南方甜樱桃花果期管理技术

保花保果、平衡树势、调控树体营养生长与生殖生长的矛盾是南方甜樱桃的栽植要点。本文从花前管理、花期管理、幼果期管理、果实成熟期管理、采后管理、病虫害防治等方面总结南方甜樱桃花果期管理技术,以供种植户参考。     

广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型的制作

本试验旨在制作广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型,初步判断猪发生动脉粥样硬化时的指数值,以期为今后建立相关模型提供依据。试验选取广西巴马小型猪试验组和对照组各10头,通过饲喂高脂高胆固醇饲料建立动脉粥样硬化模型,检测建模过程中血液生化指标,将动脉粥样硬化指数与血管切片作关联分析,初步拟定发生动脉粥样硬化时的指数值。屠宰后血管切片结果显示,试验组有2头广西巴马小型猪发生动脉粥样硬化,对照组均正常。2头广西巴马小型猪的血管切片结果与动脉粥样硬化指数进行关联分析后,初步拟定的动脉粥样硬化指数值在3.8以上,并持续3个月以上。     

中国南方地区甜樱桃病虫害管理

为推进甜樱桃产业在南方地区的发展,减少南方地区甜樱桃病虫害的发生,提高其产量和品质,本文总结了南方地区甜樱桃上常见的细菌性穿孔病、叶斑病、流胶病、蚧壳虫类、金龟子类、梨小食心虫、天牛等19种病虫害。结合前人研究及生产经验提出甜樱桃病虫害的综合防治方法,主要为合理管理樱桃园,科学施肥,及时涂白,人工捕杀,物理诱杀,性激素诱杀,释放天敌,以及在甜樱桃不同生长期进行药剂防治,以期为甜樱桃的无公害生产提供参考。     

毛花猕猴桃华特硬枝扦插技术

研究生根粉浓度、扦插床温度对毛花猕猴桃新品种华特硬枝扦插生根成活率的影响,结果表明,扦插时使用生根粉4 g.kg-1浸泡插条3～5 min效果最好;扦插床温度(地温)与气温差值对扦插效果影响较大,地温以20℃为好;扦插后7 d形成愈伤组织,10 d有不定根发生,40 d不定根最高生根率达98.3%,发根点达3～4个,单株平均根数为15.6条。毛花猕猴桃硬枝扦插可以结合冬季修剪进行,密度可达80～100株.m-2,操作简单,成活率高,节约土地,生产成本低,适合大面积繁殖。     

基因沉默及其克服策略

基因沉默现象是导致转基因不能正常表达的主要原因,基因沉默发生在两种水平上,一种是由于DNA甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默,另一种是转录后基因沉默,有活跃的启动子,能转录外源基因,核内有正常水平的mRNA,细胞质不积累mRNA。消除甲基化的影响﹑避免使用同源和重复序列和使用核基质结合序列可有效克服基因沉默。     

补光对设施栽培樱桃果实成熟和糖分积累的影响

【目的】探究不同补光处理对樱桃果实的影响,筛选设施栽培樱桃最佳人工补光方案。【方法】以设施栽培的中国樱桃诸暨短柄与黑珍珠为材料,从果实硬核期到采收期间,分别使用不同功率的LED灯光源、白炽灯光源、商品补光灯光源进行补光,以自然光照作为对照,对果实内源激素、相关酶活性与基因表达进行测定。【结果】发现采用红蓝光比例6∶1的LED光源补光显著促进了果实成熟进程,能够使果实成熟过程中内源激素动态变化趋势较对照组提早出现,并且显著提高了成熟软化与糖合成基因的表达,使果实蔗糖合成酶活性比同期对照组提高18.75%以上。【结论】功率36 W的LED补光处理效果最好,显著促进了果实成熟进程,提高樱桃糖分积累量,值得在樱桃生产中应用和推广。     

广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体构建 及其相关生物信息学分析

[目的]构建广西巴马小型猪结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体并鉴定其活性,为深入研究CT-GF在癌症发生中的作用及其分子机制提供参考,也为构建CTGF转基因广西巴马小型猪及研发基于CTGF的癌症基因治疗策略提供理论依据.[方法]利用RT-PCR从广西巴马小型猪肝脏组织中克隆CTGF基因,并将CTGF基因亚克隆到pDsRed-N1载体上,然后通过脂质体转染小鼠Hep3B细胞,转染48 h后于荧光显微镜下观察细胞是否表达红色荧光蛋白,同时利用在线生物信息学软件对其理化性质进行分析.[结果]成功克隆获得广西巴马小型猪CTGF基因编码区(CDS)序列,序列全长1050 bp,共编码349个氨基酸,与NCBI上已公布普通猪参考序列的同源性为99.5%,有5处碱基突变,且均为同义突变.将广西巴马小型猪CTGF基因亚克隆到pDsRed-N1载体上成功构建了阅读框架正确的广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体,转染小鼠Hep3B细胞48 h后有红色荧光蛋白表达.广西巴马小型猪CTGF蛋白具有较强的亲水性,其二级结构中α-螺旋、β-折叠、延伸链和无规则卷曲各占13.18%、5.73%、17.48%和63.61%.[结论]广西巴马小型猪CTGF基因在进化过程中的保守性非常稳定,通过构建的真核表达载体能转染小鼠Hep3B细胞并成功表达,可用于生产转基因广西巴马小型猪及研发与CTGF基因有关的疾病模型.     

