ESAT-6及PPD ELISA检测疫区和非疫区牛结核病的比较研究

本实验克隆、表达了牛结核早期分泌靶抗原蛋白6（ESAT-61抗原,建立了ESAT-6酶联免疫吸附检测方法（ELISA）。同时应用牛结核提纯菌素（PPD）ELISA和ESAT-6-ELISA对采自疫区的641头牛和非疫区的324头牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有581头阳性牛,阳性率为90．64％,非疫区有2头阳性牛,阳性率为0、62％;ESAT-6-ELISA检测中,疫区有567头阳性牛,阳性率为88．45％,非疫区没有阳性牛。对采自疫区的23例变态反应阳性牛和非疫区的7例变态反应阳性牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有20头为阳性。与变态反应的符合率为86．90％,非疫区有1头为阳性,与变态反应的符合率为14％;在ESAT-6-ELISA检测中,疫区有18头为阳性,与变态反应的符合率为78．30％,非疫区没有阳性。这些结果表明：ESAT-6-ELISA的敏感性要低于PPD-ELISA;牛结核ELISA在非疫区应用效果较差,在疫区更具有应用价值。     

Lentivirus-mediated calcitonin gene-related peptide transfection enhances endothelial differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells

AIM：To study the effect of calcitonin gene-related peptide (CGRP) gene transfection mediated by lentivirus on the differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) to endothelial cells. METHODS：Rat bone marrow MSCs were isolated by density gradient centrifugation combined with adherence method. Recombinant lentivirus vector carrying CGRP gene (Lenti-CGRP) was transfected into the MSCs. The secretion of CGRP in culture supernatants of the transfected MSCs was detected using ELISA method. The cells at passage 3 were divided into three groups: CGRP group (MSCs transfected with Lenti-CGRP), CGRP+CGRP8-37 (an antagonist of CGRP receptor) group and control group (MSCs transfected with PBS). The differentiation of the MSCs was detected by immunocytochemical staining for CD31 and factor Ⅷ-related antigen. The proliferation of the cells was measured by cell counting, and the angiogenic ability of the cells was analyzed using Matrigel assay. RESULTS：The proportion of CD31-and factor Ⅷ-related antigen-positive cells in CGRP and CGRP+CGRP8-37 groups was larger than that in control group (P<0.05). The numbers of the cells in CGRP and CGRP+CGRP8-37 groups were significantly increased compared with control group (P<0.05). Lumen-like structures were observed in CGRP and CGRP+CGRP8-37 groups. The above indexes in CGRP+CGRP8-37 group were reduced compared with CGRP group. CONCLUSION: Transfection with CGRP gene induces rat bone marrow MSCs to differentiate into endothelial cells and enhances their proliferation, suggesting that CGRP may play a role in the regulation of angiogenesis.     

菊花白锈病研究进展

菊花白锈病(Puccinia horiana Henn.)是菊花重要的流行性病害,也是多国检疫性病害,在经济上给切花菊生产造成重大损失,且有逐年加重的趋势.切花菊产业化生产刚刚在我国兴起,国内对菊花白锈病发生危害以及防治技术了解较少.现首次系统介绍国内外菊花白锈病的分布与为害、发病规律和防治技术等方面的研究进展,为我国菊花白锈病的研究和防治提供参考.同时探讨了菊花抗病研究的发展方向和策略.     

我国作物病虫害生物防治研究与应用最新进展

本文总结了近5年来我国在作物病虫害生物防治研究和应用方面的最新进展, 包括作物害虫、病害(真菌、细菌和病毒病)和线虫的生物防治、植物免疫和昆虫性信息素的研究和应用, 以及新方法和新技术在作物病虫控制中的应用。同时, 与国外的研究进展进行了比较, 指出了存在的主要问题、发展趋势与对策建议。     

重组基因工程乳酸菌的研究进展

乳酸菌作为人和动物体内的正常菌群,具有诸多益生功能.随着分子生物学研究的不断深入,重组基因工程乳酸菌研究取得了较快进展.在构建表达外源功能性基因的重组基因工程乳酸菌、表达保护性抗原蛋白质用以递呈黏膜免疫抗原的过程中,乳酸菌质粒载体起到了至关重要的作用.电转化技术的应用,简化了操作过程,推动了重组基因工程乳酸菌的研究与应用.     

几种抗生素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响

研究了氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)和卡那霉素(Km)对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响。结果表明,Amp对巴梨叶片分化影响较小,当浓度达500mg/L时,其出愈率和不定梢再生率分别为96.48%和56.17%,与对照差异不显著;Cef浓度在50-300mg/L时对巴梨和身不知叶片再生均无显著影响,只有当Cef浓度高于400mg/L时,巴梨的不定梢再生率才受到显著抑制;巴梨和身不知叶片对Carb的反应不相同,低浓度(≤200mg/L)的Carb对巴梨的出愈率和不定梢再生率影响较小,却显著抑制身不知的不定梢再生率,高浓度(≥300mg/L)的Carb不仅极显著抑制巴梨和身不知的出愈率,而且完全抑制了2者的不定梢再生;Km浓度大于10mg/L时,明显抑制愈伤组织的生长,且随着浓度的增加,死亡率逐渐增大,当Km浓度达100mg/L时,巴梨和身不知叶片死亡率达100%和96.30%。     

地方高校基于培养学生创新能力的“食品微生物学”课程教学

食品微生物学是食品类专业的主干课程之一,其教学效果的好坏对该专业人才培养有极其重要的作用。现有的教学方式不能实现食品微生物学作为一门实践性学科应有的作用。在食品微生物学教学改革中,结合学生对食品微生物学的认识,筛选科研素材和新产品,并在理论和实践教学中引导学生开展科研创新训练。通过改革,旨在达到增强学生创新能力、提高学生综合素质和应用微生物学知识进行食品行业的创新和产品升级。     

浅谈强化《家畜外科手术学》教学效果的体会

《家畜外科手术学》课程是本科生兽医专业教学的一个重要环节,是提升学生学习兴趣、强化实践操作能力的重要桥梁。提高《家畜外科手术学》的教学质量,对于学生培养基本技能和掌握手术的基本操作技术,具有非常重要的意义。经过多年教学实践,摸索并总结出兴趣+理论+实践的教学方法,取得了良好的教学效果。     

马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株囊膜基因的优化及其DNA疫苗体外瞬时表达研究

马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)的密码子使用频率与哺乳动物间存在着明显差异。为此,对马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株(DLA-EIAV)囊膜全长基因按照哺乳动物优势密码子的使用原则进行了重新设计和合成,并以此为基础通过重叠延伸PCR、限制酶切等方法得到结合型和分泌型囊膜基因,将其插入含有鸡beta-actin/兔beta-globin复合启动子(AG)的高效表达载体pCAGGS中,构建了EIAV驴白细胞弱毒疫苗株结合型和分泌型囊膜基因的DNA疫苗质粒pCAGGS-opti-bou-env、pCAGGS- opti-sec-env。将构建的质粒纯化后分别转染293T细胞,以间接免疫荧光和Western blot方法检测转染48 h后细胞及上清中囊膜蛋白的表达。结果显示,两种表达质粒均可正确表达EIAV囊膜蛋白,与相对应未优化的表达载体pCAGGS-wt-bou-env和pCAGGS-wt-sec—env相比,密码子优化的基因体外瞬时表达水平有极为显著的提高,而且蛋白表达部位也与预期的结果符合。这一结果为EIAV囊膜蛋白的单抗制备、表位鉴定、免疫试验、新疫苗的开发等奠定了基础。