烟草不同叶位多酚含量及相关酶活性变化的研究

为分析烟叶在生长过程中的次生代谢物质动态变化特征、相关酶的活性变化规律,以3个烤烟种植试验点的烤烟为研究对象,研究不同叶位烟草叶片多酚类物质含量、抗氧化活性和表达量。结果表明,同一个采样点中,不同叶位烟叶多酚类物质含量表现为上叶位中叶位下叶位。不同叶位烟草叶片PAL、PPO、C4H和4CL活性以上叶位最高。通过多酚体外抗氧化测定,表明不同叶位多酚对DPPH和羟基自由基有一定的清除能力。荧光定量PCR检测发现,PAL基因和PPO基因在上叶位中的表达显著高于其他叶位。烤烟生长过程中的次生代谢物质动态变化,相关酶的活性变化及基因表达水平与烟叶成熟度存在一定的关联。     

矮生型杜梨的生物学特性观测

矮生和矮化是梨属植物省力化栽培研究的重点之一。在前期资源考察中发现了1株梨矮生型种质,新梢长度和节间距极短,与野生型杜梨和豆梨差异达到极显著水平。为更好地开展梨矮生性状研究,对其生物学特性进行了观测,发现梨矮生种质的枝条、叶片、花和果实的形态特征与杜梨极为相似,推定其植物学归属为杜梨种,命名为QN-109。矮生杜梨QN-109生长期约85 d,有2个生长高峰期,高接后新梢年生长量为30.36 cm;花粉形态学特征正常,具生活力,可自交结实。野生杜梨种质的形态学特征聚类分析证实了矮生杜梨QN-109和起源地杜梨亲缘关系最近,推测矮生变异为自然实生变异。本研究将为梨属植物矮生资源的利用奠定基础。     

应用MGB荧光探针技术确定猪KIT基因拷贝重复数

旨在建立一种简便、快速检测猪KIT基因拷贝重复数(CNVs)的方法并应用于未知样品的检测。在KIT外显子2中设计TaqMan-MGB探针和引物,建立荧光实时定量PCR检测KIT基因CNVs的方法。结果表明,TaqMan-MGB探针扩增KIT基因目的片段,不同DNA梯度浓度Ct值差异极显著(P<0.001),变异系数低(0.12%～0.26%);KIT与内标基因ESR的扩增效率相差只有2.4%;采用聚类分析推测了待测的50枚样品KIT的CNVs分别归属于2、3、4、5、6个拷贝。本研究建立的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测KIT基因CNVs的方法,具有简便、快速、特异性和稳定性好的特点,适合于普通实验室应用。     

艺术苹果的制作技术

根据不同品种苹果的成熟期，一般在采收前30-40天还未着色时进行，套袋的果实在去袋后制作，不宜太早也不能过迟。操作时间应选择在温暖晴朗的上午。     

钦北区强化农村家犬免疫促进狂犬病的防控

正狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科的狂犬病病毒(Rabies virus, RABV)侵入中枢神经系统(Central Nervous System, CNS)引起的一种高度嗜神经性急性致死性人兽共患传染病,也称"恐水症",俗称"疯狗病",可导致包括人在内的几乎所有温血动物死亡。狂犬病呈世界性流行,WHO估计全球每年约5.9万人因该病死亡,其中95%人患狂犬病由疯狗咬伤引起[1]。亚洲每年有1 100万人被犬咬伤,中国是受该病危害最严     

早春保护地辣椒栽培技术

早春大棚、小拱棚辣椒栽培是目前保护地栽培效益较好的种植方式,666.7m2效益多数在万元左右,一般比秋大棚效益要好许多。笔者经多年的实践,总结出了早春保护地辣椒栽培配套技术,现介绍如下。1品种选择品种选择是栽培成败的关键。应选择熟性早、耐低温、株型紧凑、结果集中,连续结果能力强,抗病性强,丰产性好,尤其是前期产量高的品种。生产实践证明:豫艺墨秀大椒、墨玉早椒,墨秀三号、金富9号、金富600、墨玉五号泡椒等品种均具备早熟性好,大果,前期产量高的特性,种植后效益较好,是早春保护地栽培的优良品种。2培育适龄壮苗2.1育苗时间春大棚栽培一般在10~11月中下旬育苗,春小拱棚一般在12月中下旬育苗。2.2苗床与营养土的准备育苗前首先要准备好营养土,一般选用无菌菜园土和含有丰富有机质的土杂肥,并加入少量的腐熟有机肥,具有土质疏松、排水良好等特点。营养土配好后,即可放入苗床内,摊平整齐后准备播种育苗。2.3浸种催芽一般每栽666.7m2辣椒需种量为50g,需苗床5m2。可采用温汤浸种,浸6~8h后再用清水洗净,放于25~30℃条件下催芽,使种子保持不干不湿的状况,3~4d露白播种。2.4播种播种前将苗床浇足底水,水渗下后再...     

