利用Gateway技术改造原核表达载体pGEX-4T-1、pET-28a

质粒载体是基因工程研究中不可或缺的工具。为提高载体构建效率,进一步满足基因工程研究在构建表达载体时的需要,本文提供了一种重组型载体的改造策略。基本流程如下：利用带BglⅡ、XhoⅠ酶切位点以及attB重组序列的引物,从Gateway的入门载体pDONR Zeo中克隆到“BglⅡ-attB1-ccdB-attB2-XhoⅠ”片段。通过酶切连接的方法,将该片段插入到原核表达载体pGEX-4T-1以及pET-28a的多克隆位点,构建具有重组位点以及ccdB致死基因的原核表达载体。以胡椒High mobility group protein（HMGB)基因的开放读码框为目标片段,通过重组反应将目的基因构建到改造后的原核表达载体上,经检测体外诱导表达出大小正确的HMGB蛋白,验证本研究中改造载体的正确性。该载体的成功构建,为基因工程科研工作提供了一个高效的蛋白表达载体以及载体改造的新策略。     

可可种质资源果实色泽多样性分析

以86份可可核心种质资源为试材,利用计算机图像信息及其处理技术对可可果实色泽数字图像进行解析,采集果实色泽典型色域的CMYK模式参数,通过聚类分析及主成分分析方法对色泽指标参数进行统计分析。结果表明:C、M、Y、K值能较准确科学地表现可可果实色泽,可以反映种质间的差异。UPGMA聚类分析和主成分分析将可可果实色泽分为2大类9组,区分结果符合可可果实色泽的自然分类属性。其中绿色为果实的基础色,红色为渐变的渲染色,形成丰富的9组色泽:墨绿色、青绿色、灰绿色、浅绿色、青白色、枣红色、红绿色、紫红色和深紫色。可见,可可果实色泽能够作为一项重要的分类参考指标,为可可新品种选育和优异种质资源开发利用提供参考依据。     

基质型容器育苗营养块的研制与应用

基质型容器育苗营养块是在继承传统穴盘育苗技术的基础上及不断创新过程中得到快速发展的一种新型育苗方式。文章详述了该育苗方式的技术要点,并得出了该产品集基质、养分、容器为一体,带基定植、所以移栽时不伤根,直接与土壤相结合,无需缓苗,是一项既经济又环保的实用育苗技术,有很好的应用前景。     

火炬树单优群落下层与外缘4个树种光响应特征

研究了火炬树(Rhus typhinaL.)单优群落下层与外缘的光照等生态因子差异和酸枣、荆条、黄栌和火炬树克隆分株的资源利用效率。利用C IRAS-2光合仪,并结合典型样株形态指标测定和小气候因子测定,比较分析了火炬树单优群落下层和外缘酸枣、荆条、黄栌和火炬树克隆分株光合参数。研究结果表明:1)火炬树单优群落下层与外缘相比,光量子大约减少91.2%;2)生长于火炬树单优群落外缘的酸枣、黄栌和火炬树克隆分株LUE和WUE超过了火炬树单优群落下层,而荆条差异较小。因此,初步认为火炬树单优群落下层生长的4个树种光能与水分利用效率相对较低。     

新型花生内源特异参照基因的开发与应用研究

一个物种的内源特异参照基因是该物种区别其它物种的特异性标志之一。本研究通过对GeneBank中花生基因信息的检索分析,筛选出花生几丁质酶基因chi2.2作为该物种内源特异参照基因的候选基因。通过对该基因的特定区域设计引物,建立了花生产品特异性定性PCR检测方法。利用该方法分别对16个花生品种的DNA进行PCR扩增,均能扩增出81bp的片段。利用相同引物分别对其他油料作物、粮食作物和蔬菜等（油菜,大豆,芝麻,向日葵,油棕,棉花,水稻,玉米,长豆角,豌豆,土豆,萝卜,辣椒,茄子,拟南芥,烟草）的DNA进行PCR扩增,均未发现特异性扩增产物。 结果表明,本研究建立的花生产品检测方法具有很好的物种特异性,且其灵敏度达到0.05ng基因组DNA。该方法可用于花生源成分鉴定,如确定食品中是否含有花生源成分,本研究为识别掺假使杂和保障食品安全提供有效手段。     

