PDCoV与TGEV双重实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

试验旨在建立快捷、高效而准确的鉴别诊断猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）与传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）的双重实时荧光定量PCR方法。通过绘制双重实时荧光定量PCR的标准曲线,检验该方法的特异性、敏感性和重复性,并对临床样品进行检测。结果显示,双重实时荧光定量PCR方法的循环阈值与PDCoV和TGEV质粒拷贝数的对数之间存在良好的线性关系,且对应的相关系数分别为R_（P）²=0.9994和R_（T）²=0.996;能特异性地检测PDCoV和TGEV,而与PEDV、PRV、PRRSV、CSFV和RV无交叉反应,具有较强的特异性;检验PDCoV与TGEV质粒标准品的最低检测限度分别达到2和20拷贝/μL,且分别比常规RT-PCR高1 000和100倍,具有较高的敏感度;PDCoV与TGEV的批内和批间重复性检测的Ct均值基本相同,且变异系数（CV）均<2%,具有较好的重复性。用该方法对114份仔猪腹泻样品检测结果显示,PDCoV和TGEV的阳性率分别为5.6%（6/114）和8.8%（10/114）,混合感染检出率为4.6%（5/114）,比常规RT-PCR具有更高的检出率和敏感性。结果表明,本试验建立的双重实时荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏度高、重复性和稳定性好等优点,适用于病毒早期诊断和批量临床样品检测,为疾病防控、流行病学调查及相关性研究提供了技术支持及数据参考。     

猪德尔塔冠状病毒CH7328株的致病性及全基因组序列分析

为了解猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV） CH7328株的致病性,并分析其基因变异和遗传演变规律,试验通过病毒培养、间接免疫荧光试验（IFA）、病毒生长曲线及仔猪致病性试验鉴定病毒的生长特性和致病性,并分析该毒株的全基因组序列。结果显示,感染PDCoV CH7328株的ST细胞出现肿大变圆、细胞呈碎玻璃状且拉丝、细胞集聚成簇和脱落等病变。IFA结果显示,PDCoV CH7328株主要分布在细胞质中。生长曲线结果显示,PDCoV CH7328株在6 h就已开始增殖,在36 h时达到峰值,对应的TCID₅₀为10^-8.0/mL,随后逐渐下降。仔猪致病性结果显示,攻毒组仔猪出现腹泻、脱水和厌食等临床症状,仔猪小肠明显变薄、透明而充盈,小肠绒毛严重脱落、萎缩或减少、肠绒毛细胞坏死等。粪便病原检测结果显示,在攻毒第2天便能检测到病毒,之后排毒持续增加,而正常对照仔猪无任何临床现象。全基因组测序及序列分析显示,PDCoV CH7328株的基因组全长为25 420 bp,与国内GD株的相似性最高,达到99.9%;遗传演化结果显示,PDCoV CH7328株与国内HKU15-155、CHN-HN-2014和GD株处在同一进化分支,亲缘关系最近。本研究结果为中国PDCoV疫苗候选株的筛选及猪场疫病防控提供了参考数据和理论依据。     

基于海绵城市理念下的绿色居住区景观设计策略

过去很长一段时间内,我国的城市发展牺牲了自然环境和自然资源。因此,我国自然环境污染程度严重,自然资源匮乏现象日益显著。为了改善城市建设及人民群众的居住环境,开始尝试使用新型材料及新型设计方式,进行更加绿色的居民居住区设计,海绵城市理念应运而生。     

论玉米机收面临的困难及发展对策

小麦、玉米是我市的两大主要农作物。近几年我市小麦的播、收机械化水平已达到很高程度，王米的播种机械化程度也有所提高，但是玉米的机械化收获水平还相当低，成为制约玉米全程机械化作业的一个难题。我们遵化市自1997年开始推广玉米机械收获，但至今收效甚微．还处于相当低的机械化水平。     

不同利用方式对紫色土理化性质的影响

以三峡库区紫色土为对象,研究了稻田、果园、菜田和人工林地等4种不同土地利用方式对土壤理化性质及土壤总团聚体和水稳性团聚体的影响。结果表明,稻田土壤的土壤容重最低、孔隙度最大、田间持水量最大;而林地土壤的孔隙性和持水性最差。>0.25mm总团聚体以菜田最高,稻田最低;>0.25mm水稳性团聚体数量表现为:菜田>林地=稻田>果园(P<0.05);稻田土壤pH值、有机质和全氮含量最高,明显高于果园、菜田和人工林地,稻田土壤碱解氮含量明显高于果园和人工林地(P<0.05),土壤全磷、有效磷和速效钾含量以果园最高,林地最低。     

中国蔬菜生产发展简况

蔬菜产业在中国农业中占有重要地位。首先，蔬菜是人民生活消费的重要副食品之一。随着人民生活水平的提高，人民对蔬菜的消费需求正在从量的增长转向对质的追求。其次，蔬菜产业是农业乃至国民经济的重要组成部分。蔬菜产值在农业总产值中的比重超过10％。     

玉米机收面临的困难及发展对策

玉米是我们遵化市两大主要作物之一 ,但至今玉米收获机械化水平还很低 ,成为制约玉米生产机械化的一个难题。一、我市玉米收获现状我市当前玉米收获基本形式是人工摘穗、人工打秸、运输回家 ,这是多年沿用的习惯。玉米机械收获是从1997年开始试验推广的 ,在市财政的支持下 ,我局投资近 2 0万元购买了一台 4Ｙ— 3型布谷牌玉米联合收获机和一台单行玉米收获机。两台玉米联合收获机在秋收作业时 ,日收获 4 0亩( 1亩 =667ｍ2 ,下同 ) ,竟要 10人为其服务 ,效益之低让人汗颜。究其原因 ,除玉米种植模式不适应机收外 ,机手素质低和机械内在质量差…     

流感病毒种内与种间传播的影响因素

A型流感病毒具有相对的宿主特异性,病毒在种内和种间的传播案例经常发生.对于某一特定宿主,病毒的感染受到诸多因素影响,包括病毒、宿主和环境因素等.本文对影响流感病毒种内和种间传播的因素进行概述.     

重让山林染青翠——一个非煤矿山景观的恢复实例

北京首钢建材化工厂的采石区山体景观破坏较大,通过边坡绿化和生态景观构建逐步恢复了其原有面貌,为探寻非煤矿山景观治理途径提供了有益实践。     

控释肥对马铃薯产量、氮素利用率及经济效益的影响

通过田间小区试验,研究了不同控释肥处理对马铃薯产量、氮素利用率和经济效益的影响,以期为控释肥在马铃薯生产中的施用和马铃薯专用控释肥生产的改进提供科学依据。结果表明,与普通肥料相比,控释肥处理的各项指标均有显著提高,其中产量平均提高了8.35%,氮素表观利用率平均提高了26.75%,产投比平均提高了39.56%。减量控释肥（80%常规量）处理的氮素利用率、产投比与常规量控释肥处理相比分别提高22.43%、13.71%。增钾处理的产量和增收率最高,与其他控释肥处理的均值相比,分别提高5.55%、7.37%,为此试验中的最优处理。