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基于VP1重组蛋白的口蹄疫病毒O型间接ELISA检测技术 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR方法扩增O型口蹄疫病毒VP1基因片段,将其克隆于pET-32a.将重组质粒转化宿主菌Rosetta,经1.0 mmol/L IPTG诱导,外源基因获高效表达.通过Western-blot以及ELISA试验证明,重组VP1蛋白与标准阳性血清发生反应.以纯化的VP1蛋白作为检测抗原包被酶标板建立了检测口蹄疫病毒O型抗体的间接ELISA方法.对355份临床血清样品的检测结果显示,建立的方法与口蹄疫病毒O型液相阻断试剂盒符合率为98.87%.表明建立的方法能够用于口蹄疫病毒O型抗体的快速分型检测. 相似文献
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荧光RT-PCR检测活禽和禽产品中新城疫病毒中强毒株的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究中,采用TaqMan方法,根据新城疫病毒F基因核苷酸序列,设计合成多对引物,在上游引物和下游引物之间设计多条探针,通过对引物、探针的筛选,反应条件的选择和优化,建立了检测活禽和禽产品中中强毒力新城疫病毒的荧光RT-PCR方法。经对10株倍比稀释的中强毒力新城疫病毒的尿囊液进行检测后,表明所建立的荧光RT-PCR方法的检测极限在10^-5~10^-7”之间,略低于鸡胚病毒分离方法(10^-8~10^-9);对收集到的所有新城疫病毒株和常见禽类病毒(包括禽流感病毒H5、H9亚型、IBDV、IBV、KIBV、CAAV、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒)进行检测,结果表明建立的方法不能检出其他的常见禽类病毒,特异性良好。进一步用建立的荧光RT-PCR检测人工感染SPF肉鸡的组织脏器、咽喉及泄殖腔拭子及临床样品中的中强毒力的新城疫病毒,并同鸡胚分离结果比较,结果表明荧光RT-PCR的敏感性同鸡胚分离试验基本一致。由于荧光RT-PCR方法快速,从处理样品开始到出结果只需不到4小时,而且检测样品量大,这就充分显示了其快速、敏感、特异的优势。在强调口岸快速通关的今天,该方法的建立无疑为活禽或禽产品的快速检验检疫提供了有效的手段。 相似文献
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<正>一、产业发展现状1.企业有整合,缺整体1有整合。实施"龙头"带动战略,引导企业进行强强联合、资源整合,兼并重组。近5年来,双峰县各类农机生产企业由过去的300多家整合至63家。2014年,双峰县农机机电产业总产值达106亿元,占湖南省农机工业总产值的1/5。2缺整体。企业整合后,在加强配套互补、延长产业链上缺少合作,没有形成整体合力。各企业从 相似文献
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河南猕猴桃病害未见前人系统报导。本文报导作者历时五年在信阳地区发现的猕猴桃病害10种,描述了各种病害的症状,并对其病原作了初步鉴定。 相似文献
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党的十六届五中全会明确提出建设社会主义新农村的重大历史任务,既为农机化工作带来了新的发展机遇,也提出了新的更高要求。研究梳理农机经营体制改革创新是摆在广大农机工作者面前的重要课题.也是义不容辞的历史责任。下面笔者就我国农机经营体制改革创新.粗谈个人观点、建议。 相似文献
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