Prevalence of serogroups and virulence factors of Escherichia coli strains isolated from pigs with postweaning diarrhoea in eastern China

This study was undertaken to determine the present distribution of serogroups, hemolytic activity and virulence factors among Escherichia coli strains isolated from pigs with postweaning diarrhoea from eight provinces in eastern China. Two hundred and fifteen E. coli isolates were serogrouped with O-antisera, investigated for hemolytic activity, assessed for F4, F5, F6, F18 and F41 fimbrial antigens by monoclonal antibodies and detected for genes of enterotoxins and shiga-toxin-two-variant (Stx2e) by a multiplex polymerase chain reaction (PCR). Among these E. coli isolates, 140 were determined to be placed in serogroups, 52 were unable to be serogrouped and the rest 23 auto-agglutinated. These isolates distributed in 45 serogroups and 64.3% (90/140) belonged to 12 O serogroups: O8, O9, O11, O20, O32, O91, O93, O101, O107, O115, O116 and O131. Hemolytic activity was detected in 11.6% (25/215) of all isolates. Several uncommon O serogroups were discovered in this study. Agglutination tests showed that 50.2% (108/215) of these isolates were positive for one or more of the five fimbrial antigens. Seventy-two E. coli strains expressed single fimbria and 36 strains expressed two or more fimbriae. Among these 215 E. coli isolates, strains expressing F18, F4, F6, F6 + F18 or F5 + F41 occurred more frequently. PCR analysis showed that 60.5% (130/215) of the isolates only harboured the gene of estI (STI) while 6.0% (13/215) strains possessed the genes of stx2e, estI and estII and 5.6% (12/215) of strains had the genes of estI/estII. Of all these isolates, 107 (49.8%) were negative for the fimbrial antigens examined. The fimbria-negative isolates usually possessed genetic determinant of estI (78, 72.9%).     

低压射流不同喷嘴参数及压力下破碎过程实验

研究了不同低压下喷头喷嘴直径和喷嘴锥角对射流破碎的影响。采用高速摄像仪对低压圆柱射流的射流核心长度和射流破碎长度进行实验,测量了不同喷嘴结构的流量、射程和末端水滴直径。结果表明:同一压力下,当喷嘴锥角不变时,随着喷嘴直径的增大,喷头流量、射程和喷头末端水滴直径都变大,射流核心长度和破碎长度均增大;当喷嘴直径不变时,随着喷嘴锥角的增大,喷头流量逐渐减小,而喷头射程呈先增大后减小趋势,喷头末端水滴直径也变大,射流核心长度逐渐减小,射流破碎长度先减小后增大。综合考虑射程和雾化效果,直径为5 mm、锥角为45°的喷嘴为最优选择。同时通过对不同Re数和We数的实验和分析,给出了适合低压喷嘴的两种射流特征长度的拟合关联式。     

鸭源大肠杆菌O_(78)菌蜕的制备及免疫原性研究

为制备大肠杆菌(E.coli)菌蜕并研究其免疫原性,本研究将带有裂解基因E的质粒pHH43转化致病性鸭源E.coli O78,构建获得E.coli O78/pHH43重组菌。于不同培养温度下研究重组菌E裂解蛋白表达所介导的宿主菌的裂解情况,结果显示在42℃培养时最佳诱导时间为4h,约90%的重组菌被裂解失活,以冻干法及添加庆大霉素完全灭活未裂解的细菌后制备"菌蜕疫苗"。雏鸭免疫试验表明,接种E.coli O78/pHH43菌蜕两周后免疫雏鸭可产生对同源强毒菌株致死剂量攻击的免疫保护。比较E.coli O78/pHH43菌蜕与甲醛灭活的同株E.coli所诱导的免疫保护效果,结果免疫保护率分别为87.5%和75%,表明菌蜕比甲醛灭活法能更有效地诱导机体的特异性免疫应答。     

蚕蛹油微胶囊的制备

为了改善蚕蛹油的加工性能和延长其保质期,以大豆蛋白和β-环状糊精为壁材,采用喷雾干燥法制备蚕蛹油微胶囊。依据蚕蛹油微胶囊乳状液的稳定性检测指标,确定壁材大豆蛋白和β-环状糊精的质量比为1∶1。通过正交试验确定制备蚕蛹油微胶囊的最佳工艺条件为:芯材(蚕蛹油)与壁材的质量比为1∶2,乳状液中固形物的质量分数为20%,均质压力25MPa,喷雾干燥的进风温度190℃。在此工艺条件下制备蚕蛹油微胶囊的包埋率为91.2%。     

磺胺类衍生物对肉鸡生长代谢的影响

将3种不同剂量(12、16、20mg/kg配合料)磺胺类衍生物(简称G98)添加到基础日粮中，通过调动肉鸡内源性激素代谢促进肉鸡生长。研究结果表明，7～52日龄肉鸡，试验各组与对照组相比，体增重、采食量、饲料转化率以及胸肌粗蛋白均不同程度提高；胸肌粗脂肪均下降；与生长有关的内源性激素水平也相应改善；屠宰测定中相关指标发生改变。结果表明，采用G9816mg/kg配合料饲喂肉鸡，生长代谢的效应最好。     

