鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5片段的克隆及表达

从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80 0时仍为阳性     

养鸡、种稻轮作提高农田效益的尝试

<正> 养鸡、种稻轮作是指在农田放养优质三黄鸡与种植单季晚稻结合,在一块农田,一年内进行种养轮换。这种种养轮换方式既改善了农田土壤,降低了种粮生产成本,又有利于降低养鸡防病用药成本,提高单位农田面积的经济效益,是实现农业生产良性循环的较好模式,也是实现农业增效,农民增收的有     

油桃引种观察及栽培技术

我们从1994年开始从事油桃品种的引种筛选及相关栽培技术研究工作,先后从山东省果树研究所引进油桃品种40余个,已初选出几个比较适应浙江省杭州地区气候条件的油桃良种,并在杭州市桐庐、富阳、临安、余杭、建德等地得到一定的发展.现将其适地优良品种特性及栽培技术简介如下.     

饲料安全与动物福利

我国饲料工业从2 0世纪80年代起步,从无到有,已发展成为国民经济的支柱产业,年产量已达70 0 0万t,总产值突破130 0亿元。我国成为仅次于美国的世界第二大饲料生产国。饲料工业的发展大大促进了养殖业的水平提升。畜禽、水产品的生产已开始由数量型向质量型、环保型转变。但是目     

"智能监控管理"在种鸡大棚笼养小区的应用

余姚市舜丰畜禽养殖有限公司通过安装图像实时监控系统、电脑温湿度监测系统、自动喷雾降温系统等措施，实现种鸡大棚笼养小区的“智能监控管理”，不但解决了持续高温天气环境温度控制问题，而且员工的劳动生产率提高，种鸡疫病发生率也有所下降，经济效益显著。现把有关情况介绍如下：     

狼山鸡保种群不同世代MHC BF基因遗传多样性研究

通过Illumina平台Miseq重测序方法分析不同世代(G0、G5、G10、G12、G14、G15、G17)的MHC BF1和BF2基因座位多态性,揭示狼山鸡不同世代间MHC BF基因遗传多样性,为更好地监测保种效果提供科学的决策依据。在狼山鸡7个世代中分别鉴定出MHC BF1、BF2基因59和34个SNPs。狼山鸡MHC BF1基因观察杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)在G10、G12、G14保持稳定,Ho在不同世代变化情况为G17G15G14、G12、G10G5G0,He和PIC在不同世代变化情况为G17、G15G14、G12、G10G5G0,MHC BF2基因的Ho在G10、G14、G15保持稳定,其他世代变化情况为G17、G12G15、G14、G10G0、G5;He和PIC在G12、G14、G15和G17保持稳定,在其他世代变化情况为G17、G15、G14、G12G10G5、G0。从本研究结果看,狼山鸡不同世代MHC BF1和BF2遗传多样性变化规律不太一致,但总体规律符合波动选择(时空变换的选择)假说,随着时间的推移MHC BF基因遗传多样性变得更为丰富,在某些连续几个世代群体遗传多样性基本保持稳定,这可能与MHC BF基因功能有关。     

嗜吞噬细胞无浆体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立荧光定量PCR方法检测嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum),针对GenBank A.phagocytophilum 16S rRNA基因保守序列(JN558815),设计1对引物1-25F/183-205R。以已知引物EE1/EE2和该引物进行巢式PCR扩增出预期大小片段(205bp),构建含有16S rRNA基因的重组质粒,以质粒为模板构建了标准曲线。以1-25F/183-205R为荧光定量PCR引物,建立A.phagocytophilum荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验和临床样本检测。结果表明,该方法在6.4×10~3~6.4×10~8 copies/μL相关系数为0.99,显示出良好的线性关系;所建方法能特异地检出A.phagocytophilum,对绵羊无浆体、牛无浆体和环形泰勒虫基因组DNA和灭菌双蒸水均无交叉反应;可检测到6.4×10~2 copies/μL的标准质粒DNA,比常规PCR敏感性高100倍;批内及批间变异系数均低于2.0%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法对30份羊血液临床样品检出率比巢式PCR高16.67%。该研究为A.phagocytophilum临床检测和定量分析病原感染程度奠定理论基础。     

黄瓜的营养成分、作用及嫁接技术

为促进奉化市黄瓜产业的发展,总结介绍了黄瓜的营养成分、作用及相关嫁接技术,以供参考。     

农业院校师资队伍现状调查与分析

对分布在我国29个省、市、自治区的42所涉农院校进行了调研,呈现出我国农业院校的人才队伍结构现状和优秀人才总量现状,使农业院校人才队伍建设的主要成绩等得到了量化。分析农业院校师资队伍存在的师资队伍老龄化,职称结构基础不稳;优质师资资源分布不均衡;重视高端人才引进,忽视人才培养;欠缺师资队伍发展的学术成长环境;高层次教学科研平台缺失;对"985""211"工程农业院校扶持力度偏大等问题,并提出师资队伍建设的对策建议。     

树木苗期及造林后的浇水技术

从种苗期和造林后两个阶段,对灌溉时机、灌溉量、灌溉次数、灌溉方法及注意事项进行分别论述。