人β-防御素3基因的克隆分析及其真核表达载体的构建

根据Genebank上的公布的人β防御素3基因序列设计引物,以提取的人DNA为模板进行PCR扩增,得到全长为1391bp的人β防御素3完整基因组序列,包括起始序列、信号肽序列,两个外显子、一个内含子以及上下游酶切位点和终止密码子等。与NCBI上公布的DNA序列的同源性达到99.93%,在内含子上有一个A的缺失,其编码氨基酸序列与公布序列的同源性达100%。将其克隆到pMD18-T载体中,进一步构建了其真核表达载体pcDNA-hBD3,为其表达和功能研究奠定基础。     

鸭腺病毒3型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立鸭腺病毒3型(duck adenovirus 3,DAdV-3)一种基于SYBR Green I染料的荧光定量PCR诊断方法,本试验根据DAdV-3基因组序列中相对保守的Fiber-2基因,通过普通PCR扩增,构建pMD19-Fiber2重组质粒为阳性标准品,在此基础上设计合成特异性引物进行实时荧光定量PCR方法的建立,对其灵敏性、特异性和重复性进行评价,并初步应用于临床样本检测。结果显示,针对DAdV-3的Fiber-2基因建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法线性关系良好,相关系数0.998 9;检测DAdV-3的灵敏度为3.6×10² copies/μL,敏感性比普通PCR检测方法高100倍;该方法对鸭腺病毒1型、鸭疫里默杆菌等其他常见病原均无交叉扩增反应,批内、批间变异系数均小于5%;临床样本检测与普通PCR符合率100%。以上结果表明,所建方法特异性强、敏感性高且重复性好,适用于临床检测,该方法可为DAdV-3的临床诊断、流行病学调查以及防控提供技术支持。     

牧野湖浮游植物时空分布及水质分析

2012年9月至2013年8月,按月对牧野湖的水质及浮游植物群落结构开展了初步调查。共发现浮游植物87属147种;其中,黄藻门和隐藻门各6种,金藻门和甲藻门各4种,绿藻门57种,裸藻门23种,硅藻门29种,蓝藻门18种。2012年秋季到2013年春季浮游植物密度在7 400×104~9 100×104个/L,2013年夏季最高,为16 000×104个/L。秋、冬、春季密度较高的为绿藻和硅藻,所占比例:秋季绿藻32.2%、硅藻23.9%,冬季绿藻39.2%、硅藻24.5%,春季绿藻40%、硅藻51.7%;夏季密度较高的种群是蓝藻,占83%。湖区秋、冬、春、夏季Shannon多样性指数分别为1.3、1.27、1.06、0.48,Pielou均匀度指数也从0.35下降到0.175,表明从2012年秋季到2013年夏季牧野湖的水质是不断下降的。皮尔逊相关分析表明,湖区浮游植物的平均密度与Chl-a、CODCr、水温显著正相关(P0.05);与TN、TP、NH+4-N也有一定的正相关性,但未达到显著水平;与SD、NO-3-N之间有一定的负相关,但未达到显著水平。     

郑州市田园综合体发展模式创新及实现路径

近年来郑州市因经济增长快,城乡居民收入不断增加,对生态农产品与休闲观光旅游的需求不断增长,郑州市农业特色产业发展迅速,人文与地貌景观多样,文化底蕴深厚,田园综合体具有广阔的发展前景。建议郑州市各县市区依托当地特色产业、特色景观与特色文化,发展林果、设施农业、渔业、人文景观与文化载体模式田园综合体,加强田园综合体的运营管理。对田园综合体进行科学规划,建设市级试点,完善保障机制,提高农业科技含量,做强特色产业集群,实现田园综合体快速发展的目标。     

鲁西黄牛成纤维细胞MSTN基因敲除研究

肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)又称GDF-8,属于转化生长因子超家族,是在骨骼肌中广泛表达的一类糖蛋白。试验根据已知牛MSTN基因的序列设计引物,通过PCR技术克隆获得同源长短臂,利用pPNT质粒为骨架构建含有loxP-Neo-loxP结构的打靶载体,然后利用脂质体转染鲁西黄牛成纤维细胞,G418和GANC双向筛选,收集打靶细胞,PCR法进行鉴定,初步确定筛选到的细胞为MSTN基因敲除细胞,为后续试验获得MSTN基因敲除牛奠定了基础。     

大棚春提早黄瓜高产栽培技术

<正>大棚黄瓜春提早栽培的目的是提早供应,解决早春淡季黄瓜供应问题。在北方地区一般在1月中上旬至2月上中旬播种、育苗,4月上中旬至7月下旬供应市场。     

南美白对虾土塘淡水健康养殖的技术模式

凡纳滨对虾是淡水养殖的新宠。本论文总结了在明光潘集镇土塘利用女山湖水系成功养殖南美白对虾的技术模式和效益分析,期望为内陆水域南美白对虾养殖提供参考。     

辽宁省优质食味稻米生产现状及发展对策

当前,发展优质食味稻米生产具有必要性和紧迫性.辽宁省作为我国主要的优质粳稻生产基地,具备发展优质食味稻米生产的基础和良好条件,但也存在着优质高食味品种应用面积小、稻米产业与市场对接程度差、配套栽培技术普及到位率低等问题.应充分利用辽宁省水稻生产区位优势和资源优势,加强优质食味水稻品种育种攻关,优化品种应用布局,完善栽培...     

安徽省不同地理种群草地贪夜蛾对Bt蛋白的敏感性

为明确安徽省不同生态区草地贪夜蛾 Spodoptera frugiperda田间种群对不同转Bt玉米的敏感性,于2020—2021年采用饲料药膜法比较不同地理种群对Bt蛋白Cry1Ab和Cry1F的敏感性。结果显示, 2020年, Cry1F蛋白对草地贪夜蛾各地理种群的活性普遍好于Cry1Ab蛋白, Cry1Ab蛋白对无为、埇桥、太和及长丰种群的LC₅₀分别为537.60、 484.84、 474.18和93.37 ng/cm²,而Cry1F蛋白对这4个种群的LC₅₀分别为274.74、 48.52、 44.44和10.64 ng/cm²,均低于Cry1Ab蛋白; Cry1F蛋白仅对宿松种群的LC₅₀ （61.81 ng/cm²）略高于Cry1Ab蛋白 （LC₅₀为54.97 ng/cm²）。2021年, Cry1Ab蛋白对无为、太和及长丰种群的LC₅₀分别为235.62、 107.76和26.33 ng/cm²,与2020年相比分别下降了56.17%、 77.27%和71.80%;而Cry1F蛋白对这3个种群的LC₅₀分别为236.84、 76.88和24.85 ng/cm²,与2020年相比, Cry1F蛋白对无为种群的LC₅₀下降了13.79%;而对太和及长丰种群的LC₅₀分别上升了73.00%和133.55%。表明Cry1Ab和Cry1F蛋白对草地贪夜蛾各地理种群均具有一定活性,可用于草地贪夜蛾的防治。     

江苏中部地区3个种猪场主要疫病的调查及应对方略

为了解江苏中部地区种猪场主要疫病流行情况,笔者于2010年对泰州1个种猪场、滨海2个种猪场进行现场走访、采集血清样品和病料样品分别作血清学检测和病原学检测,为下一步猪群疫病的防制决策提供科学依据.报告结果如下.