检测PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步应用

根据GenBank中的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2、猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,设计了3对引物,成功建立了检测PRV野毒株、PCV-2和PPV的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为288 bp、419 bp、681 bp。敏感性、特异性试验结果显示,该PCR对3种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 48.2 pg/L、PCV-2 36.7 pg/L、PPV 0.25 ng/L,而PRV(gE基因缺失株)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。对87份自然感染病猪样品的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床PRV野毒株和gE基因缺失疫苗株、PCV-2和PPV的检测。     

白花草化学成分分析与抗菌作用研究

采用试管预试法和圆形滤纸法分析了白花草的化学成分。结果表明,白花草含有酚性成分、有机酸、生物碱、糖类、鞣质、植物甾醇、三萜类、黄酮、甙类、皂甙和挥发油等化学成分。采用试管倍比稀释法和纸片法对白花草乙醇提取物水溶液进行了家畜常见病原微生物的体外抑菌试验,结果白花草乙醇提取物水溶液对金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有较强的抑菌作用,其抑菌圈直径分别为(17.82±2.42)mm、(16.80±1.55)mm、(13.40±2.15)mm、(14.30±1.82)mm、(16.00±3.46)mm;最低抑菌浓度(MIC)分别为0.063 g/mL、0.125 g/mL、0.500 g/mL、0.250 g/mL和0.125 g/mL。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank上猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株的核苷酸序列与古典美洲株的核苷酸序列,设计一对高致病性PRRSV特异性引物,结合快速的RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立高致病性PRRSV快速RT-PCR检测体系。通过测序和同类试剂盒检测效果比对,证实该体系检测结果准确,体系特异性和灵敏度试验结果显示,该体系对猪瘟病毒、普通PRRSV、禽流感病毒无扩增产物,至少能检测经10万倍稀释后的临床阳性样品。该方法可直接对可疑组织样品进行检测,操作简单、快速、价廉、受环境因素污染概率小,适合临床样品的检测。     

肉兔血浆碱性磷酸酶活性比较及其与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ ) 1 0 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)活性 ,及其与1 0 0日龄体重、平均日增重和料重比的关系进行了研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆 AKP活性显著高于其他 5个品种 (或组合 ) (P<0 .0 5) ,其他 5个品种 (或组合 )间血浆 AKP活性差异不显著 (P>0 .0 5)。 8个品种 (或组合 )血浆AKP活性与 1 0 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数达极显著水平 (P<0 .0 1 ) ;与料重比均呈负相关 ,但不显著 (P>0 .0 5)     

营养限制对断奶羔羊血浆和胃肠道上皮组织抗氧化能力的影响

本研究旨在探讨能量、蛋白质或能量与蛋白质同时限制饲养对断奶羔羊血浆和胃肠道上皮组织抗氧化能力的影响.选取48头28日龄断奶羔羊,按随机区组原则分配到以下4组中:对照组、40%能量限制组、40%蛋白质限制组以及40%能量与40%蛋白质同时限制组.每组4个重复,每个重复3只羊.试验分为营养限制期(7周)和营养恢复期(9周),共16周.结果表明:能量或蛋白质限制显著降低第21天血浆谷胱甘肽还原酶(GR)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),同时显著提高第21天丙二醛(MDA)含量(P<0.05),此外,蛋白质限制显著提高第41天MDA含量(P<0.05);能量与蛋白质同时限制显著降低第21天血浆过氧化氢酶(CAT)、GR活性,第41天血浆CAT、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及第21天、第41天和第111天血浆T-AOC(P<0.05),同时显著提高第21天和第41天血浆MEA含量(P<0.05).试验第42天,能量限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜谷胱甘肽(GSH)含量、空肠黏膜CAT和GR活性(P<0.05);蛋白质限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜GSH含量、空肠黏膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和T-AOC(P<0.05);能量和蛋白质同时限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜GSH含量和CAT活性,空肠黏膜SOD、GSH-Px和GR活性以及T-AOC(P<0.05).试验第112天,能量限制显著降低空肠黏膜SCD活性和T-AOC(P<0.05);蛋白质限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜T-AOC以及空肠黏膜SOD活性(P<0.05);能量和蛋白质同时限制显著降低瘤胃上皮和空肠黏膜T-AOC以及空肠黏膜GSH含量和SCD、GR活性(P<0.05).由此得出,对断奶羔羊进行能量、蛋白质或能量与蛋白质同时限制饲养会降低羔羊血浆和胃肠道上皮组织的抗氧化能力,并且该影响在试验观测期内不随营养水平的恢复而彻底解除.     

