谷氨酸脱羧酶和谷氨酸脱氢酶基因的串联表达及其对GABA产量影响

为构建一株无外源L-谷氨酸(L-Glu)条件下可直接转化葡萄糖生产γ-氨基丁酸(GABA)的安全基因工程菌,将植物乳杆菌GABA合成途径的关键酶——谷氨酸脱羧酶基因gadB与L-Glu合成途径中的关键酶谷氨酸脱氢酶基因gdh进行串联表达,导入产谷氨酸菌株谷氨酸棒杆菌SF016中,检测其对L-Glu及GABA产量的影响。经摇瓶发酵40h重组菌SF016-pgg谷氨酸脱羧酶的酶活达0.63mol·min~(-1)·g~(-1),而谷氨酸脱氢酶的酶活达0.131mol·min~(-1)·g~(-1),比原始菌株提高了约2.0倍。重组菌SF016-pgg以葡萄糖为碳源,通过40h发酵罐发酵可积累产生23.12g·L~(-1)的GABA,说明串联表达gadB和gdh基因有效实现重组菌在以葡萄糖为单一碳源、无外源L-Glu存在的培养基中直接发酵生产GABA。该生产方式的成本明显降低,且产品的安全性高,可用于食品、饲料或医药等行业。     

碱-酶脱牛皮、牛蹄毛工艺条件优化

【目的】为了探索食用级牛皮脱毛方法.【方法】采用碱-酶联合方法,以碱液浓度、碱发时间、酶解时间、酶解温度、酶液pH、酶添加量为研究因素,在单因素基础上,试验应用Plackett-Burman设计、响应面设计针对牛皮、牛蹄脱毛进行工艺参数优化,并建立二次回归方程.【结果】最佳脱毛工艺参数为:碱液浓度为6%,碱发时间为23h,碱性蛋白酶添加量为0.3%,酶解温度为53℃,酶液pH为10.2,酶解时间为3h.【结论】最佳脱毛参数条件下的牛蹄脱毛率为92.51%,牛皮脱毛率为94.01%,碱-酶联合脱毛的方法对于食用级脱毛具有一定应用价值.     

开远市南美白对虾淡化高产养殖试验

<正>云南省开远市三角海附近水源充足、水质良好、排灌方便、交通便利。为调整我市水产养殖结构,增加养殖品种,提高养殖效益,为社会提供丰富多彩的水产品种,满足人民对"菜篮子"的需求,开远市水产技术辅导站在开远市三角海南坝张穆松南美白对虾养殖场,开展了南美白对虾的淡化养殖,共利用养殖池塘30亩,总产对虾9400千克,平均单产313千克,亩利润6267元,取得了较好的经济效益。现将养殖试验总结如下,供参考。     

图书馆书目数据整合与归并的技术实现

不管是因为高校的合并,还是更换图书管理系统,高校图书馆都需要对文献资源实施统一规划和管理．因此,如何解决好书目数据的归并与整合成为一个关键问题。针对书目数据的整合与归并中涉及的数据的导出、拆分条码号、统一条码号长度、删除重复记录以及归并数据等几个问题展开讨论,并给出了具体的实现代码。     

一种高质量枇杷基因组DNA提取方法

针对枇杷叶片富含多糖、多酚及其它次生代谢物质的特点,采用改良CTAB法,通过对抽提液、沉淀液和解离缓冲液进行逐步筛选,对其基因组总DNA进行提取,并对DNA进行电泳检测、含量测定和ISSR分析。结果表明:该方法从‘大五星’枇杷幼叶、成熟叶片、花药、组培苗,与幼果中的胚珠,以及栎叶枇杷的幼叶与成熟叶片7种材料提取的基因组总DNA纯度和完整性都较好,OD260/OD280值均在1.8~2.0之间,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其ISSR分析条带清晰,多态性好,表明此方法提取的枇杷基因组总DNA质量较高。     

微贮生物添加剂

一般农作物秸秆质地坚硬、粗糙,动物咀嚼困难,适口性和营养性都很差,特别是收割完小麦、稻谷后的黄麦秸和干稻草,纤维素含量高而蛋白质和可溶性糖类含量很低,用这种秸秆直接喂牛羊,牛羊不仅不爱吃,而且直接影响其生长发育。在农作物秸秆中加入一种微生物复合菌——...     

