牛血清白蛋白与Indo-1相互作用时构象变化的荧光光谱法分析

系用荧光光谱及吸收光谱法证明了牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)与荧光探针Indo-1共存时二者能够发生相互作用,并用同步扫描荧光光谱法研究了BSA与Indo-1相互作用时构象变化的情况,考察了溶液的酸度对二者相互作用的影响.结果表明,荧光探针Indo-1在与BSA相互作用时未引起该蛋白质构象的变化,认为Indo-1可作为荧光探针用于诸如BSA这样的蛋白质与其它配体相互作用的荧光光谱法研究.     

本科生“科研大讲堂”课程的设计和实现

读研已经成为大学生未来人生发展的主要选择之一,但很多本科生对考研及以后要进行的科研活动等方面还存在很多不清楚的地方,以至于一部分学生出现跟风考研、考上后无法适应科研环境等各种问题。针对上述问题,以提高本科生对考研及科研的认识为目的,文章以调查问卷的形式论证了开设“科研大讲堂”课程的必要性,对该课程内容的设计进行了详细阐述,介绍了该课程的教学方法及具体实现形式,对该课程开设中还存在的一些问题进行了探讨,并给出了解决方案。     

高原夏菜尾菜资源化利用现状及建议

随着甘肃省高原夏菜特色蔬菜产业快速发展,高原夏菜尾菜处理已成为限制蔬菜产业健康绿色发展亟需解决的新问题。本文分析了甘肃省蔬菜种植情况、高原夏菜尾菜资源化利用技术现状及存在的问题,并提出了尾菜处理的建议,旨在为高原夏菜尾菜资源化利用提供参考。     

DNA提取前处理方法对太岁里层样品中 细菌种群结构的影响

为了评价不同DNA提取前处理方法对太岁里层样品中细菌种群结构的影响,并解析优势结构,对太岁里层重复取样,在提取细菌DNA前,分别施以水浸提(SI1)、浸提后热溶解(SI2)、直接热溶解(SI3) 3种不同前处理,同时与微孔滤膜过滤相结合,在高通量测序后以操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)为基础深度分析细菌种群结构。结果表明,SI1、SI2和SI3的Shannon指数分别为2.96、3.10和3.08,OTU数目分别为891、964和1 095个,共有OTU 313个,其序列之和占总序列的96.02%。细菌种群在各分类水平上的数目互有差别,SI1最少,优势种群高度集中于假单胞菌属(Pseudomonas)和不动杆菌属(Acinetobacter),所占比例之和超过60%。其中,假单胞菌属独占42.30%～56.35%,较之前研究结果变化最大。OTU的分布和丰度在不同取样位置间不均衡。3种前处理方法测得的细菌结构近似,但以SI3测得的假单胞菌属中丰度最高OTU,在总序列中所占比例最高,为41.14%。     

啶氧菌酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

[目的]筛选可高效降解啶氧菌酯的微生物资源,并研究其降解特性,为啶氧菌酯等甲氧基丙烯酸酯类农药残留的微生物修复提供新资源.[方法]采用富集培养法分离啶氧菌酯降解菌,以生理生化特征结合16S rRNA序列系统发育分析鉴定降解菌;利用气相色谱仪(HPLC)测定啶氧菌酯残留量,分析其降解特性;采用气相色谱质谱联用仪(GCMS)测定降解菌降解啶氧菌酯的中间代谢产物,分析降解菌降解啶氧菌酯的代谢途径.[结果]分离获得一株能以啶氧菌酯为唯一碳源的降解菌株(PY3),其生理生化特征结合16S rRNA序列系统发育分析结果表明,PY3菌株属沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris).PY3菌株最佳生长条件测定和降解特性分析结果表明,PY3菌株生长和降解啶氧菌酯的最佳条件为pH 6.0、35℃,在最佳降解条件下培养11 d,对50 mg/L啶氧菌酯的降解率可达72.0%.PY3菌株降解啶氧菌酯的途径包括苯环和N杂环间氧桥键断裂后酯化,以及苯环和N杂环开环反应.[结论]沼泽红假单胞菌PY3菌株具有高效降解啶氧菌酯的活性和较广的pH和温度耐受性,且具有应用于农田生态环境中啶氧菌酯等甲氧基丙烯酸酯类农药残留物微生物修复的潜力.     

