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鸡传染性支气管炎病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立及应用 总被引:1,自引:1,他引:0
为定量检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)载量,建立IBV的Real-time RT-PCR方法.用RT-PCR方法扩增出IBV的N基因片段,并克隆到pEASY-T3载体中,构建成含有N基因片段的重组质粒.应用该重组质粒进行SYBR Green I Real-time PCR,建立了定量检测IBV核酸的标准曲线与直线回归方程,该方法显示:特异性强,检测下限至少达到5.58× 102拷贝/μL,其重复性试验的变异系数小于3.2%;用建立的方法对实验接种IBV M41株的雏鸡组织中的病毒核酸进行了定量检测,检测结果显示:攻毒后肾脏中IBV含量高于支气管和肺脏,支气管和肺脏中病毒含量在攻毒后第3天高于攻毒后第7、10天,并证实临床表现与病毒载量之间存在密切关系.研究结果表明,建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于IBV的定量检测. 相似文献
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[目的]优化出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullulans)PA-2菌株产孢发酵培养基和发酵条件,以提高PA-2菌株的产孢量,为该菌的开发和生产应用提供理论依据.[方法]以PA-2菌株发酵液中的产孢量为检测指标,采用单因子优化PA-2菌株发酵培养基和最佳发酵条件,通过中心组合设计(Central composite design,CCD)筛选培养基成分最佳配比;用PA-2菌株制成可湿性粉剂用于杂草藜田间防除试验.[结果]经优化后,PA-2菌株产孢最佳培养基配方为葡萄糖84.60 g/L、大豆粉46.35 g/L、NaCl 2.59 g/L、MgSO40.52 g/L、KCl 0.78 g/L、K2HPO46.50 g/L、(NH4)2SO40.52 g/L;最佳发酵条件为pH 7、温度25℃、装液量60 mL/250 mL、转速180 r/min、接种量8%、培养时间120 h.田间防除试验结果表明,PA-2可湿性粉剂对杂草藜的鲜重防效最高可达75.0%.[结论]优化后的培养和发酵条件可有效提高PA-2菌株的产孢量,降低发酵成本,适合发酵放大试验及相关剂型的开发研究;可采用PA-2菌株生产菌剂应用于杂草防除. 相似文献
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[目的]优化超声波辅助提取野拔子净油的工艺条件,并分析其在卷烟中的应用效果,为野拔子在卷烟中的进一步应用提供参考依据.[方法]以野拔子为原料,通过单因素试验和正交试验优化超声波辅助乙醇提取净油的工艺条件,并进行成分分析;将野拔子净油添加至卷烟中,通过卷烟感官评价筛选最佳添加量.[结果]超声波辅助提取野拔子净油的最佳工艺条件为:提取温度50℃,提取时间40 min,料液比1:9,超声波功率500 W,各因素影响排序为提取温度>超声波功率>料液比>提取时间;经气质联用仪分析鉴定,野拔子净油共鉴定出40种成分,主要含有脱氢香薷酮(28.641%)、3,3-二甲基丙烯酸(9.080%)、5-甲基-2-乙酰基呋喃(4.790%)、芳樟醇(4.224%)、3-甲基-2-(5H)-呋喃酮(3.642%)、氧化芳樟醇(3.079%)、香薷酮(1.436%)、新植二烯(1.031%)等挥发性物质.将野拔子净油应用于卷烟中,具有丰富和协调烟香,能提高香气质,改善吃味,使烟气柔和细腻及减刺除杂等作用,且以3 mg/kg添加量为宜.[结论]优化条件下超声波辅助提取的野拔子净油对提升卷烟吸食品质有良好效果,可用于卷烟加香和品质的提升. 相似文献
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为解决凭借人工经验方式对小桐子种子品质进行筛选效率较低、主观性强、错误率高且实时性差等问题,采用数字图像处理技术对小桐子种子图像进行分析,针对其特征对图像进行了R,G,B彩色分量的算术运算融合,采用形态学开运算进行消噪处理,并根据OTSU方法进行自适应的阈值选取将图像处理成二值图像,利用LOG算子实现了图像的边缘提取,且通过计算得到了小桐子种子的部分形态特征参数值.结果表明,与人工分割的方法相对比,90幅具有不同摆放方式的小桐子种子图像的平均分割误差不超过0.63%,最大分割误差为1.07%,均方误差σ不超过0.006 4,能较为准确地实现小桐子种子图像的背景分割和参数检测. 相似文献
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通过对大荔县农业土壤490 个采样点的pH值、有机质、全氮、碱解氧、有效磷、速效钾等基本元素进行检测,利用Microsoft Excel 2010 软件将数据进行统计和处理,对土壤养分中的上述元素做出一个描述性概括,结果发现:大荔县农业土壤以碱性为主;有机质含量属于中度缺乏状态,全氮则是轻微缺乏状态;碱解氮则属于较缺乏状态;有效磷含量则是中等偏低;速效钾的含量为适量偏丰富。从测定结果中可知道,大荔县农业土壤可采用改变土壤酸碱性、加大氮肥和磷素的投入量来提升土壤肥力,从而提高农作物产量和品质。 相似文献
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[目的]掌握固定化螺旋藻的最佳条件和固定化螺旋藻对人工污水中N、P的吸收效果。[方法]利用海藻酸钠对螺旋藻进行固定化处理,P含量的测定采用钼锑抗光度法,N含量的测定采用纳氏试剂分光光度法。[结果]以2%海藻酸钠为载体制作固定化胶球形状规则,不粘连;1%的海藻酸钠溶液所制作的胶球强度较低;3%的海藻酸钠制作的胶球成球速度较慢。随着海藻酸钠及氯化钙浓度的增加,胶球强度也有所增加,但传质速率下降。因此,试验选择3%的CaCl2和2%的海藻酸钠进行固定化。固定态螺旋藻的生长明显滞后于悬浮态螺旋藻,但其生长周期更长。在悬浮状态下,螺旋藻对氮磷的去除率达到最大值,分别为35.3%和34.6%。在固定状态下,螺旋藻对氮和磷的最大去除率分别为45.2%和56.3%。[结论]螺旋藻固定化处理后能显著提高其对氮磷的吸收能力,可以作为一种商业化处理污水的生物吸附剂。 相似文献