种鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序的研究

本研究设计不同的免疫程序,用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1 Re-1+H9N2 Re-2株)免疫黄羽种鸡,通过对H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体滴度监测,探讨H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体消长规律及禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗的免疫程序.结果表明,用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡后,H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体的消长规律基本同步,其抗体滴度阶段性峰值出现在免疫后的第21~28天.根据试验结果,建议用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡的免疫程序设为:首免(14 d),0.3 mL/只;二免(56 d),0.5 mL/只;三免(119 d或开产前4周),0.5 mL/只.     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的表达

将含有传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１的Ｓ１基因ｃＤＮＡ（从ＡＴＧ到Ｓ前体蛋白裂解位点）的片段克隆到具有多角体启动子（ＰＸＩＶ）和人工合成启动子（Ｐｓｙｎ）的杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸ－ＩＶＶＩ＋Ｘ３中，构建了重组转基因载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３－Ｓ１．Ｄ４１。用该重组转移质粒与无包涵体的粉纹夜蛾核型多角体病毒ＴｎＮＰＶ－ＳＶＩ－ＧＤＮＡ（ｏｃｃ－，ｇａｌ＋）共转染草地夜蛾（Ｓｆ９）细胞，筛选并纯化出既能表达Ｓ１基因又能形成多角体的重组病毒ＴｎＮＰＶ－ＩＢＶＳ１－ｏｃｃ＋（ｏｃｃ＋，ｇａｌ－）。通过间接ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ等方法在感染了重组病毒的Ｓｆ９细胞中成功地检测到分子量约６２０００的Ｓ１基因表达产物。虽然该重组Ｓ１糖蛋白可能由于Ｎ－糖基化不完全而分子量小于天然蛋白，但它可以像正常病毒粒子一样，被鸡抗ＩＢＶＤ４１株血清特异识别。     

H5亚型AIV诱导组织细胞凋亡的TUNEL检测

细胞凋亡（apoptosis）是指细胞在一定的生理或病理条件下，按照其自身的程序，自已逐渐结束其生命的历程，通常最后细胞脱落离体，或者裂解为若干个凋亡小体而被其他细胞吞噬。随着对细胞凋亡研究和认识的不断深入。检测细胞凋亡的方法也不断更新和多样化。Gavrieli Y等（1992）首先建立的TUNEI。方法，该方法特别适合于组织切片的细胞凋亡原位检测。     

表达SIV H1亚型HA蛋白重组腺病毒的构建与生物学特性研究

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因序列进行了遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与GenBank中登录的全部192株H1亚型SIV中的151株核苷酸序列相似性达到85%以上,表明该毒株具有作为疫苗候选株的分子特征.将SIV-GD03的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pAd-CMV5-IRES-GFP中,将得到的重组穿梭质粒pAd-H1-IRES-GFP电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组获得重组腺病毒质粒prAd-H1-IRES-GFP,该质粒线性化后转染AD-293细胞.包装出的重组腺病毒rAd-H1HA-GFP通过荧光显微镜观察、PCR和western blot鉴定,证明HA基因和GFP基因在重组腺病毒中得到高效表达,该毒株在AD-293细胞上连续传12代后表现出较好的整合稳定性及传代稳定性.     

禽流感病毒KMI/99(H9N2)HA和NA基因的序列分析

研究分别以自行设计的一对简并引物和另一对普通引物，经RT－CR，一次性成功地扩增禽流感病毒A／Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2）HA全和基因cDNA和NA全长基因cDNA，并将它们克隆于pGEM-T Easy的T－T窗口，首次报道了该毒株的HA全基因和NA全基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列，测序结果显示，该毒株的HA基因全长为1683bp，编码560个氨基酸。NA全长为1398bp，编码466个氨基酸残基。研究发现其HAI羧基端的分子特征是：R－S－S－R。从分子水平推论。A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2)属于非高致病力毒株。研究还发现NA蛋白于63－65位缺失了T、E、I三个氨基酸。     

H7N9亚型禽流感免疫程序研究初报

研究采用H7N9亚型禽流感油乳剂灭活疫苗,对番鸭、鸭、麻鸭、水鸭、鹅等5种小水禽和小鸡开展首免日龄、免疫时间、免疫次数等免疫程序主要要素的研究,以HI抗体水平、CD4/CD8细胞变化情况,以及白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6及肿瘤坏死因子变化情况的检测数值作为评价指标。研究结果表明,所用疫苗和程序能够诱导番鸭、鸭、麻鸭、水鸭、鹅等水禽和鸡产生明显的免疫应答反应,试验家禽在2周龄左右作首次接种,剂量为0.3m L/只,3周龄加强免疫一次,剂量为0.6 m L/只,二次免疫1-2周后,相应HI抗体可以达到4-5 log2以上,其他免疫指标也可达到较为理想的水平。现将研究基本情况初步报告如下,谨供参考。     

马尾松种子园病虫害研究动报

通过１９９１年９月和１９９２年５月两次对黄平、省林科院马尾松种子因病虫情况进行的全面详细调查，结果表明：马尾松种子园中现有的病虫种类少，优势种明显．现阶段病害对母树的为害程度不大，但分布广，肩害在整个基地中为聚集型分布，有一定的发病中心．采穗圊中相对集中在一起的各来源无性系间感病指数有明显差异：虫害公布无明显规律，黄平种子园基地的主要虫种──油松球果小卷蛾已成为影响该种子园产量的主要因子。本文根据种子园中主要病虫的发生情况提出了部分防治措施．     

兽用抗生素对公共卫生的影响

动物滥用抗生素可以导致体内残留和细菌耐药性的产生，残留的抗生素和耐药菌株又可经食物链转移给人类，从而危害到人类的健康。本文综述了滥用兽用抗生素对动物和人类的危害并提出控制对策，以期引起人们的关注和重视。     

抗性基因在鸡抗病育种中的研究进展

提高家禽抵抗传染病和产生球虫病防御能力的方法有很多,但提高家禽天然抵抗力是关键,因此加强家禽遗传抗病性研究和应用对保障养禽业的健康发展具有重要意义。     

鸭鹅流感

一、流行特点引起鸭、鹅发病并造成较大损失的禽流感病毒主要是Ｈ５亚型的毒株，尤其以Ｈ５Ｎ１禽流感病毒最常见。不同品种、龄期的鸭、鹅均可感染，以１月龄以内的雏鸭、雏鹅尤为敏感。由于鸭、鹅常在水塘、水田等地放牧，卫生消毒工作不易实施，而且在放牧过程中，不同的鸭群、鹅群之间常常相互接触，使病毒更易迅速传播，鸭群、鹅群很易受到感染。该病一年四季均可流行，但以每年的１１月至次年的４、５月是发病的高峰期，特别是天气潮湿、阴冷适宜病毒的存活与传播。值得注意的是，Ｈ５亚型禽流感病毒多见于鸭与鹅，但在鸡、鸭、鹅饲养…