正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库部分EST序列的电子克隆及验证

【目的】探讨从EST序列电子克隆全长基因序列的有效性,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供新方法。【方法】以正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库测序所得的EST序列作为起始材料,应用生物信息库对文库中的部分EST序列进行电子克隆,并用RT-PCR验证其准确性。【结果】电子克隆正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库序列,共获得20条片段重叠群（Contigs）,经基因注释,证实其均得到了有效延伸,具有完整开放阅读框（ORF）,其中已知的猪基因序列14条,猪新基因序列6条;从已知猪基因序列和未知猪新基因序列中各抽取1条感兴趣序列（ESTcontig110和ESTcontig133）进行全长cDNA预测,发现电子克隆所得序列ESTcontig110和ESTcontig133的预期扩增片段（ORF）与实际扩增片段（ORF）基本一致,核苷酸相似性在98.0%以上,氨基酸相似性在93.0%以上。而对ESTcontig133的ORF序列（猪的60S核糖体蛋白L18a亚基）进行基本特性及结构预测,发现ORF133蛋白为非分泌型蛋白,由6个折叠和6个螺旋结构组成,含有8个不同的磷酸化位点。【结论】从EST序列电子克隆全长基因是可行的,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供了参考。     

2000——2019年广西狂犬病病毒流行株的基因组遗传稳定性分析

[目的]揭示广西狂犬病病毒(RABV)的流行变异规律及进化特征,为广西狂犬病防控提供科学依据.[方法]对2018年从患狂犬病家犬脑组织分离获得的2株RABV野毒株(GXYZ2018和GXSL2018)进行全基因组扩增与测序,测序结果采用SeqMan进行拼接以获得全基因组序列,并与近20年来的RABV广西流行株进行系统地遗传变异分析.[结果]GXSL2018株和GXYZ2018株的全基因组序列长度均为11923 bp,不同RABV广西流行株间的核苷酸序列同源性在87.1%~99.4%,而2株毒株间的同源性为99.1%;与其他RABV广西流行株相比,GXSL2018株和GXYZ2018株的3'-UTR为69 bp,且在第20位缺失一个核苷酸.基于N基因和G基因核苷酸序列同源性构建的遗传进化树均显示GXSL2018株和GXYZ2018株同属于Group II型毒株,且2株毒株N蛋白上的B细胞表面抗原表位(第358~367位氨基酸残基)、Th细胞表位(第404~418位氨基酸残基)和RNA结合域(第298~352位氨基酸残基),以及G蛋白上与病毒毒力密切关联的第333、336、339和357位氨基酸残基及中和抗体相关表位和受体结合位点均高度保守.[结论]GXYZ2018株和GXSL2018株同属于Group II型毒株,与近20年来的RABV广西流行株高度相似,病毒蛋白主要功能区的氨基酸序列高度保守,尚未发生变异,全基因组遗传特性稳定.     

飞行检查在兽医工作中的应用

正兽医工作涉及社会公共安全(重大动物疫病、人畜共患病等)、畜产品质量安全等与市民生活息息相关。力保兽医工作不出或少出问题,就要求我们依法行政,创新方法,依法监管。开展飞行检查,也是依法监管的一种有效形式。下面结合我们的实际工作,简要谈谈飞行检查在兽医工作中的应用。一、飞行检查在兽医工作中的应用意义飞行检查最早应用在体育比赛中对运动员兴奋剂的检查。也就是在非比赛期间进行的不事先通知的突击性兴奋剂抽检。在当前情况下,兽医工作特别是畜产品质量安全,如"瘦肉精"监管等成为高危环节。开展飞行检查,在被检查单位不知情的情况下,可以真实了解被监管单位安全监管情况,发现需要改进的问题,可以说是行动快、效果好的办法。     

小鼠抗病毒基因viperin的原核表达及其抗原性探索

Viperin是一种由Ⅰ型和Ⅱ型干扰素诱导的宿主蛋白,在进化上高度保守。本研究以小鼠脑组织为原材料,通过RT-PCR扩增得到包括完整open reading frame（ORF）的1 155 bp的viperin基因序列,成功亚克隆并构建了原核表达载体pET-32a-vip,将其转化到大肠杆菌Rosetta中进行原核表达。结果表明：原核表达的重组蛋白viperin主要以包涵体的形式表达,用镍离子亲和层析法获得纯度较高的viperin蛋白,为探讨原核表达的viperin抗原特性,将纯化的viperin蛋白免疫4周龄昆明小鼠,制备得到抗viperin多克隆抗体。经Western blot和IFA检测,该抗体能与真核细胞自然表达的viperin反应,特异性良好且效价高,表明原核表达的viperin具有良好的抗原性。获得的多克隆抗体为进一步研究viperin的抗病毒生物学功能奠定了良好的基础。