猪瘟与蓝耳病混合感染的实验室诊断

1发病概况2010年9月9日发病的2个自然村寨共有猪261头,病94头,死亡45头,发病率为53.2%,死亡率为47.8%。2临床及剖检表现本次猪病约在8月中旬开始发病,传播迅速,用抗生素等治疗无效,或治疗后采食好转,但过1～2天后又发病,以架子猪发病率较高,病程短,     

基于线粒体16S rRNA全序列分析我国绵羊痒螨兔亚种的遗传多样性

为了探讨我国绵羊痒螨兔亚种的遗传变异特征和种群结构,利用PCR技术对我国5个地理区域(华北、华东、华中、西南、西北)的83个绵羊痒螨兔亚种株的线粒体16SrRNA全序列进行扩增和遗传多样性分析。结果显示,83个样品的16SrRNA全序列长度均为1 025bp,共存在83个变异位点和52个单倍型;样品所代表的5个地理区域种群间的Fst值为-0.037 59~0.587 63,基因流值为-6.900 7~31.117 62;进一步用NJ树和单倍型网络图分析显示,52个单倍型构成2个大的分支,但却呈现出杂乱的分布格局,即地理区域、温度带和兔的品种特征性种群结构不显著。我国绵羊痒螨兔亚种的遗传多样性较高,遗传分化不明显,尚未形成地理种群结构。     

细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及诊断价值的初步评价

探究细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的基本特性并初步评价其诊断价值,旨在为细粒棘球绦虫的防控提供依据。本研究原核表达出Eg-cystatin重组蛋白并对其进行生物信息学、免疫印迹分析,用荧光免疫定位的方法检测该蛋白质的分布情况,并以绵羊细粒棘球蚴阳性血清评价Eg-cystatin重组蛋白的诊断价值。结果如下:Eg-cystatin生物信息学分析结果显示,该蛋白质含有一个N端信号肽以及cystatin结构域,是典型的2型半胱氨酸蛋白酶抑制剂,进化树分析显示Eg-cystatin属于绦虫cystatinⅡ型,并且与其他绦虫的cystatin相似性为72.20%~80.66%,免疫荧光定位发现该蛋白质主要分布在原头蚴的表皮和顶突钩,生发层,成虫虫体内部和虫卵。基于Eg-cystatin建立的间接ELISA方法的特异性为79.1%,敏感性为83.3%,与剖检符合率为81.25%。Eg-cystatin在成虫和幼虫时期均有表达,提示该基因与虫体生命活动息息相关,但Eg-cystatin蛋白不适合作为绵羊细粒棘球蚴病的诊断抗原候选。     

钟山区月照乡城郊农业现状的调查

根据中央、省、市、区建设社会主义新农村的总体部署和市委、市政府关于全面推进四在农家创建活动的总体要求,为扎实推进该创建活动及加快发展乡村旅游,推进城郊型农业发展,提高农村劳动者素质,丰富农民精神文化生活,改善农村人居环     

台湾次睾吸虫成虫体被的扫描电镜观察

台湾次睾吸虫１５日龄成虫经扫描电观察,虫体整个背面和腹面前４／５的体表皮层着生有鱼鳞状的簇生体棘,簇生体棘在虫体前端分布较密集,由前向后渐变稀疏,每一个簇生体棘中含３－６个尖刀形棘。口盘上有１５－１８个无纤毛圆丘型乳突,腹吸盘唇部光滑无乳突分布,但在其周围可见到１０余个花蕾状乳突。     

基于线粒体12S基因对青海地区细粒棘球蚴种群遗传多态性研究

本研究旨在分析青海地区细粒棘球蚴的种群基因多态性,为细粒棘球蚴病的防控提供基础资料。对采自青海地区的42株细粒棘球蚴(33株采自绵羊肝脏,9株采自绵羊肺脏)进行了线粒体12S基因的全序列测序并构建了NJ系统发生树。结果显示:在本研究样品的线粒体12S基因序列中共检测出5种单倍型(即H1～H5),其中以单倍型H5为主(占32株),并且系统发生树分析支持这一结果。单倍型多样性(H)和核苷酸多样性(Pi)分别为0.418、0.000 66,与E.granulosus G1(AF297617)的12S基因序列的核苷酸相似性达到99.86%以上。采自青海地区的42株细粒棘球蚴均鉴定为E.granulosus sensu stricto(基因型G1-G3),在检测出的5种单倍型中,单倍型H1～H4是本地区特有的单倍型。     

