正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库构建及EST初步分析

【目的】构建猪淋巴细胞基因文库,初步绘制正常猪外周血淋巴细胞的基因表达谱,为进一步筛选免疫相关基因提供平台。【方法】以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与质粒载体连接后转化大肠杆菌,进一步扩增后,获得猪外周血淋巴细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合,并进行序列分析和注释。【结果】构建了正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库,获得库容量为1．2×10^6PFU／mL、重组率为93．3％、85％插入片段处于750～2000bp的高质量文库;随机测定1100条ESTs,经拼接和聚类,获得152条高表达的基因重叠群（Contigs）和619条低表达基因——单拷贝的EST（Singletons）;经序列比对分析,发现23．3％ESTs为与任何物种都没有匹配的新基因,75．9％ESTs为与猪没有匹配的新基因。用GO数据库对获得的EST进行基因功能分类和KEGG路径图分析,发现丝裂原活化蛋白激酶途径（Mitogenn—activated protein kinase,MAPK）、钙信号通路、胰岛素信号通路、脂肪细胞因子信号通路、Toll—like受体信号通路、B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路的基因均有较高表达。【结论】大部分的猪外周血淋巴细胞基因尚未被分离和鉴定出来,但这些基因mRNA转录和表达丰度均较高,且在猪外周血淋巴细胞中起着非常重要的作用。     

三维动画制作中虚拟现实技术的应用研究

在三维动画制作中运用虚拟现实技术可进一步提高动画质量,是确保动画真实可信的必要条件。在信息时代,依靠服务平台带来的快速技术创新是一种突破和挑战。因此,必须掌握技术创新的方向,确保动画制作质量的提高。尤其是虚拟现实技术的应用,可以提高动画的真实性,成为三维动画制作过程中的一大助力工具。分析虚拟现实技术在三维动画制作中的应用,为三维动画制作提供参考。     

狂犬病病毒GX074野毒株M基因重组病毒的拯救与鉴定

为了探究狂犬病病毒M蛋白功能区域对其生物学特性的影响,本试验将狂犬病强毒GX074株和弱毒rRC-HL株的M基因进行比对,运用反向遗传技术以弱毒rRC-HL株为母本,将强毒GX074株的P基因和部分M基因替换至rRC-HL株相应位置,构建出重组病毒的全长感染性cDNA克隆,并成功拯救重组病毒;经过RT-PCR扩增测序检测、测定多步生长曲线。结果表明,拯救的重组病毒序列与预期一致,其生长趋势与亲本毒株rRC-HL相似,复制增殖能力高于亲本强毒株。在前24 h重组病毒滴度高于亲本毒株rRC-HL,48 h后由于重组病毒引起严重细胞病变死亡,病毒滴度上升幅度减缓。与强毒株GX074、CVS相比,重组病毒复制能力明显高于强毒株,且重组病毒可引起细胞病变,而强毒株不引起细胞病变。     

不同基因型狗牙根耐镉及镉富集特性

狗牙根(Cynodon dactylon)作为我国南方重金属污染区的优势种,在污染土壤的修复过程中有巨大的应用潜力。本研究利用水培试验,分析了10个狗牙根基因型生长指标的变化、耐镉能力及镉吸收转运特征。结果表明,1.5mmol·L~(-1)镉胁迫条件下,狗牙根各基因型均表现出生长缓慢、叶片失绿、根系生长不良等受害症状。不同基因型的受害程度差异较大,其中,基因型WBD242、WBD245和WBD193的受害程度较轻。综合评价结果表明,这3个基因型对镉具有很强的耐受性,且其地上部积累的镉离子浓度分别高达119.0、177.0和124.2mg·kg~(-1),均高于超富集植物的标准(地上部分富集镉超过100mg·kg~(-1)),可用于高浓度镉污染土壤的植物修复;基因型WBD144和WBD147具有最高的转移系数,但是耐镉能力较弱,可用于轻度镉污染土壤的植物修复。研究结果为镉污染土壤的植物修复与植被重建提供了新的材料和理论基础。     

公共图书馆地方文献排架问题刍议——以陕西省图书馆地方文献收藏中心为例

以陕西省图书馆地方文献收藏中心等的具体排架为例,对目前图书馆地方文献排架问题进行了分析．并提出了有效的地方文献排架方法。     

数据库和人工智能在质谱检索中的应用

本系统把人工智能和质谱解析过程有机地集成起来，建立质谱数据库，利用多种化学计量学算法对复杂数据进行解析，并采用新的质谱匹配算法，有效地降低解析过程的复杂性和提高了解决实际问题的能力。     

笼养蛋鸡的常见病防治

常见于高产蛋鸡，产蛋旺季最容易发生。症状表现：初期双腿关节软痛，有不明显的肿胀和跛行，无力久站，随后脱水，体重下降，并伴发软骨组织增生而引起骨骼变形，尤以肋软骨最明显，严重者胸肌出现萎缩，胸廓     

论色彩要素在网页页面设计中的运用

我们生活中充满了色彩,色彩让我们的生活变的多姿多彩,五光十色。色彩是客观的,却不断引起人们的情感,让人们产生一系列心理活动,也使得人们对不同色彩的喜好各不同,当然,也会对一些色彩产生厌恶的感觉,这就使得色彩具有了情感色彩。色彩是视觉冲击力超强的设计要素,是网页页面设计中的重要要素之一,它能引起浏览者在情感上产生共鸣,让网页页面充满生机。     

饲料添加大豆磷脂对大菱鲆生长及血脂水平的影响

以鱼粉和大豆浓缩蛋白作蛋白源,配制5种等氮等能的饲料。5种饲料分别含有0%、0.5%、1.0%、2.0%和3.0%的大豆卵磷脂以替代相同水平的油脂(鱼油∶豆油为1∶1)。经51d的生长试验,结果表明,饲料中不同水平大豆卵磷脂对大菱鲆(15.74±0.48g)的成活率、特定生长率、饲料效率和血清甘油三酯均无显著影响,但随着饲料中大豆磷脂水平的升高,特定生长率和饲料效率有升高的趋势、血清甘油三酯有下降的趋势。同时,随着饲料中大豆磷脂水平的升高,血清总胆固醇呈显著下降趋势(P<0.05)。     

正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库部分EST序列的电子克隆及验证

【目的】探讨从EST序列电子克隆全长基因序列的有效性,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供新方法。【方法】以正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库测序所得的EST序列作为起始材料,应用生物信息库对文库中的部分EST序列进行电子克隆,并用RT-PCR验证其准确性。【结果】电子克隆正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库序列,共获得20条片段重叠群（Contigs）,经基因注释,证实其均得到了有效延伸,具有完整开放阅读框（ORF）,其中已知的猪基因序列14条,猪新基因序列6条;从已知猪基因序列和未知猪新基因序列中各抽取1条感兴趣序列（EST contig110和EST contig133）进行全长cDNA预测,发现电子克隆所得序列EST contig110和EST contig133的预期扩增片段（ORF）与实际扩增片段（ORF）基本一致,核苷酸相似性在98.0%以上,氨基酸相似性在93.0%以上。而对EST contig133的ORF序列（猪的60S核糖体蛋白L18a亚基）进行基本特性及结构预测,发现ORF133蛋白为非分泌型蛋白,由6个折叠和6个螺旋结构组成,含有8个不同的磷酸化位点。【结论】从EST序列电子克隆全长基因是可行的,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供了参考。