转cry1Ac基因抗虫棉对土壤三种酶活性的影响

为了明确转cry1Ac基因抗虫棉对土壤酶活性的影响,本研究采集转cry1Ac基因抗虫棉及其亲本棉‘SM 3’种植地的土壤,测定转cry1Ac基因抗虫棉及其亲本棉 ‘SM 3’不同生育期内根区距主根不同距离土壤脱氢酶、脲酶和磷酸酶活性的变化。结果表明,棉花根区土壤脱氢酶活性在整个生育期呈现出先升高后降低再升高的变化趋势,土壤脲酶和磷酸酶活性在整个生育期无明显的起伏变化。转基因棉‘GK 12’盛花期和枯死期根区5 cm的土壤脱氢酶活性显著高于亲本棉‘SM 3’（p<0.05）,转基因棉‘GK 12’盛花期根区15 cm和25 cm的土壤脱氢酶活性也显著高于亲本棉‘SM 3’（p<0.05）;在棉花蕾期,转基因棉‘GK 12’根区5 cm和15 cm的土壤磷酸酶活性显著高于亲本棉‘SM 3’（p<0.05）,而对根区25 cm的土壤磷酸酶活性无显著影响（p>0.05）;转基因棉‘GK 12’在整个生育期对不同距离土壤脲酶活性无显著影响（p>0.05）。上述结果初步看出,在棉花生长的一些生育时期,转cry1Ac基因抗虫棉‘GK 12’对根区土壤酶活性存在明显的影响,但其影响的程度不是很大,后期基本可得到恢复。     

枸杞气吸采摘参数试验研究

为了获取气吸采摘枸杞果实的最佳工作参数,首先测得枸杞的相关力学参数,运用FLUENT软件对气吸式枸杞采摘试验装置的气吸管道进行建模仿真,得到了气吸管道内气体压力云图及速度云图,并对枸杞进行了气吸采摘试验。将仿真与实测的数据对比分析后,发现管径22、25、32mm的气吸管出入口的压差和风速差的仿真结果与实测数值接近,误差较小,证明了试验结果的可靠性。最终,确定了采摘枸杞的最佳工作参数:气吸管径为25mm,风速为27. 5m/s,气吸角度为90°,此时成熟枸杞脱落所需时间平均为1. 92s,破果率为6. 67%。该研究可为气吸式枸杞采摘机的研发提供参考依据。     

广东土地抗蚀潜热初步研究

利用计算机和地理信息系统软件，研究了广东省的土壤质地、土壤有机质、地势三个侵蚀因子对土壤侵蚀方面的影响，指出了广东土地抗蚀性极弱地区主要是湛江市，新丰县的小部分地区，而抗蚀性弱的区域则很大，约占全省土地面积的４９．８％，遍布全省中部和南部，针对这样的现状，提出要减少抗性弱和极弱地我的土壤侵蚀，必须做到，对土地的利用开垦进行统一规划；严禁乱伐森林；采取生物措施的工程措施相结合的方式防治土壤侵蚀的进一     

四川省会东县雷家湾金沙江河谷地段水化学特征

利用水化学、氢氧同位素分析,结合研究区水文地质条件,阐述了研究区水环境特征,为工程建设提供了参考依据。水化学、同位素分析表明,该区地下水径流条件较差,水交替性弱;溶滤作用和蒸发作用对于该区地下水中各化学组分的形成有较大的贡献;大气降水和雪山融水为该区水体主要来源。以石英砾岩（P1）为界的双层含水系统,上部的风化裂隙水为就近的大气降水渗入补给,下部含水系统接受长距离运移的高山补给源补给。     

全生物降解地膜在玉米生产中的应用试验

全生物降解地膜可在自然环境条件下被微生物降解,有效解决农田白色污染问题,为此作者开展了全生物降解地膜在玉米生产中的应用效果试验.试验结果表明,栽培措施及环境会影响全生物降解地膜的降解速度,降解速度表现为露地快于大棚、套养鸡群快于未套养鸡群、泥土掩埋快于土表、杂草多快于杂草少;不同地膜对玉米生长、产量以及经济效益影响不大...