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为了构建猪大肠埃希菌融合菌株,在药敏试验和MIC试验的基础上,对猪大肠埃希菌HY2株(O101,Omp1)和GXA1株(O107,Omp2)进行交叉耐药培育.以HY2(O101,Omp1,Amir,Czls)和GXA1(O107,Omp2,Czlr,Amis)为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备两亲本菌株原生质体,通过聚乙二醇(PEG)助融,进行原生质体融合,得到3株双耐药融合菌株.结果表明,猪大肠埃希菌原生质体制备和再生的最适条件是:溶菌酶浓度为200 U/mL,作用时间为25 min.筛选得到3株融合菌株R1、R2、R3,均可凝集两亲本的O抗原,其中,R2凝集性更好更稳定.进一步结合SDS-PAGE分析,显示融合菌株R2能较好的表达两亲本菌株形状,经多次传代仍能够稳定遗传. 相似文献
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加速开发利用南方人工干草制品、促进饲料工业稳步发展湖南省畜牧兽医研究所李科云,罗爱兰饲料是饲养业的物质基础,饲料资源是饲料工业的物质基础。改革十几年来,我国的饲料工业发展迅速,从无到有,从小到大,已初步形成了一个较完整的饲料工业体系,产品品种已逐步走... 相似文献
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社会主义和谐社会的发展,将社会主义核心价值体系作为精神支柱,而用社会主义核心价值体系来指导高校学生思想道德教育,能够在强化高校思想道德教育工作的同时,坚持中国特色社会主义道路的客观要求。本文主要基于社会主义核心价值体系,充分分析其内涵及特点,以此探究高校学生思想道德教育的指导途径。 相似文献
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我国是中药的发源地和最大的生产、使用国。中药产业是我国在世界上独具特色和优秀的产业领域之一,在进入21世纪之际,传统中医药在“回归自然”的世界潮流中再次焕发出强大的生命力和现代化发展的广阔前景,国内、国外环境为中医药研究和产业化发展提供了前所未有的良好机遇。近 相似文献
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猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。 相似文献
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根据已发表的番鸭细小病毒(MDPV)核苷酸序列设计并合成1对引物,对MDPV非结构蛋白NS2基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.4 kb。将该片段直接与pMD18-T载体连接,转化入感受态大肠杆菌DH5α中增殖。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增及BamH I酶切线性化初步鉴定的基础上,经限制性内切酶BamH I和Sal I进行双酶切鉴定。将克隆产物pMD18-T-NS2与原核表达载体pET-32a分别用BamH I和SalI双酶切后,回收目的片段进行定向连接,并转化入感受态大肠杆菌DH5α中。对所获得的重组质粒分别经BamH I单酶切、BamH I和Sal I双酶切,证实含有目的基因,且基因插入方向正确,成功构建了含有MDPV NS2非结构蛋白基因的原核表达载体,为高效原核表达及研制更为有效的基因工程疫苗打下了基础。 相似文献
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近几年来,我区专业户养猪场及农家散养的一些断奶仔猪相继发生以头颈部、眼睑及全身水肿、局部或全身麻痹、共济失调、迅速死亡等症状。经检查,诊断为由某些溶血性大肠杆菌毒素引起的仔猪水肿病。其群体发病率20%~30%,但死亡率高达80%,给养猪户造成了直接经济损失,挫伤了养猪户的积极性。本人在2000~2002年共收诊8个行政村的23窝39头水肿病猪,治愈33头,治愈率84.6%,现报道如下:1流行情况1.1本病只见于猪,呈地方性流行,无明显发病季节,以4~5月份和9~10月份较为多见,特别是气候突变和阴雨连绵多发,冬夏季则零星散发。1.2同窝中个体大、肥… 相似文献