625 μL（10 μmol·L^-1）、CI655-F/CI655-R各1.375 μL（10 μmol·L^-1）、2×PCR Master Mix 12.5 μL、ddH₂O 6.5 μL,退火温度50℃,共35个循环。建立的多基因联合检测方法具有良好的特异性和灵敏度,两个基因检测灵敏度均为10^-4数量级。实际应用检测结果表明,该方法可从感染ChiVMV的样品中同时扩增出CP和CI的特异性目的片段。【结论】建立的多基因联合检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,可为辣椒脉斑驳病毒的快速检测提供可靠的技术支持。     

不同配方复合肥对籼粳杂交稻化肥减量增效的探索

为了解不同水稻配方复合肥在籼粳杂交稻(‘甬优12’)上的化肥减量增效效果,选择当地常用的4种水稻配方复合肥,以常规施肥为对照,在化肥总养分均减少10.2%的条件下,探索其对水稻的节本增效。结果表明:综合水稻生育表现、经济性状及产量,施用水稻配方专用肥(16-10-14),水稻生育表现佳,化肥成本减少16.90%,增产1.76%,对水稻化肥减量增效效果最好,适合在当地进行推广应用;施用复合肥(20-12-14),水稻综合表现次之,节本增效效果不显著;施用复合肥(22-6-12),水稻综合表现较差,节约的肥料成本不抵减产产值;施用复合肥(15-10-17),水稻综合表现最差,肥料成本上升,产量也下降。     

野莴苣的形态特征研究

本文比较了野莴苣(Lactuca pulchella(Pursh)DC.)及其近似种毒莴苣(L.serriola L.)、乳苣(Mulgedium tataricum(L.)C.A.Mey.)的植株形态特征和瘦果形态特征,结果表明野莴苣植株可通过植株叶片形态、小花颜色和数量以及总苞片层数来加以鉴别;野莴苣瘦果可通过喙形状、纵肋数、瘦果表面刺毛形状、长度以及刺间距、千粒重等方面进行鉴别,并提供野莴苣重要鉴别特征描述和图片,以期为我国口岸检疫人员提供技术参考。     

减量施肥条件下生物有机肥对丝瓜产量与抗病性的影响

减量施肥条件下,在丝瓜上开展生物有机肥应用效果试验。试验结果初步表明:施用鑫丰田宝生物有机肥对丝瓜植株前期生长有较强的促进作用,丝瓜的藤蔓长度和叶片数,较同期常规施肥增115%以上和增40%以上,能够有效改善丝瓜商品性状;在商品有机肥和化肥减量50%的前提下,施用鑫丰田宝生物有机肥能够增加丝瓜产量16.0%,综合效益增加18 217元·hm^-2;但完全不施商品有机肥和化肥,施用鑫丰田宝生物有机肥会造成丝瓜减产。同时,试验还发现:施用鑫丰田宝生物有机肥能够提高丝瓜抗土传病害的能力,大幅降低发病率。     

越南火龙果中杰克贝尔氏粉蚧的检疫鉴定

福建出入境检验检疫局多次从越南进口的火龙果中截获粉蚧活虫,为了快速、准确的鉴定到种,选用通用引物LCO1490/HCO2198扩增该虫的COI序列,得到698 bp的基因片段,与Gen Bank和BOLD Systems v3系统中已发布的DNA序列进行比对,初步确定种类后,再查阅文献资料,利用形态学进行复核,最终确定该粉蚧为杰克贝尔氏粉蚧(Pseudococcus jackbeardsleyi GimpelMiller)。     

抗TMV的植物筛选及提取条件对抗病毒物质活性的影响

对26种植物样品进行了抗病毒(TMV)活性测定。结果表明,不同植物提取物对TMV侵染心叶烟的抑制效果不同,其中莲、榕树、柿子、杨梅、水蜈蚣、叶下珠、羊蹄甲和菊花对TMV的抑制率在90%以上;对高活性抗病毒植物莲叶而言,抗病毒物质的活性因提取溶剂和提取方法的不同而异,水作为溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率仅约为70%,而以甲醇和体积分数95%的乙醇作溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率约在98%以上;用体积分数95%的乙醇为溶剂,采用索氏提取、回流提取和冷浸提取时,所得提取物对TMV的抑制率均为100%。冷浸提取的优化条件是:以体积分数95%的乙醇为提取溶剂,料液比20∶180(1∶9)提取12h。     

余杭市城郊型农业发展途径探讨

分析了作杭市发展城郊型的农业的有利条件，探讨了发展城郊型农业的六种主要途径，提出了发展城郊型农业的四点思考。     

入侵生物飞机草在中国的适生区预测

以飞机草生存的6个气候参数为基础,选择湛江作为评估的基点,结合中国划分的18个不同气候大区的代表城市的气候特征,通过计算欧氏距离系数,得出各气候大区与基点间的气候相似程度,采用层次分析法,结合气候资料与农业气候相似等级判定标准,分析飞机草在中国适生区情况,并结合气候大区划分飞机草在中国的适生区及非适生区.结果表明,海南、广东、广西、云南、台湾、西藏的部分地区为飞机草的适生区,而福建、贵州部分地区为飞机草的次适生区,北方大部分地区为非适生区.     

稻鸭共育水稻免耕直播方式试验

采用不同直播方式的稻鸭共育试验.结果表明:不同直播方式下实施稻鸭共育,均能取得较好的增产、节本、增收效果,其中以条直播和机械点播方式的买施效果相对较好.