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【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF2基因,并制备PPV6 VP1((348 aa-675 aa))蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF2截短基因片段,将其克隆至原核表达载体pET30a(+)中构建重组质粒pET30a-PPV6-ORF2。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化后重组蛋白。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,采用Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)和间接ELISA鉴定免疫兔血清特异性。【结果】成功构建了pET30a-PPV6-ORF2重组表达载体,原核截短表达了PPV6 VP1((348 aa-675 aa))蛋白;SDS-PAGE结果显示,重组PPV6 VP1( 相似文献
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<正>"时常间,儿时蔚蓝的天空,清澈的河水,此起彼伏的蛙鸣会映入我的脑海,但这都只是记忆了。"沈阳景泉气体科技有限公司创始人栾景泉时常回忆起儿时的美好,"这些年的经济发展好了,但环境却遭到了破坏。水污染了,空气浑浊了,蔬菜食品也让人提心吊胆……特别是一些农药化肥激素的大量使用,让老百姓的餐桌也变的风声鹤唳。"作为农民的儿子,栾景泉看在眼里,急在心里,期望改变这一切,成为他创立沈阳景泉气体科技有限公司(以下简称"景泉气体")的初衷。 相似文献
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针对大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,以pGM-T、pMD-18T为载体,在传统CaCl2方法的基础上,对制备及转化条件进行了改进和优化,结果表明,42℃热激的最佳时间为100 s,最适冷却时间为6~8 min。本研究将常规的50 mL离心管改成了1.5 mL EP管,有效降低了分装过程中可能产生的污染风险,简化了试验程序,提高了转化效率。 相似文献
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市场行情的变化不是猪场老板们能左右的.但怎样根据市场行情的变化练好内功则是老板自己的事情。这就需要学习、运用现代科学养猪技术和经营方式.认真做好疫病防控,控制养猪成本.堵塞各种漏洞.创造发挥生产潜力的各种因素.以便最大限度地提高养猪经济效益。 相似文献
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