顶复门原虫电子转移链代谢及Ⅱ型NADH脱氢酶研究进展

顶复门原虫是包括刚地弓形虫、疟原虫及球虫等在内的一大类寄生性原虫的总称,可引起重要的人畜寄生虫病.抗顶复门原虫药物的长期使用,甚至是滥用,使得这类寄生虫对现有药物产生了明显的抗药性,急需开发新型药物.Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶是电子转移链途径中的关键酶,由于其仅存在于某些植物、细菌、真菌和寄生原虫等一些低等生物体内,而在高等动物体内缺失,是研发新型抗感染性药物的重要靶标.笔者主要针对顶复门原虫线粒体电子转移链代谢途径以及Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶的研究概况进行综述.     

自身启动子控制的卡那霉素抗性基因在哺乳动物细胞中表达的检测

为了研究卡那霉素抗性(KanR)基因能否在哺乳动物细胞中表达以及用含相同抗性基因重组质粒防治奶牛乳腺炎的安全性,用PCR从重组质粒p215C3LYZ中扩增得KanR基因,将其克隆入原核表达载体pQE-31,用含卡那霉素(Kan)琼脂平板筛选得KanR重组菌,经IPTG诱导成功表达了预期大小的Kan抗性融合蛋白;用纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得了Kan抗性蛋白抗血清,经Western blotting证明免疫血清特异性良好;分别用重组质粒pQE-Kan和p215C3LYZ转染COS-1细胞,在不含抗生素培养液中培养后分别收集细胞上清和细胞裂解物;将转染细胞上清分为添加和不加Kan组,接种Kan敏感菌DH5α大肠杆菌,培养物的OD600检测结果显示,添加组的指示菌生长被抑制,转染细胞上清中无Kan抗性蛋白表达;以Kan抗性蛋白免疫血清进行的Western blotting结果显示,转染细胞内无Kan抗性蛋白表达;将p215C3LYZ注射奶牛乳腺,用脱脂和浓缩奶样进行Western blotting检测,结果显示试验牛乳中也无Kan抗性蛋白表达。这些试验结果提示,来源于原核大肠杆菌的KanR基因启动子在动物细胞中无转录活性,乳腺注射含KanR基因的重组质粒不会表达对奶牛和人体有害的Kan抗性蛋白。     

胰岛素对雏鸡心肌发育及其超微结构的影响

选取16只体重相近的健康雏鸡,随机分为两组。试验组每天定时腹腔注射生理剂量胰岛素,对照组腹腔注射等剂量的生理盐水。连续注射10d后称重,剖检取样并制片,通过分析心体比和透射电镜观察雏鸡心肌的超微结构变化,探讨胰岛素对雏鸡心肌发育及其超微结构的影响。结果表明,与对照组相比,试验组雏鸡的体重、心脏重和心体比没有显著变化,但其心肌的线粒体数量和横截面积明显增加。提示生理剂量胰岛素有促进心肌细胞代谢的作用。     

鸡源大肠杆菌在亚抑菌浓度头孢菌素诱导下的体外耐药表型

为了解在亚抑菌浓度单一药物的持续诱导下,鸡源大肠杆菌(E.coli)对临床常见药物的耐药表型变化,本实验采用亚抑菌浓度的头孢曲松或头孢噻肟持续诱导培养LG30鸡源E.coli和O78标准菌至30代,并采用微量稀释法检测各不同诱导代次的菌株对常见药物的耐药表型.结果表明在亚抑菌浓度的头孢曲松或头孢噻肟持续诱导培养下,受试菌对药物的敏感性持续下降,当诱导至20代,各诱导菌已成为多重耐药菌株,继续诱导至30代,各诱导菌对药物的耐药程度加重,但各药的最小抑菌浓度值升高速率变慢.表明细菌在单一药物诱导下可以较快进化为多重耐药菌.     

短时高温处理对意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白表达的影响

本研究采用免疫组织化学分析方法,测定了HSP70蛋白在意大利蝗卵子发生期的表达定位及33~42℃高温处理对其相对表达量的影响。结果表明,1)在卵黄发生前期,卵母细胞和滤泡细胞均表达HSP70蛋白,而在卵黄发生期和卵黄发生后期,HSP70蛋白阳性表达位于滤泡细胞;2)在33~42℃温度范围内,随着温度升高,意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白相对表达量呈现先上升后下降的变化趋势;其中36℃处理组HSP70蛋白相对表达量最高,显著高于27℃对照组(P0.05);42℃处理组HSP70蛋白相对表达量最低,但与27℃对照组差异不显著(P0.05)。短时高温处理对意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白相对表达量有显著影响,推测HSP70蛋白的表达在意大利蝗抵抗短时高温胁迫过程中具有重要作用。