美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化

对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。     

狂犬病套式PCR检测技术的研究

设计两对引物M1/M2、N1/N2建立起套式PCR,该方法能检测出含0.3LD50狂犬病病毒,比普通PCR的敏感性提高了10000倍,通过27份阳性病料的序列分析,所检测出的病毒全部是狂犬病病毒,具有很强的特异性。表明套式PCR技术具有快速、敏感、特异的特点,可广泛应用于实验室狂犬病的诊断及流行病学调查。     

犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验

以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空载体质粒及生理盐水,8周接种1次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制抗体效价,第2次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第3次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7天及第14天时采血,测定血清的血凝抑制抗体效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空载体质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。证明所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。     

利杂犊牛小肠各段长度与黏膜结构的发育学变化

利用图像分析法研究1月龄,4月龄和6月龄健康利杂犊牛小肠结构的发育形态变化。结果显示,犊牛小肠各段在不同的月龄,其长度变化差异显著(P<0.05);不同月龄犊牛的十二指肠、空肠、回肠的黏膜厚度、肌层厚度不同程度的增加且差异极显著(P<0.01);从1月龄至6月龄,十二指肠、回肠绒毛长度分别增加45.7%和8.0%;而空肠的绒毛以4月龄最长(392.48μm),绒毛高度/隐窝深度(V/C)值以4月龄的最大(2.63),且与1月龄和6月龄时比较差异极显著(P<0.01),但1月龄与6月龄相比较差异不显著(P>0.05)。结果提示,6月龄前犊牛小肠黏膜结构变化较大,犊牛断奶合理日龄应进一步研究。     

醉马草化学成分预试及毒性部位筛选

以春秋两季醉马草样品作为试验材料,粉剂样品分别做系统预试验比较所含主要成分种类和数量上的差异,并通过分光光度法测定了2种材料的生物碱和黄酮含量;分别用不同极性溶剂制作的悬浮液,做毒性筛选试验。结果表明,春季材料含的生物碱类成分远远超过秋季材料,而秋季材料所含的黄酮类成分远远超过春季材料;毒理试验表明,毒性成分主要集中在春季材料的950 mL/L乙醇提取部分。     

猪附红细胞体的形态学观察

应用光学显微镜和电子显微镜对猪附红细胞体显微结构和超微结构进行观察。结果显示,附红细胞体属典型的原核生物,多数为大小不等的球形、卵圆形、杆状等多形态生物体,直径为0.2μm~2.5μm,常在红细胞表面或血浆中单个或成团寄生。该病原无细胞壁,由单层界膜包裹着,无明显细胞器和细胞核。附红细胞体通过一些细丝连接到红细胞膜上,使红细胞膜表面出现皱褶、突起、凹陷,导致红细胞结构和功能改变。     

非淀粉多糖酶对奥尼罗非鱼生长及抗菌力的影响

本文旨在研究非淀粉多糖酶对奥尼罗非鱼的生长及其抗菌力的影响。试验选用体重约60 g的奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)560尾,随机分成4个处理组,每组7个重复,每重复20尾奥尼罗非鱼,分别投喂添加不同梯度的液体酶制剂(0、0.1、0.2和0.4 mL/kg的饲料)。结果表明:(1)非淀粉多糖酶对罗非鱼的特定生长率、饲料转化率等生产性能指标均有显著升高(P<0.05);(2)添加非淀粉多糖酶0.2 mL/kg和0.4 mL/kg显著提高了罗非鱼白细胞的吞噬活性(P<0.05)和血清的杀菌能力(P<0.01),试验组各组织溶菌酶活力也显著增加(P<0.05)。     

中华鲟幼鲟维生素C营养需要的研究

本研究旨在确定中华鲟幼鲟对维生素C(VC)的营养需要量。配制含VC分别为0.5、59.8、119.5、239.1、478.1和956.2 mg/kg饲料的6组日粮(分别编号为C0.5、C59.8、C119.5、C239.1、C478.1和C956.2),连续投喂中华鲟幼鲟8周后,以生长速度、组织VC含量和部分相关酶活性来确定中华鲟对VC的需求量。结果表明,C0.5和C59.8组鲟鱼的增重率、饲料效率、蛋白质效率都低于C119.5组,进一步提高饲料VC含量,也没有显著变化(P>0.05);C478.1组的肝脏和肌肉组织VC含量达最高水平;C239.1组血清溶菌酶活性最高;C239.1组SOD活性最低。根据平均增重率和饲料效率做折线法分析表明,维持中华鲟最佳生长的饲料VC含量为108.5 mg/kg;肝脏中VC含量达最大时饲料VC添加量为309.4 mg/kg;肌肉中VC含量达最大时饲料VC添加量为273.3 mg/kg。     

树木提取液抑制白蚁的效能试验

通过26种树木的不同提取液室内制剂筛选试验,从中筛选出灭蚁活性较强的树木提取液,分别配制9种单剂,在小型试验基础上优选配方,结合植物资源等因素,研制成环保型灭白蚁粉剂。用该粉剂在厦门、福州的公园中进行防治树木白蚁的药效试验,结果表明:处理后10 d的防效为76%~100%,处理后20 d的防效为81%~100%,处理后30 d的防效为100%,并且施药9个月后检查仍能持效。     

日粮中添加NCG对妊娠前期鄂尔多斯细毛羊血液、尿囊液和羊水中氨基酸浓度的影响

为了研究日粮中添加NCG(N-氨甲酰谷氨酸)对妊娠前期鄂尔多斯细毛羊血液、尿囊液和羊水中氨基酸浓度的影响,试验选择年龄、胎次和体况相近、平均体重为50.62±0.52 kg的受孕鄂尔多斯细毛羊母羊40只,随机分为3组(NCG1组饲喂基础日粮+0.30 g NCG/d(n=13),NCG2组饲喂基础日粮+0.40 g N...