绵羊痒螨重组精氨酸激酶诱导兔皮肤嗜酸性粒细胞的聚集

本研究旨在探究绵羊痒螨精氨酸激酶(arginine kinase of Psoroptes ovis,PsoAK)对兔皮肤嗜酸性粒细胞聚集的影响。以永生化角质形成细胞(HaCaT)和痒螨致敏兔分别为体外模型和体内模型,重组PsoAK(rPsoAK)分别刺激HaCaT细胞和皮内注射痒螨致敏兔后,采用RT-qPCR检测重组蛋白处理后HaCaT细胞和注射部位兔皮肤组织中与嗜酸性粒细胞聚集相关因子(IL-4、IL-5、IL-13、TSLP、IL-25、IL-33、CCL5、CCL11、IL-4R)转录水平,以及通过变色酸2R特殊染色观察,并统计兔皮肤组织中聚集的嗜酸性粒细胞数量。结果表明,与空白和载体蛋白对照组相比,0.1μg·mL^-1 rPsoAK可显著促进HaCaT细胞中IL-13、IL-33、CCL5和CCL11转录水平的增加(P<0.05),以及兔皮肤内IL-4R和CCL5转录水平的增加(P<0.01),其他因子无显著变化(P>0.05);同时,与PBS和载体蛋白对照组相比,rPsoAK可诱导皮肤中嗜酸性粒细胞的数量极显著增加(P<0.00...     

长角血蜱保护性抗原基因P27/30的克隆和原核表达

采用RT—PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27／30基因,扩增序列全长670bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23．38ku。同源性分析表明孤雌生殖长角血蜱中国株与日本株P27／30基因同源性高达99．85％。经RT—PCR检测分析,该基因在孤雌生殖长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饥饿成蜱和饱血成蜱这几个阶段均有表达。将该基因亚克隆后连接到pET32a（＋）原核表达载体,转化BL21（DEa）宿主菌,经IPTG诱导可成功进行表达。表达的目的蛋白大小为24ku左右,与预期大小一致;Western-blot显示兔抗长角血蜱全虫抗体能够识别该重组表达蛋白。     

豆状带绦虫六钩蚴Tp-dUTPase基因的表达及血清学诊断效果

采用PCR方法从豆状带绦虫六钩蚴中扩增得到Tp-dUTPase基因编码区,构建了pET32a-Tp-dUTPase原核表达载体,以重组蛋白dUTPase作为包被抗原建立的兔豆状囊尾蚴病Dot-ELISA诊断方法对226份兔血清进行了检测。结果显示,Tp-dUTPase基因编码区长447bp,编码148个氨基酸,表达的重组蛋白相对分子质量为36 200,该重组蛋白能与家兔豆状囊尾蚴病阳性血清特异性结合。以重组蛋白Tp-dUTPase作为包被抗原建立的Dot-ELISA诊断方法显示有较高的特异性（85.7%~92.9%）和敏感性（86.4%~88.0%）,与其他种类兔寄生虫病阳性血清有较低的交叉反应。结果表明,纯化的Tp-dUTPase重组蛋白可作为兔豆状囊尾蚴病的诊断抗原。     

异恶唑啉类新型广谱杀虫药——氟雷拉纳

氟雷拉纳(fluralaner)是一种新型广谱兽药,属于异恶唑啉类杀虫剂,是神经元中配体门控氯离子通道的有效抑制剂,对哺乳动物神经元和节肢动物神经元具有显著的选择性.与其他同类杀虫剂相比,该药在分子结构、作用位点、选择性以及交互抗性等方面均有显著的差异,具有对哺乳动物安全、杀虫活性较高等特性.近年来,该药已被应用于犬、...