邻烯丙基苯酚处理黄瓜种子控制土传腐霉菌和丝核菌侵染危害秧苗的效果

采用ISTA滤纸法检测得出:20%邻烯丙基苯酚悬浮种衣剂按1∶ 30~1∶ 90药种比(质量比)包衣处理"中农8号"和"长春密刺"黄瓜品种的种子,对黄瓜种子安全,种子发芽率分别达到95.75%~97.75%和80.00%~84.25%;PDA平板上检测药剂包衣处理对黄瓜种子带菌消毒效果显示,消毒处理效果达到66.67%~100%。菌丝生长速率法和染色处理结合显微技术实验证实,邻烯丙基苯酚对危害黄瓜秧苗的土传病原菌腐霉病菌Pythium aphanidermatum和立枯丝核菌Rhizoctonia solani具有较强的抑制作用,EC50值分别为27.59和34.16 μg/mL;药剂处理使供试病菌的菌丝发生中空、解体断裂等异常现象。20%邻烯丙基苯酚悬浮种衣剂1∶ 30~1∶ 90包衣处理黄瓜种子后接种供试病菌,对腐霉病菌和立枯丝核菌的防病效果分别达到73.31%~100%和85.16％~100%;随着药剂包衣处理浓度的增大,邻烯丙基苯酚防治两种病原菌侵染危害黄瓜秧苗的效果提高,等效或者优于常规药剂福美双种子处理。     

西北地区冬季肉牛养殖环境控制及管理措施研究

为了改善西北地区冬季肉牛养殖的环境、福利状况,提高肉牛生产水平,试验将环境控制(控制牛舍通风、铺加垫料、增加清粪次数)和管理措施(饮用温水)应用于实际生产,并通过检测牛舍环境、牛体清洁度、日增重等指标来评价改进措施的综合应用效果。结果表明:控制牛舍通风、铺加垫料、增加清粪次数能显著提高牛舍内最低气温和地面温度,对牛舍内日平均气温没有显著影响;降低舍内风速的同时增加了湿度、二氧化碳和氨气浓度,但总的来说在一定程度上改善了牛舍内的环境状况;对牛体清洁度、日增重没有显著影响。说明给牛饮10℃的温水能显著提高肉牛日增重,值得推广。     

辣椒疫病生防菌的筛选及其抑菌机制初探

 观测了枯草芽孢杆菌BS、GF1和荧光假单胞菌LX1、BCA1 4株生防菌对7株来源不同的辣椒疫病病菌的拮抗作用和防治效果。结果表明:BS对辣椒疫病病菌菌丝的拮抗作用显著高于其它3株生防菌,抑制率达到33.2%~59.4%;温室防病试验中,BS喷雾处理和BCA1灌根处理对辣椒疫病具有明显的防治效果,防效分别达到56.83%和57.81%。BS抗菌粗提物对病菌菌丝生长具有明显的抑制作用,抑菌作用与抗菌粗提物稀释倍数呈负相关,稀释10倍时抑制率达到100%。BS抗菌粗提物处理使辣椒疫病病菌菌丝分枝增多,分枝间距明显缩短,分枝顶端原生质消解;同时可以显著抑制辣椒疫病病菌游动孢子的萌发速度和萌发率。对绿色荧光蛋白标记的BS菌株(gfp-BS)在辣椒幼苗各部位定殖情况的检测表明:该菌可以通过种子细菌化成功定殖于辣椒植株体内,出苗60 d后仍能检测到荧光标记的菌落,其定殖量维持在10³ cfu/g以上。     

1株灰黄霉素产生菌的诱变选育及其发酵条件优化

以灰黄霉素产生菌ji-2为出发菌株经过紫外线与氯化锂诱变处理,选育出灰黄霉素效价高且发酵周期较短的菌株UL 100-80,其效价为91 304μg·mL^-1,比出发菌株ji-2提高了47.8%,通过连续传代培养,其遗传稳定性良好。对UL 100-80发酵条件进行优化,优化后液体发酵培养基:大米粉150g·L^-1,NaCl 8.0g·L^-1,CaCO₃ 8.0g·L^-1,黄豆饼粉1.0g·L^-1,KH₂PO₄ 6.0g·L^-1,KCl 7.0g·L^-1,NaNO₃1.0g·L^-1,FeSO₄1.0g·L^-1,pH自然;优化后的培养条件:培养40h的种子液以12%的接种量接种,28℃下培养12d,灰黄霉素的效价从未优化前的91 304μg·mL^-1提高到124 96...