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101.
猪多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立猪多杀性巴氏杆菌(Pm)的快速检测方法,本研究以Pm的PlpB基因序列为靶基因设计特异性引物,建立了Pm特异性的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.经反应条件优化,确定反应条件为63℃,20 min.检测结果显示,建立的LAMP检测方法具有良好的特异性,灵敏度为25 cfu/mL;与大肠杆菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、沙门氏菌无任何交叉反应.采用建立的LAMP方法与常规PCR方法对临床54份分离样品进行检测,检测结果为31份为阳性,23份为阴性,二者符合率为100%.该方法的建立为Pm在临床上的快速检测提供了一种新的技术手段. 相似文献
102.
103.
104.
猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
从上海地区5个发病猪场的病料中,分离到3株致Marc-145细胞病变的病毒:SH1、SH2和SH3,理化特性研究表明,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热(56℃)、酸(pH6以下)、碱(pH8以上)敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主,囊膜上有纤突,直径为60 ̄100nm;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为45 ̄80nm。间接免疫荧光试验表明,3株分离毒均与PRRSV高免血清呈强阳性反应,而与HCV、PPV、PRV、TGEV高免血清的反应均呈阴性。综上可见,所分离的病毒为PRRSV。 相似文献
105.
106.
为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。 相似文献
107.
本试验旨在研究不同水平维生素A对青农灰鹅生长性能、血清生化指标及组织中维生素A含量的影响。选用1日龄青农灰鹅200只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复10只鹅。各组在玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加0、1 500、3 000、6 000和12 000 IU/kg的维生素A。试验期12周。结果表明:1)饲粮添加维生素A能显著提高1~4、5~12周龄青农灰鹅平均日增重和平均日采食量(P<0.05),降低死淘率,但对料重比影响不显著(P>0.05)。2)4周龄时,添加6 000 IU/kg维生素A显著降低了血清尿酸含量(P<0.05),添加3 000和6 000 IU/kg维生素A极显著提高了血清碱性磷酸酶活性(P<0.01),但对血清总蛋白、血糖和尿素氮的含量影响不显著(P>0.05);12周龄时,添加6 000 IU/kg维生素A显著降低血清血糖和尿酸含量(P<0.05),极显著提高了血清碱性磷酸酶活性(P<0.01),但不同水平维生素A对血清总蛋白、尿素氮的含量影响不显著(P>0.05)。3)随着饲粮中维生素A添加水平的提高,血清及肝脏中维生素A含量极显著增加(P<0.01)。由此可见,本试验条件下,以生长性能作为衡量标准,1~4周龄青农灰鹅饲粮维生素A适宜添加水平为8 000 IU/kg,5~12周龄为9 000 IU/kg;以血清生化指标作为衡量标准,1~4、5~12周龄维生素A添加水平均以6 000 IU/kg为宜。 相似文献
108.
为建立可检测鹿流行性出血病病毒(EHDV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中EHDV的VP7基因进行序列分析,设计EHDV特异性探针并用生物素标记,与荧光编码微球偶联后与病毒VP7基因的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Liquichip200)检测荧光信号建立了EHDV快速高通量液相芯片检测方法。检测结果显示,该法具有较好的特异性,不与其他虫媒病病毒反应;检测灵敏度为100个TCID50。建立了快速检测EHDV的液相芯片技术,为进一步搭建EHDV快速高通量检测平台奠定了基础。 相似文献
109.
110.