大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达

根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP(major capsid protein,MCP)基因序列(序列号:KF512820),设计一对特异性引物,以大鲵虹彩病毒贵州分离株基因组DNA为模板,PCR扩增大鲵虹彩病毒MCP基因并测序,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因进行比对,然后将其亚克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后进行Western blot分析。结果显示:PCR扩增出长度为1 392 bp的片段,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因核苷酸序列相似性为99.7%~99.9%,SDSPAGE电泳显示该重组蛋白的相对分子质量约为67×103。免疫原性检测结果表明,该重组蛋白可与兔抗大鲵虹彩病毒阳性血清特异性反应,具有免疫原性。     

二倍体、三倍体虹鳟的血液指标分析

通过对二倍体和三倍体虹鳟红细胞大小的测量,发现两者之间存在着极其显著的差异.三倍体虹鳟红细胞长径和核长径分别是二倍体的1.34和1.33倍;红细胞面积和核面积分别为二倍体的1.43和1.41倍:核体积为二倍体的1.47倍.用MEK-6318血液自动分析仪检测二倍体和三倍体虹鳟血常规值,结果显示:在红细胞计数(RBC)和红细胞平均容量(MCV)上,二、三倍体之间都有着极其显著的差异.此外,三倍体虹鳟的淋巴细胞、中间细胞和中性粒细胞数量都显著超过了二倍体.     

大鲵致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌特异性的气溶素基因序列,设计1对引物,利用普通PCR技术扩增获得hlyA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了快速检测致病性嗜水气单胞菌的SYBR GreenⅠ荧光定量诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对非致病性嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、迟缓爱德华菌、柱状黄杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达1.0x101拷贝/uL。结果表明研制的致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特点,适合于大鲵临床样品的检测。     

AM菌根真菌和根瘤菌对四季豆生长影响的效应初报

为充分利用菌根菌的解磷作用与根瘤菌的固氮作用,减少化肥的施用,尝试给豆科植物接种AM菌剂和根瘤菌剂。通过室内和田间试验,结果表明,接种AM菌剂和接种根瘤菌剂可提高四季豆结瘤率和结瘤量(接种47d后结瘤量增多了67%)、增加根重和根径、促进四季豆生长、增加单果重及荚果大小,接种根瘤菌可增加根部土壤全氮含量和速效磷的含量,增加四季豆经济产量,最多达30%。     

不同施肥处理对膏桐幼林结实的影响

施肥是促进林木生长、提高产量和质量的重要措施之一, 为了解肥料对膏桐幼林结实的影响,采用随机区组试验设计,对膏桐幼林进行施肥配方试验,结果表明:仅施用氮肥对膏桐增产作用不大,但仅施磷肥或钾肥却对膏桐增产起明显的促进作用,在氮、钾一定时,施磷肥量超过一定水平,对膏桐产果量影响不大,施肥处理对出仁率和出油率影响不明显.     

HPLC法测定兽用银翘散中绿原酸和连翘苷含量

为了提升兽用银翘散的质控技术,对提取方法、提取溶剂、测定波长、流动相等方面进行研究,建立了同时测定兽用银翘散中绿原酸、连翘苷含量的高效液相色谱法。结果表明,银翘散采用50 mL的50%甲醇溶液超声提取30 min后,提取液补重,用C₁₈色谱柱分离,乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为277 nm为最佳提取条件。绿原酸、连翘苷分别在20～400μg·mL^-1和2.5～50.0μg·mL^-1内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999 99,平均回收率分别为101.5%(RSD=2.47%,n=6)和93.7%(RSD=2.69%,n=6)。该方法具有操作简单、准确性好、精密度高、适用性强等优点,可作为兽用银翘散的质量评价与控制方法应用。     

达川区蔬菜生产全程社会化服务的发展与建议

概述了达川区蔬菜生产全程社会化服务的现状、取得成效及主要措施,分析了存在的问题,并提出了增加补助环节、提高补助标准、培育服务主体、创新服务机制的发展对策。     

蔬菜生产习惯性问题剖析与解决措施

蔬菜产业是达县农业支柱产业之一,是农民增收的重要来源。目前,达县蔬菜播种面积已达50万亩。2010年被四川省政府命名为全省现代农业产业基地强县,并在2012年被农业部、国家发改委确定为全国580个蔬菜重点生产县之一。尽管达县蔬菜种植面积较大,种植技术较好,但笔者在多年的蔬菜生产实践中,发觉蔬菜种植户有许多共同的习惯性种植误区。现就这些     

牛羊绦虫和附红细胞体混合感染的防治

绦虫和附红细胞体是多种畜禽共患的寄生虫病,临床上多以单独感染为主,很少混合感染.主要症状为消瘦、贫血、血尿、黄疸、下痢、食欲废绝,淋巴结肿大,脾贫血、梗死,肺出血、肿大,肠出血、溃疡等,用三氮脒、吡喹酮治疗经济适用,效果显著. 1 病原及流行病学 1.1 绦虫 (1)寄生于牛羊体内的绦虫共有四种,即扩展莫尼茨绦虫、贝氏莫尼茨绦虫、曲子宫绦虫和无卵黄腺绦虫.其中前两种比较常见.而属于假叶目舌形绦虫和属于园叶目的节片戴文绦虫[1]感染牛羊的报道更少.绦虫均寄生于小肠前段,其大小、形态差别较大,有的可直接肉眼观察得到,有的需在显微镜下才能看见.如舌形绦虫和节片戴文绦虫就只能在显微镜下观察.     

国外引进种牛暴发附红细胞体病的诊治

正2015年10月,贵州省某肉牛养殖场从澳大利亚引进60头安格斯种牛突然发病,先后死亡15头。通过发病情况、临床症状、病理变化以及采用血推片染色,光学显微镜进行病原学诊断检测,确诊为附红细胞体病。现将诊治情况报道如下,供同行参考。1流行情况2015年10月11日,贵州省某肉牛养殖场从国外引进的60头安格斯种母牛突然发病。该群牛系