芜菁花叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

本文报道采用反转录酶—聚合酶链式反应，体外扩增芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）外壳蛋白基因及其克隆，并在大肠杆菌中获得表达的结果；从抗州市郊区感病的油菜上分离到一株致病力极强的芜菁花叶病毒分离物，提纯后，经５０ｎｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ和０．５％ＳＤＳ处理，苯酚／氯仿和氯仿抽提两次，酒精沉淀，获得了纯化的病毒ＲＮＡ，该ＲＮＡ与ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１５）退火后，在ＡＭＶ反转录酶的作用下合成了单链ｃＤＮＡ，然后加入用以扩增ＴｕＭＶ－ＣＰ基因的上下游引物，３５个循环后，得到了一条长约０．８５ｋｂ的片段，将该片段克隆到ｐＵＣ１８质粒的ＳａｌⅠ限制性酶切位点，分析了限制性酶切图谱，分析表明该片段含有ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ以及引物设计时带人的ＭｃｏⅠ三个酶切位点，该片段克隆到大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）原核表达载体ｐＫＫ２３３－２质粒的ＮｃｏⅠ和ＨｉｎｄⅡ位点后，经ＩＰＴＧ诱导，以该病毒的抗血清为第一抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测该基因的表达产物，结果表明该基因的表达产物为ＴｕＭＶ－ＣＰ蛋白，因而认为所获得的扩增片段确为芜菁花叶病毒外壳蛋白基因。     

如何做好农机安全生产管理的具体措施

<正>随着农机化进程的不断加快,农机安全生产是国家安全生产重点行业和领域之一,是全社会安全生产的重要组成部分。抓好农机安全生产,对维护广大农民群众的切身利益,促进农村经济发展、农村社会和谐平安,维护社会稳定,推动农机化科学发展具有重要的意义。近年来,农业机械数量大量增加,各级政府、农机部门对农机安全生产工作更加重视,但是还应该清楚的看到,在广大农村,大量的农业机械无牌无证行驶、不参加年度安全技术检验、超期服役、违     

宁夏旅游生态观光牧场建设的探讨

旅游生态观光牧场集现代畜禽养殖示范、科普宣传、休闲观光体验于一体,是现代畜牧业的示范窗口,是新形势下畜牧业培育新动能、创造新业态、实现一二三产业融合发展的有效手段。基于旅游、生态、休闲度假需求的视角,分析建设现代生态观光牧场的重要意义。并以宁夏银川市兴庆区万亩奶牛园区为例,提出"旅游、生态、观光"的开发理念。通过对牧场内休闲度假产品的建设,促进传统观光休闲旅游逐步过渡到休闲度假旅游。     

一种高效的免用采精器（非热水浴式）和人工授精器的制作

介绍一种简单高效的非热水浴式兔用假阴道式采精器和兔人工授精器械的制作方法。该方法使用简单的材料制作兔采精用假阴道输精器械。结果显示，该法制作方便，无需热水浴，精液采出率高、采精量较稳定，效果优于热水浴式。使用证明能够适应体型较大的实验兔，如：日本大耳兔、新西兰兔、青紫兰兔，及体型较小的宠物兔（荷兰垂耳兔）的精液采集和人工授精工作。     

茶树高密度播种短周期速效栽培技术

本技术利用茶籽高密度播种 ,实行茶叶的短周期生产 ,收到了当年播种 ,当年收益 ,第 2年高产的效果。显著提高茶叶内质 ,减少化学污染 ,是高档有机茶叶生产的有效途径     

东方田鼠精子及冷冻复苏精子体外受精的研究

本文采用Nakagata法,对东方田鼠精子及冷冻复苏后的精子进行体外培养、体外受精,结果显示:东方田鼠精子浓度约为106～108个·μL-1,精子活力冷冻前约为20%～80%,冷冻后约为1%～50%,精子经冷冻复苏后的体外受精率为10%～50%,与冷冻前的体外受精率80%～95%相比,差异显著。     

姜堰市2012年水稻品比试验研究

为探索适合姜堰种植的综合性状表现较好的水稻品种,从有关科研育种单位征集了27个水稻新品种(系)进行田间比较试验.结果表明,早熟晚粳扬粳4227、扬粳4038、南粳5055可在姜堰市通南地区扩大推广.     

猪细小病毒(PPV)_(S-1)A株弱毒疫苗接种豚鼠的抗体反应

三批PPVs-1A弱毒苗接种豚鼠20只,接种后一周开始产生抗体反应,第五周全部出现抗体反应。HI抗体持续时间至少10个月。弱毒苗分A、B两组接种HI阴性豚鼠共8只,接种HI阴性猪共4只。猪在免疫后一周HI全部阳性,一个月平均HI价1024;豚鼠免疫后四周全部阳性,35天平均HI价395,豚鼠与猪阳性率相符。弱毒苗在4℃保存11个月,-20℃14个月后接种豚鼠,全部产生抗体反应。     

循证医学数据库及检索

 

简要说明了循证医学数据库的组成及特色，详细介绍了循证医学数据库的检索方法。