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Comparison of dot blot hybridization, polymerase chain reaction, and virus isolation for detection of bovine herpesvirus-1 (BHV-1) in artificially infected bovine semen. 总被引:2,自引:0,他引:2
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Bovine semen samples spiked with bovine herpesvirus 1 (BHV-1) were used to compare dot blot hybridization, polymerase chain reaction (PCR), and virus isolation for detection of BHV-1 in bovine semen. The PCR amplification used primers targeting the BHV-1 thymidine kinase gene and a nucleic acid releasing cocktail (GeneReleaser); the PCR product was used as the DNA probe in dot blot hybridization; virus isolation was done in primary bovine fetal testis (BFT) cell cultures. Semen diluted 1:20 in tissue culture medium had the least cytotoxicity and inhibition of viral cytopathic effects in BFT cells, allowing detection of 1 TCID50/100 microL of BHV-1 suspension by virus isolation. The presence of foreign DNA such as bovine sperm DNA or salmon sperm DNA increased the sensitivity of dot blot hybridization in detecting BHV-1, allowing detection of 20,000 TCID50/100 microL of neat semen. The inhibition of PCR amplification of BHV-1 DNA in bovine semen was eliminated by diluting the samples 1:20 in tissue culture medium. The best PCR amplification was obtained when semen was diluted 1:20 and when a reaction buffer of pH 9.0, with 1.0 mM MgCl2 was used. Under these conditions, the PCR followed by ethidium bromide staining of agarose gels could detect 1 TCID20/100 microL of sample, whereas PCR followed by Southern blot hybridization could detect 0.01 TCID50/100 microL of sample.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) 相似文献
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研究了叶面喷施抗蒸剂对盆栽苹果水分状态的影响。结果表明:抗旱剂一号(主要成分为黄腐酸)可明显降低树体蒸腾(最低时为对照的39.21%)、提高气孔阻力(最大时为对照的243.96%)和叶片水势(一般比对照提高0.2-0.4MPa、最大0.7MPa),并对叶温未产生明显的影响(变化一般小于1℃),有效作用期长达15d以上。在果树旱期喷施,可明显改善树体水分状态。腐殖酸效果不明显。 相似文献
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进一步探讨了制定科研评价体系的原则、方法等,并结合目前我国研究型大学的实际情况初步提出了一套科研评价指标体系。 相似文献
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在沙尘暴应急监测方法研究中,通过对总悬浮颗粒物采样仪器及各种采样参数的研究确定和降尘采样器的研制,制定出沙尘暴应急监测方法。 相似文献
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丹东市林业资源综合分析 总被引:1,自引:0,他引:1
分析了丹东市林业资源现状;指出了目前存在的主要问题;提出了合理开发利用林业资源的措施。 相似文献
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北疆棉花不同品种叶绿素荧光特性的研究 总被引:8,自引:3,他引:5
测定了北疆6个不同棉花品种田间叶片的净光合作用、荧光参数的变化。结果表明:晴天棉花叶片的光化学效率(Fv/Fm)随着光强上升而下降,到14∶00左右降到最低值,之后又随光强的减弱逐渐回升;非光化学猝灭系数(qN)则与此相反。棉叶在晴天易发生光抑制,可能会引发反应中心的降解等破坏反应。产量较高的新陆早8号和新陆早10号的Fv/Fm、光化学猝灭系数(qP)均高,且正午过后Fv/Fm恢复较快,不仅能较强地吸收光能,同时还具有较高的PSII的活性和光能转化效率,从而将所吸收的光能有效地转化为化学能,提高光合电子传递速度,形成更多的ATP和ENADPH,为光合碳同化提供充分的能量和还原能力。 相似文献