鉴别显色培养基在奶牛乳房炎病原菌快速鉴定中的应用

为研发用于奶牛乳房炎常见病原菌分离鉴定的鉴别显色培养基,并检验其与普通分离鉴定培养基辅以生化鉴定和16S rRNA核酸序列测定两种传统方法鉴定结果的一致性,笔者以生物信息学方法筛出各种属细菌的特异性酶、可作为唯一碳源发酵产酸的碳源,然后合成酶显色底物,连同碳源、酸碱指示剂制备显色培养基,将各种属标准菌株、野生型菌株涂布培养,评估菌落形态、菌落颜色及培养基基质颜色变化。采集隐性乳房炎(CMT法检测)及临床型乳房炎病例的牛奶样品(絮状物、凝块、清亮状或血乳)共计482份,用鉴别显色培养基和两种传统方法进行病原菌的分离、鉴定。鉴别显色培养基上菌落纯化后提取DNA用于16S rRNA序列扩增,产物送去测序(n=194)。以两种传统方法为参考,判定鉴别显色培养基鉴定病原菌的可靠性,用SAS 9.4的FREQ程序计算鉴别显色培养基的简单科恩κ系数。鉴别显色培养基上常见乳房炎病原菌不同种属的菌落形态和培养基基质颜色明显不同,肉眼即可辨别。鉴别显色培养基与两种传统方法鉴定结果的一致性参数分别为κ=0.70、κ=0.96。鉴别显色培养基能够作为常见奶牛乳房炎病原菌的标准鉴定方法。     

氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究

利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。     

O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达

首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP1基因的3个抗原袁位，与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段（VP1O）。然后，将VPIO基因连接到原核表达载体pET28a上，构建了重组表达质粒pET28a-VP1O，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达。SDS-PAGE电泳表明。VP1O基因在大肠杆菌中获得表达。Western blotting检测证实表达的VP1O蛋白具有良好的生物学活性。对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化，获得了较高纯度的VP1O蛋白。     

白头翁根不同提取物体外抑菌试验研究

白头翁为毛莨科多年生白头翁属植物白头翁Pulsatilla chinensis Bunge Regel 的根茎.始载于<神农本草经>,列为下品,是常用中药,具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效.传统主要用于治疗细菌性痢疾、阿米巴痢疾等.现代研究认为白头翁除了抗菌和抗病原作用外,还具有提高机体免疫力、抑制巨噬细胞分泌IL-6、抗癌、抗炎、抗毒、止泻、镇静、镇痛、杀灭滴虫和球虫、抑制肠运动、抗内毒素血症等作用[1].     

云南蒙自持续干旱对西方蜜蜂蜂王交尾成功率的影响

2010年4月21日～7月19日在蒙自县城周围和草坝镇的西方蜜蜂蜂场进行了西方蜜蜂交尾成功率试验。结果表明,蒙自县城周围蜂场的西方蜜蜂交尾成功率为75%,草坝镇蜂场的西方蜜蜂蜂王交尾成功率平均为19.98%。因此认为持续干旱对西方蜜蜂养殖影响很大。     

人工养殖虎纹蛙对野生虎纹蛙种群的潜在影响

野生虎纹蛙种群数量的减少使其不能满足人类的需求,催生了虎纹蛙的人工养殖。在开展人工养殖虎纹蛙的过程中已经出现腐皮病、胃肠炎、白内障、红腿病、烂鳃病等疾病;病蛙的处理缺乏科学性;养殖废水随意排放;销售许可制度管理不严;药物不正确使用等对野生虎纹蛙种群具有潜在的影响。建议科学规划,实施规模化养殖;加强人工养殖虎纹蛙的疾病预防;建立产品信息卡,实行身份跟踪制度;强化执法,打击非法贸易活动;大力加强宣传教育,提高资源保护意识,实现开展人工养殖虎纹蛙的经济效益和野生虎纹蛙资源保护的双赢。     

新型蚕具塑料框在单蛾育小蚕期的应用效果

通过新型蚕具塑料框在单蛾育小蚕期的试养表明,塑料框育具有制作成本低、节约投资70%,利用率高、可节约蚕室面积90%,省工省力,省资源,易消毒,易保温保湿,可保品种纯度等优点,可在原原母种、原原种繁育中应用。     

西藏东南部原始森林夏-秋季节鸡类的栖息地利用

本文报道了1995年夏-秋季节西藏东南部原始森林鸡类栖息地的利用方式.记录有7个物种,这些物种大多喜欢在阳坡环境,而回避相对潮湿的阴坡环境.在这一鸡类群落中,白马鸡(Crossoptilon crossoptilon)与藏马鸡(C.harmani)的杂交类型在数量上是最丰富的,其次是血雉(Ithaginis cruentus)和斑尾榛鸡(Bonasa sewerzowi).随后于2001年的调查表明,由于地处偏僻,这些鸡类依然没有遭受人类狩猎和栖息地干扰的影响.     

不同植物油对奶牛瘤胃液、血浆中脂肪酸及乳脂中共轭亚油酸组成的影响

为改善牛奶脂肪酸构成,提高乳脂中CLA含量,研究瘤胃液、血浆和乳脂中脂肪酸的代谢规律,探寻提高乳品质的合适途径,本试验以3头装有永久性瘤胃瘘管的经产荷斯坦奶牛为试验动物,采用3×3拉丁方设计,研究向日粮中添加不同植物油(即葵花油、亚麻油、菜籽油,3种日粮的粗脂肪含量基本相同)对奶牛瘤胃液、血浆中脂肪酸及乳脂中CLA的影响。结果表明:(1)日粮中添加3种不同植物油,葵花油组、亚麻油组乳脂中的CLA比例均显著高于菜籽油组(P<0.05),且以葵花油组最高;乳脂中PUFA的比例则是亚麻油组显著高于菜籽油组(P<0.05);(2)3组间血浆中C14∶0、C16∶0、C18∶0的比例差异不显著(P>0.05),菜籽油组C18∶1的比例显著高于亚麻油组和葵花油组(P<0.05),而后两组差异不显著(P>0.05),亚麻油组和葵花油组t11-C18∶1的比例与菜籽油组间差异均达到显著水平(P<0.05),亚麻油组和菜籽油组中C18∶2的比例差异显著(P<0.05);(3)采食添加不同植物油日粮后,瘤胃液中各种脂肪酸动态变化的平均值差异不显著(P>0.05)。总的趋势是随着时间的延长,饱和脂肪酸含量逐渐增加,而不饱和脂肪酸含量逐渐减少。瘤胃液中CLA的比例不同时间点均较低。由本研究可知,在优化奶牛乳脂肪酸构成提高CLA含量方面,以葵花油效果最好。     

家蚕母种继代蛾区选择方法对种性维持的影响

为了有效保持生产实用家蚕品种的优良性状,在家蚕母种继代繁育中采用5种选择方法选择继代蛾区,探讨种性维持效果。分析8年12代及F1代的成绩表明:所有性状以保持种性为主,采用选留平均数上下1个标准差范围内蛾区的稳定化选择和以茧丝质指标在平均数-0.5~1.0标准差范围内选择,并结合健康性指标选留高值的综合选择,有利于家蚕母种的种性维持。