樱桃组织培养及遗传转化研究进展

樱桃果实甜美,营养丰富,深受消费者喜爱,是极具市场潜力的水果之一。但是由于其易裂果、不耐贮藏且抗性较弱,使樱桃产业的发展受到了极大影响,因此加快樱桃优良品种的选育十分重要。采用传统育种方式在一定程度上所需周期较长、工作量大,且杂交胚败育率较高,严重阻碍了樱桃育种工作的进程。而通过植物组织培养与遗传转化可以克服樱桃传统育种的局限性,加速育种工作的进程。笔者分析了樱桃茎尖、茎段和叶等器官培养以及胚培养的影响因素,如基因型、外植体类型、培养条件和激素组合等;综述了有关樱桃标记基因和目的基因的遗传转化,包括转化方法、转化材料、所用基因类型、转化植株的鉴定方法、转化结果以及转化率等,并对生物技术在樱桃研究中存在的问题及今后在樱桃中的应用前景进行了讨论。     

桃幼胚及幼胚子叶再生的研究

以玉露桃和湖景蜜露桃幼胚及幼胚子叶为试材,研究基本培养基类型、激素、损伤方式等因素对再生的影响。结果表明:培养基是影响幼胚诱导愈伤组织的最重要因素,MS适合供试材料诱导愈伤组织;激素诱导愈伤组织因品种而异,NAA1.0mg·L-1对45d、0.5mg·L-1对55d玉露,BA0.5mg·L-1对55d湖景蜜露效果较好,在试验浓度范围内2,4-D对供试幼胚均无明显效果;幼胚的发育状态是影响诱导愈伤组织的另一因素,玉露桃45d愈伤组织诱导率最高,达96.6%,而55d诱导率为81.6%。愈伤组织可在MS 0.05mg·L-1NAA 1.0mg·L-1BA培养基上分化成芽,再生芽在1/2MS 1.0mg·L-1IBA培养基上生根。幼胚子叶不定芽再生培养基的激素配比为NAA0.50mg·L-1 BA10.0mg·L-1、NAA0.05mg·L-1 TDZ3.0mg·L-1;带胚芽子叶纵向刻伤再生率高;不定梢(芽)在1/2MS 2%蔗糖 7.5g·L-1琼脂 IBA1.0mg·L-1 Ad20mg·L-1的培养基上能生根。     

陆川猪GPR1基因真核表达载体构建及组织表达谱分析

试验旨在构建陆川猪G蛋白偶联受体1（G protein-coupled receptor 1,GPR1）基因真核表达载体,并对其组织表达谱进行分析。采用RT-PCR技术从10周龄陆川猪皮下脂肪组织中扩增出GPR1基因CDS区后,使用常规分子克隆手段构建含GPR1基因片段的真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,利用双酶切和测序对重组质粒pEGFP-N1-GPR1进行鉴定,并以脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞24 h后观察细胞荧光表达情况。收集所转染3T3-L1细胞并提取其总RNA,实时荧光定量PCR进一步检测GPR1真核表达载体表达情况;提取6头10周龄陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪总RNA,实时荧光定量PCR检测GPR1基因mRNA在陆川猪各组织中的表达量。结果表明,陆川猪GPR1基因CDS全长1 068 bp,成功将其连接至pEGFP-N1真核表达载体,重组表达载体pEGFP-N1-GPR1质粒和空载pEGFP-N1质粒所转染3T3-L1细胞均能表现出绿色荧光,且空白对照组并未表现出绿色荧光。实时荧光定量PCR结果证实,GPR1基因在重组质粒试验组的表达量极显著高于空载质粒组（P<0.01）。GPR1基因在10周龄陆川猪肝脏中表达量最高,在心脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪中均有表达,在背最长肌中几乎不表达。本试验成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,并获得了GPR1基因组织表达谱,为进一步研究GPR1基因对陆川猪脂肪沉积的影响提供参考。