Preparation of gfp-bcl-XL-contained recombinant adenovirus vector by the homologous recombination in bacteria

AIM: To prepare gfp-bcl-X_L-contained recombinant adenovirus(rAd-gfp-bcl-X_L).METHODS: Bcl-X_L gene was amplified from pEGFP-C₃-bcl-X_L, subcloned into shuttle plasmid and formed transfer plasmid of pAdTrack-CMV-bcl-X_L. Then pAdTrack-CMV-bcl-X_L was linealinzed with PmeI and co-transformed into BJ5183 bacteria with adenovirus genomic plasmid of pAdEasy-1. The identified recombinant adenovirus plasmid was digested with PacI and transfected into 293 cells to package recombinant adenovirus particles. The target gene was detected by PCR.RESULTS: There were about 35% positive recombinant bacterial clones after the co-transformation of pAdTrack-CMV-bcl-X_L and pAdEasy-1 into BJ5183. Recombinant adenovirus particle were produced and further amplified after the transfection of pAdEasy-1-gfp-bcl-X_L into 293 cells. PCR test indicated that the recombinant Ad contained bcl-X_L gene. The titer of the purified rAd-gfp-bcl-X_L was 6.5×10¹² PFU/L. CONCLUSIONS: The homologous recombination in bacteria is a convenient and high efficient method to prepare rAd-gfp-bcl-X_L. This affords a good gene transfer vector for the gene therapy in human’s diseases.     

江汉平原水稻白叶枯病菌致病型的变异研究

 从水稻和稻田周围常见的10种杂草上来集梨孢属菌株,以涂沫法作交互接种,分离自牛筋草、狗尾草、法氏狗尾草、李氏禾、罗氏草、铺地黍、稗和马唐的梨孢菌与分离自水稻的梨孢菌可以交叉侵染其寄主,茭白和碎米莎草梨孢菌与稻梨孢菌不能交互侵染;自然诱发条件下来自牛筋草和狗尾草的梨孢菌与来自水稻的梨孢菌对其寄主同样发生交叉侵染。直接从杂草寄主上分离的梨孢菌株对水稻的致病性较弱,接种到水稻感病品种发病后再分离的菌株,对水稻致病性增强,对原寄主的致病性基本保持不变。推断稻瘟病区稻田周围牛筋草、狗尾草、法氏狗尾草、李氏禾、罗氏草、铺地黍、稗和马唐等杂草寄主上的梨孢菌在稻瘟病菌的积累和传播方面具有作用。     

多花黑麦草品种比较试验

通过对现行生产中常用的4个多花黑麦草品种在昆明地区的物候期、株高、草产量、生长率、净同化率等指标的规定表明,在生长初期,特高的生产性能比其余3个品种都好,但生长一段时间后,邦德的生产性能明显超过特高(P<0.05),抗锈王略高于特高(P>0.05),旺饲的生产性能最差(P<0.05)。因此,邦德是一个在生产中值得推广应用的品种。     

猪附红细胞体病的诊断和防治

近年我县发生了一种类似猪瘟症状的疾病 ,表现为高热、嗜睡、全身发红等 ,导致猪群 (特别是仔猪 )大批死亡。经采用注射青霉素、链霉素、磺胺类药、退烧解毒药等治疗 ,效果不理想。特别是在使用磺胺类药物后 ,会加重病情。该病在我县呈蔓延趋势 ,给广大养殖户造成了很大的经济损失。后与省畜牧研究所联合研究 ,根据临床症状、病理剖检、实验室检查等 ,确诊为猪附红细胞体病。经对症下药 ,很快控制了该病的流行和蔓延 ,确保养殖业的健康稳定发展。1流行病学特点本病一年四季均可发生 ,但以夏秋多发。蚊等吸血节肢昆虫可传播该病 ,各种年龄、…     

Effects of changing PKC activity on proliferation and telomerase expression in human hepatocellular carcinoma cells

