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【目的】获取ASFV p37蛋白,并制备抗ASFV p37蛋白的多克隆抗体,为ASFV p37蛋白结构和功能研究提供材料。【方法】应用生物信息学工具对ASFV HLJ/2018(GenBank登录号:MK333180.1)p37蛋白进行分析,设计合成p37基因,并构建pET32a-p37重组质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE对重组蛋白的可溶性进行分析。收集菌体进行超声破碎,分离沉淀并使用8 mol/L尿素变性后离心,用0.45μm滤膜过滤离心后的上清,使用镍亲和层析柱纯化蛋白,通过SDS-PAGE、Western blotting对其纯化效果及特异性进行验证。将纯化后的p37蛋白按照50μg/只免疫小鼠,制备抗ASFV p37蛋白多克隆抗体。利用间接ELISA方法测定制备的多克隆抗体效价;通过Western blotting、间接免疫荧光试验检测该多克隆抗体的特异性。【结果】生物信息学分析表明,p37蛋白为稳定亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽。二级结构主要含有α-螺旋(45.28%)、延伸链(15.09%)、无规则卷曲(31... 相似文献
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金属元素是脂质氧化酸败反应的重要催化剂。在配合饲料中最重要的是Cu、Fe、Zn和Mn ,它们在配合饲料中的添加量很大(与油脂中含量相比) ,如仔猪配合饲料中Cu的添加量可达350mg/kg,Zn的添加量更可高达3000mg/kg或以上(来自ZnO) ,这些金属元素在饲料中的催化效力如何 ,以及它们是否在相互作用 ,国内外的报道很少。加工对饲料脂质酸败影响的研究主要集中于膨化(Peisker,1993;Rao,1989) ,缺乏对制粒影响的研究。本研究旨在①探讨配合饲料微量元素(Cu、Fe、Zn、Mn)的不同… 相似文献
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家禽饲料代谢能的测定中广泛使用"Sibbald"真代谢能快速测定法(TME)。鸭与鸡消化生理差异较大,在鸭上使用与鸡相同的TME法测定条件,难以获得精准的试验结果。文章综述了鸭与鸡上采用TME法的差异,并推荐鸭上TME法的适宜条件为:排空时间40 h;排泄物收集时间32~40 h,测定粗饲料则适当延长收集时间;饼粕类饲料强饲量40~70 g,高纤维饲料则为40~50 g;真代谢能测定以管饲的方法较好,而且干法优于湿法;在外界温度的选择上,应该保持温度恒定在15~25℃这一适宜范围内。 相似文献
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在遵义地区,养蜂生产因多年的闭锁繁育和近交,普遍存在蜜蜂品种品质退化,生产力低下,养蜂效益不高,为提高蜂群王浆、蜂蜜产量和繁殖力,提高养殖效益。在开展科技兴牧中,我区1990年《浙江省慈溪市种蜂场》引进优良蜂种“望美”1、2号,经采用二步换王方法,在务川、凤冈县的一些主要养蜂专业户 相似文献
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湛江市区托幼儿童及中小学生常见肠道寄生虫感染的调查何健,吴文辉,陈英华(湛江市卫生防疫站,湛江524037)湛江市区中小学学生及托幼儿童肠道寄生虫的感染状况,岑衍华等曾有报道[1,2],但上述调查限于本市霞山地区。由于改革开放给湛江市的社会经济和生活... 相似文献