以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

摘要：以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg／孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板，用10％免血清进行封闭，以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。     

对发展我国生态畜牧业的探讨

通过分析当前我国畜牧业存在的问题,指出发展生态畜牧业是我国畜牧业发展的必然选择,并对我国应该如何发展生态畜牧业提出了建议。     

基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.     

全日制放牧BMY牛的活体采卵-体外胚胎生产-胚胎移植研究

为建立BMY牛的活体采卵(OPU)-体外胚胎生产(IVP)-胚胎移植(ET)快速扩繁技术体系,从人工草地全放牧牛群中选择健康的经产空怀BMY牛作为供体(n=14)集中OPU一次;卵母细胞经TCM-199体外成熟培养(IVM)、Fert-TALP液体外受精(IVF),受精卵用合成输卵管液(SOF)体外培养(IVC)生产胚胎;BMY牛受体(n=81)用CUE-MATETM孕酮阴道栓+EB+FSH+PG方法同期发情处理,对黄体合格的移植OPU-IVP来源鲜胚。研究结果表明:①OPU头均获卵母细胞23.50枚,获10枚以上卵母细胞的供体占85.7%;IVP的平均囊胚数和可用胚数分别为5.21和4.00枚;OPU前8～9d卵巢上有黄体(CL)的供体,头均获卵母细胞数及IVP的囊胚数、可移植胚数、囊胚率和可移植胚率分别比对照组高7.28枚(P<0.05)、7.29枚(P<0.05)、6.00枚(P<0.05)、27.3%(P<0.01)和23.2%(P<0.01);②受体黄体合格率69.1%(56/81),胚胎移植妊娠率37.5%(21/56),产犊率35.7%(20/56);③受体在胚胎移植时注射GnRH,其妊娠率比对照组高16.2%(P>0.05)。结果显示,BMY母牛具有良好的OPU潜力,但个体间差异较大;可通过严格供体选择及改善IVP技术等措施,实现OPU-IVP效率最大化。CUE-MATETM+EB+FSH+PG同期发情处理方法适于在牛规模化胚胎移植(ET)和人工授精(AI)中应用。综合应用OPU、IVP、同期发情和ET技术是加快优良BMY牛扩繁的重要途径之一。     

氟喹诺酮类药物残留免疫学检测方法的研究

以沙拉沙星(SALX)为半抗原,牛血清白蛋白(BSA)偶联后免疫兔,获得对多种氟喹酮类(FQNS)药物有特异性的广谱性抗体.以SALX与卵清白蛋白(OVA)的偶联物作包被原,建立并优化了间接竞争ELISA检测方法,对SALX最低检出限达19.319 μg/L,且对诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星均有特异性识别,最低检测限分别是22.646、26.181和19.054 μg/L.结果表明,该抗体可用于多种氟喹诺酮类药物残留筛选检测.     

《烟草育种学》课程教学改革的实践探索

河南农业大学烟草育种课程组全体教师对《烟草育种学》的教学内容、教学方式和考核形式进行了系列改革。近年来的教学实践表明,这些改革措施充分调动了学生学习的主动性,达到了改善教学质量的效果,为高等农业院校该课程的教学提供一定的参考。     

哈尔滨北方森林动物园观赏肉食目动物寄生蠕虫感染情况调查

为了解哈尔滨北方森林动物园观赏肉食目动物寄生蠕虫的感染状况,于2009年3～5月采用饱和盐水漂浮法和水洗沉淀法对犬、猫、熊和浣熊4科的67只观赏肉食目动物粪便进行了蠕虫虫卵检查。结果有19只检出虫卵,感染率为28．4％。其中猫科、熊科、浣熊科、犬科的感染率分别为63．6％、16．7％、14．3％和5．0％,在检出的虫卵中,各种蛔虫卵占优势。该调查为动物园制定肉食目动物驱虫方案奠定了基础。     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮(中蛋白日粮,低蛋白日粮和高蛋白日粮).采用半定量RT-PCR方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响.结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织IGF-Ⅰ基因的表达,随着口粮蛋白质水平的升高IGF-Ⅰ表达量增加.但表达具有组织特异性,在腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和高蛋白组均显著高于低蛋白组(P<0.05),在半腱肌组织中,高蛋白组极显著高于低蛋白组(P<0.01),而中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均无显著差异(P>0.05).     

D-半乳糖促小鼠衰老模型的衰老程度与自然生长鼠龄的比较

为探讨不同剂量D-半乳糖对小鼠的促衰程度及其与自然生长鼠年龄的对应关系,应用改进的邻苯三酚自氧化法对自然生长鼠和D-半乳糖促衰小鼠肝脏中SOD活力进行了测定、比较和分析。结果表明,自然生长鼠约从11月龄开始进入明显的衰老期,至17月龄衰老程度较高,至21月龄时小鼠的衰老程度极高。还总结了不同剂量D-gal促衰鼠与自然生长鼠年龄的对应关系。     

苦参苍术口服液的抗炎与止泻作用研究

为研究苦参苍术口服液的抗炎、止泻作用,观察了不同剂量苦参苍术口服液对二甲苯致小鼠耳肿胀及蓖麻油致小鼠腹泻的影响。结果显示,苦参苍术口服液能抑制二甲苯导致的小鼠耳肿胀,减轻蓖麻油造成的小鼠腹泻,并呈剂量依赖关系（P〈0．05）,提示其具有明显的抗炎和止泻作用。该试验可为参苍术口服液的进一步研究与临床应用提供参考。