妊娠期山羊卵巢中雄激素受体的免疫组化定位

用免疫组织化学技术对不同妊娠时期山羊卵巢组织中雄激素受体的表达及其变化规律进行研究,以探讨雄激素受体在卵巢生殖功能中的调节作用。结果显示,妊娠期黄体细胞的形态结构随所处妊娠的不同阶段而变化,退化黄体细胞数量随周期进程逐渐增多。在妊娠各时期卵巢的被膜、次级卵泡颗粒层细胞和黄体细胞均存在雄激素受体的阳性表达,从阳性反应产物定位来看,阳性反应主要位于细胞膜和细胞质内;随妊娠进程雄激素受体的表达强度逐渐减弱。     

上海PMWS并发PRRS自然病例的病理组织学观察

对上海5例5～13周龄断奶仔猪多器官衰竭综合征（PMWS）并发猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）自然病例进行了病理组织学观察。结果：5例病猪均出现坏死性淋巴结炎、间质性肺炎以及不同程度的坏死性脾炎、间质性肾炎和肝炎。2例病猪出现心肌炎，表现为心肌纤维断裂、溶解和心肌间质中淋巴细胞局灶性浸润。2例病猪出现脑炎，在大脑白质区出现神经胶质细胞结节。     

酸奶及乳饮料中大肠杆菌变化趋势研究

[目的]为了探讨实际生产过程中酸奶和乳饮料感染大肠杆菌（E.coli）后的变化情况及影响因素。[方法]将大肠杆菌标准菌株接种至酸奶、乳饮料及培养基中,设置不同的储藏温度、pH,定期测定储藏过程中大肠杆菌含量变化情况。[结果]随着储藏时间延长,不同储藏温度（4℃和25℃）,不同pH(4.2和3.6)的酸奶和乳饮料中大肠杆菌含量均减少,相对于储藏于4℃的产品,储藏于25℃的产品中菌含量降低更快;当产品pH为3.6时,菌含量减少速率高于pH为4.2的产品。将大肠杆菌置于不同pH的培养基中培养,结果表明,当pH<3.8时,大肠杆菌的活性将会受到抑制,证明了pH对大肠杆菌的影响。[结论]本研究为实际生产加工过程中产品冷藏及脱冷条件下大肠杆菌的检验检测和产品质量控制提供理论依据和理论指导。     

京海黄鸡IGF-IR基因外显子3多态性及遗传效应分析

结合PCR-SSCP与PCR-RFLP技术,检测分析了京海黄鸡母鸡IGF-IR基因第3外显子SNPs的特点及其对京海黄鸡母鸡生产性状的遗传效应。结果在该段序列检测到2个点突变:P1(G11 0996C)、P2(C11 1014A),2位点均表现出3种基因型,其中P1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态。最小二乘方差分析表明,P2位点AA型个体初生重显著高于CC、CA型个体(P<0.05)。联合基因型分析表明,GC/AA基因组合型母鸡开产较晚但开产蛋重较高;CC/CA型个体,其12周龄、300日龄体重极显著低于CC/AA型个体(P<0.01),初生重、4周龄、12周龄、16周龄和300日龄体重显著低于其他基因组合型个体(P<0.05);CC/AA型个体12周龄、300日龄体重极显著高于GC/CC、CC/CA型个体(P<0.01),16周龄体重显著高于GC/CC、GC/CA、GC/AA、CC/CA型(P<0.05)。利用基因组合型GC/AA、CC/CA、CC/AA与生产性能间的关联特性指导京海黄鸡,能够为利用分子标记加快京海黄鸡的保种和育种进程提供有益参考。     

桑叶中黄酮化合物的提取工艺及不同品种不同时期的含量变化

探讨了不同单因子对桑叶中黄酮成分浸提效果的影响。用80%乙醇作溶剂,原料质量浓度50.00 g/L,于70℃、pH 8的条件下浸提3 h并抽提2次的提取效果较好。以毛细管电泳仪测定、分析了不同品种、不同时期桑叶中的芦丁、槲皮素等成分,湖桑9001叶片中的芦丁含量高,湖桑32号的槲皮素含量高,10月份采摘桑叶中的芦丁和槲皮素的含量最高。芦丁、槲皮素等成分在桑叶中的动态变化:以10 mmol/L磷酸二氢钠-20 mmol/L的硼砂溶液(pH 8.62)作缓冲液,在25℃,20 kV的压力下电泳,245 nm波长处检测,线性关系良好,在8 m in内完全分离。