AIM: To investigate whether protein kinase C (PKC) is involved in the proliferation and the telomerase expression in human hepatocellular carcinoma cells. METHODS: Human hepatocellular carcinoma cells (BEL-7402) were treated with exogenous phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA, PKC activator) and staurosporine (SP, PKC inhibitor) for 48 hours. The techniques of cell culture and the telomeric repeat amplification protocol silver staining in combination with computer image scanning system in vitro were used to observe the variations of the growth and the telomerase expression. RESULTS: The proliferative potential of BEL-7402 cells was decreased by the action of PMA as well as SP, and the telomerase expression was also inhibited by PMA and SP. CONCLUSION: Our findings suggest that the proliferation of human hepatocellular carcinoma cells and the telomerase expression may be related to PKC.     

微卫星DNA在动物亲子鉴定中的应用及研究进展

本文概述了微卫星DNA进行亲子鉴定的基本原理与方法,将其用于亲子鉴定的优点以及研究进展,最后对未来的应用进行了展望。     

欧盟国家非洲猪瘟流行情况及对我国防控工作的启示

非洲猪瘟(ASF)1957年首次扩散到欧洲,2014年再次从高加索地区传入,并迅速在波罗的海周边国家蔓延,至2018年4月已扩散至欧盟8个成员国,且逐渐呈现地方性流行态势。本文重点介绍了欧洲国家的ASF扩散史,综述了病毒在欧盟国家扩散的主要途径,梳理了欧盟的ASF防控法规和措施,并对我国ASF防控提出了建议,以期为ASF防控提供帮助。     

三叶木通栽培条件下的生长结果习性

三叶木通[Akebia trifoliata(Thunb)Koidz]是木通科木通属的一种营养价值较高的半落叶藤本野生果树。果实是一种品质优良的野生鲜食水果,但其种子多,果肉少,可食率较低,需要经过驯化选育栽培加以利用。从2005年起搜集野生三叶木通进行人工驯化栽培,观察其生长结果习性。结果:在人工栽培条件下果实最大单果重313.5 g、最小97.7 g、平均单果重78.1~244.1 g,并初步掌握了其生长结果习性,为进一步生产栽培及育种打下了基础。     

食品添加剂磷酸氢二铵中砷含量的测定

运用原子荧光光谱法对进出口食品添加剂磷酸氢二铵中砷含量进行了测定,通过线性范围、检出限、精密度、回收率和实验室间比对测试,证明了原子荧光光谱法能快速、准确地检测出进出口食品添加剂中砷的含量。该方法线性关系良好,检出限低,准确度高,重复性和再现性好,可广泛用于进出口食品添加剂中砷含量的检测。     

opaR基因缺失对AHPND致病菌生物学特性及毒力质粒接合转移的影响

急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)严重影响了我国乃至全球对虾养殖业的发展。近期研究发现,致病菌毒力质粒携带trb型Ⅳ型分泌系统(type Ⅳ secretion system, T4SS)可在高菌体密度下介导毒力质粒发生接合转移,从而导致AHPND致病菌多样性。为探究群体感应与T4SS表达以及毒力质粒接合转移的关系,本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)群体感应系统的高密度调控子OpaR为研究对象,在致AHPND副溶血弧菌20130629002S01::cat(Vp2S01::cat)菌株基础上,利用同源重组技术构建opaR基因缺失株Vp2S01::catΔopaR。比较了出发菌株和缺失株在生长性能、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异,分析了opaR基因对T4SS基因表达量以及质粒接合转移效率的影响。结果显示,opaR基因缺失不影响细菌的生长特性和群集运动,但泳动能力显著增加,生物被膜形成能力显著下降;接合转移实验显示,opaR基因缺失显著提高T4SS表达水平和接合转移效率。本研究为解析群体感应系统调控AHPND致病菌T4SS表达以及毒力质粒接合转移机制提供了基础数据,可为控制AHPND致病菌毒力质粒传播提供技术支撑。