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本研究旨在通过克隆猫源C11orf96(Felis catus C11orf96,fC11orf96)基因,并制备其多克隆抗体分析该基因在细胞中的定位。以猫肾细胞cDNA为模板克隆fC11orf96基因,并利用无缝重组连接成功构建重组质粒pET-32a (+)-fC11orf96-Fe。随后将重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达fC11orf96-Fe重组蛋白,并利用该重组蛋白制备多克隆抗体。最后利用Western blot及间接免疫荧光试验分析多克隆抗体的有效性及其细胞定位。结果表明,成功获得猫C11orf96基因CDS序列,全长372 bp,可编码124个氨基酸,表达的fC11orf96-Fe蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白大小约49 ku。由该重组蛋白制备的多克隆抗体能够识别细胞内源性fC11orf96蛋白和外源真核表达蛋白,并且发现fC11orf96蛋白定位于细胞质。本研究成功克隆得到猫C11orf96基因,并且fC11orf96蛋白定位于细胞质,为后续研究C11orf96的生物学功能奠定了基础。 相似文献
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土壤pH值对烟草根茎部病害的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
对湖北咸丰烟区8个烟草站所辖的38个植烟村80份土壤样品pH值和烟草根茎部病害进行调查,结果表明:咸丰烟区土壤整体呈酸性,pH值<5.6的样本比例高达62.5%;土壤pH值与烟株是否发生根茎部病害之间存在显著相关;酸性土壤样本所占比例较高,未发病烟田为48.78%,发病烟田达69.23%;强酸性(pH值<4.4)、中性和碱性土壤(pH值>6.5)有利于抑制根茎部病害的发生;山地土抗根茎病能力最强,样本无病率达100%,各类型土壤抗病性大小依次为:山地土>黄沙质棕壤>黄壤>沙质棕壤>水稻土,除山地土外其他各类型土壤样本根黑腐病的发病率均较高,均超过85%,其中黄沙质棕壤和水稻土发病率达到100%;青枯病在黄沙质棕壤发病最严重,发病率达到100%,沙质棕壤发病率80%,黄壤发病率不到60%,山地土发病轻微. 相似文献
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