pCB-zeolin-GFP表达载体的构建及瞬时表达

为利用荧光蛋白基因GFP检测外源基因在转基因植株中的表达和定位,构建含有GFP基因的植物表达载体pCB-zeolin-GFP。在目的基因的开放阅读框（ORF）两端设计引物,并引入酶切位点和保护碱基,用PCR方法从pDHA扩增得到zeolin基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI1302植物表达载体,经回收、连接、转化、鉴定后,利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞,通过共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白在洋葱表皮细胞中的瞬时表达。构建了zeolin基因与绿色荧光蛋白（GFP）融合的植物表达载体pCB-zeolin-GFP,并在洋葱中得到了表达。构建的融合植物表达载体pCB-zeolin-GFP正确,该载体的成功构建为今后进行基因转移、基因功能研究及培育新品种奠定了基础。     

石油污染土壤降解细菌的分离、鉴定及生长条件优化

为研究石油污染土壤的微生物修复效果,从大庆油田受石油污染的土壤中分离得到特征明显的3株石油降解细菌（编号18、H、21）,这些菌株能以石油为唯一碳源生长,试验通过形态学鉴定以及分子生物学鉴定方法明确了这3株细菌的种属,分别为氧化微杆菌,节细菌和芽孢杆菌。采用单因素试验设计对试验菌株在无机盐培养基中的生长条件进行初步探讨,研究pH值、盐浓度、氮源、磷源等因素对菌株生长的影响。结果表明：H菌株的最适生长条件：pH=7,盐浓度为3%;18菌株的最适生长条件：pH=8,盐浓度为3%;21菌株最适生长条件：pH=7,盐浓度为1%。H、18、21菌株的最适氮源分别为KNO3、NH4NO3、NH4Cl。H菌株的最适磷源K2HPO4：KH2PO4为1:2（双磷源）,18菌株的最适磷源是K2HPO4,21菌株的最适磷源为K2HPO4。     

CRISPR/Cas9介导的绵羊胎儿成纤维细胞肌肉生长抑制素基因敲除研究

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因突变可引起动物出现"双肌"性状,提高产肉性能。利用CRISPR/Cas9技术制备MSTN基因敲除的绵羊胎儿成纤维细胞,为制备MSTN基因敲除羊提供材料。设计构建4个靶向MSTN基因的CRISPR/Cas9载体,脂质体转染细胞后,通过SURVEYOR分析和测序等方法对敲除效率进行检测,采用极限稀释法挑选稳定敲除的细胞系。试验成功构建了4个靶向MSTN基因的CRISPR/Cas9载体,细胞转染后,测序结果显示pX330-target 1和pX330-target 4载体作用的靶位点处出现突变,SURVEYOR分析检测其在靶位点产生切割的效率分别为24.20%和10.18%。通过极限稀释法,获得12个MSTN基因突变的细胞克隆,其中1个为纯合突变。序列比对发现靶位点处有小片段碱基插入或缺失突变,部分会出现移码突变。成功利用CRISPR/Cas9系统实现了绵羊MSTN基因敲除,证明该系统可有效应用于绵羊基因编辑,产生的突变细胞系为制备MSTN基因敲除羊提供了材料。     

2009年规模化猪场三种主要疾病免疫情况的统计与分析

近几年,我国的规模化养猪得到了迅猛发展,品种得到快速更新,集约化程度进一步提高,环境保护越来越得到重视,然而疾病问题始终制约着我国规模化猪场的生产力,疾病种类繁多,病毒性疾病感染严重,病原变异速度快,疾病传播迅速,致病力始终很强,导致种猪生产性能在低水平徘徊,商品猪出栏率较低。2006年发生的高致病性蓝耳病（PRRS）给我国养猪业造成巨大的经济损失,猪群始终未能摆脱蓝耳病的巨大威胁.