猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究

为研制新型猪囊尾蚴疫苗,将猪带绦虫六钩蚴阶段编码 TSOL18 的基因定向克隆于真核表达质粒 pVAX1, 经筛选、鉴定及 DNA序列分析正确后,将重组质粒 pVAX1/TSOL18 转染 BHK-21 细胞,通过 SDS-PAGE、Western blotting、免疫荧光试验等方法检测细胞中表达的 TSOL18 抗原。结果表明,重组真核质粒 pVAX1/TSOL18 可在 BHK-21 细胞中表达TSOL18 目的蛋白,表达蛋白能被猪囊尾蚴病阳性血清所识别。动物免疫试验表明,真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫应答,这为猪囊尾蚴病基因疫苗的研究奠定了良好基础。     

氯丙嗪残留检测技术研究进展

食品安全问题日益成为社会关注的焦点,氯丙嗪作为兽药和饲料添加剂饲喂动物会造成大量残留,作者对现有的各种检测方法作一概述,以便研究者能在此基础上进一步改进和发展。     

河南省部分地区乳牛隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握乳牛隐孢子虫病在河南省的流行动态,从河南省郑州、开封、济源和鹤壁4个地区9个奶牛场采集12月龄以内的乳牛粪便样品582份,用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法进行检测。结果显示,隐孢子虫总感染率为26．12％（152／582）。其中,断乳前犊牛（5日龄至2月龄）隐孢子虫感染率为30．91％（51／165）,断乳后犊牛（3～12月龄）感染率为24．22％（101／417）。依据形态数值初步鉴定为2种隐孢子虫,即微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫。微小隐孢子虫在断乳前犊牛阳性样品中的比率为50．98％（26／51）,在断乳后乳牛阳性样品中的比率为9．90％（10／101）。另外,饲养方式（断乳前犊牛单独隔离饲养和未隔离饲养）对断乳前犊牛2种隐孢子虫的感染率有显著影响。     

烟碱对大鼠心电图的影响

烟碱对心率的作用具有阶段性,初期引起心率短暂性减弱,紧接着发生瞬时增加。为进一步确定烟碱对大鼠心脏的作用,对描记烟碱作用后大鼠心电图进行分析,发现烟碱能引起大鼠心电图显示较长的QT间期,增加了PR间期及T波面积,与肾上腺素或去甲肾上腺素引起的QT间期延长相似,且能被M受体阻断剂阿托品所阻断,说明烟碱能够诱导局部释放乙酰胆碱或者作用于部分副交感神经控制的毒蕈碱受体。     

原料价格波动与水产饲料企业的应对措施

本文主要介绍了大型水产饲料企业在原料价格剧烈波动条件下一些可以采取的应对措施．对水产饲料企业的管理、营销等有一定的借鉴意义。     

伪狂犬病毒GDSH株的分离鉴定及gE基因的序列分析

从广东四会某猪场分离到一株疑为猪伪狂犬病病毒(PRV)的病毒,病毒在猪肾细胞上出现细胞变圆、拉网、融合等典型病变,并具有细胞泛嗜性特点。在MDCK细胞上测得其TCID50值为10-8/0.1mL,能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和。将0.1mL病毒液接种小鼠后发生奇痒并麻痹致死,接种猪3天后发病,7天死亡,从攻毒病死猪的脑组织病理切片上观察到典型的病毒性脑膜脑炎及血管套现象。通过PCR扩增到PRVgD基因,由此进一步证明所分离病毒为猪伪狂犬病毒,并命名为GDSH株。根据GenBank中发表的序列,设计一对扩增PRVgE基因的特异性引物,建立可以区分PRV野毒株与疫苗株的PCR诊断方法。以此方法对病毒的细胞培养液进行检测,结果证实所分毒株为PRV野毒株,经克隆测序后与GenBank收录的其它PRVgE基因序列进行比较,发现所测毒株的核苷酸序列与其它PRV毒株的同源性介于98.3%～99.9%之间,其中与PRVEa株的亲缘关系最近为99.9%。     

不同生境下陌上菜的形态解剖学比较

本研究首次采用GMA切片等方法对不同生境下陌上菜的形态结构进行了深入的研究。结果显示,陌上菜种苗发育具有水生植物的特征:种子及种苗需浸水萌发及发育,具下胚轴毛,胚根发育迟缓。成株的营养器官兼具水生及陆生植物的结构特征:完全陆生的植株和湿生植株的气生部位具有较厚角质层,发达的机械组织及较发达的通气组织。完全水生的植株和湿生植株浸水部位的角质层和机械组织不发达,但通气组织非常发达。生殖器官:完全陆生和湿生的植株具有闭锁和开放2种类型的花,而完全水生的植株仅具闭锁花,从而保证了这一物种在不同生境下均能正常结实。此外,陌上菜具有特立中央胎座。本研究首次揭示了陌上菜在不同生境下种苗发育、营养器官及生殖器官结构的变化,完善了陌上菜的形态学,为进一步研究母草科的系统学提供了形态学依据。     

The Fluorescent Characterization and Analysis of Two Brucella Attenuated Vaccine Infecting Mouse Macrophagocyte

The experiment was conducted to discuss the difference of binding time of green fluorescent protein B.melitensis M5 (GFP-M5) and B.abortus S19 (GFP-S19) infecting the mouse macrophagocyte (RAW264.7),lysosome,endoplasmic reticulum and golgi body in the initial stage and compare the binding rate of GFP-M5,GFP-S19 with organelle in different timeline,respectively,by confocal laser scanning microscope (CLSM) and flow cytometry.The result showed that GFP-M5 and GFP-S19 were successfully constructed.The intracellular survival ability of Brucella M5,Brucella S19,GFP-M5 and GFP-S19 were not obvisouly affected after infecting RAW264.7.GFP-M5 and GFP-S19 could enter the macrophagocyte in 30 mins,and in 2 h the Brucella could reach lysosome,endoplasmic reticulum and golgi body.In addition,the binding time for two attenuated vaccine did not show differences in 1,2,3 and 4 h.The content of GFP⁺ cell produced by RAW264.7 infected by GFP-M5 and GFP-S19 did not show significant differences (P>0.05).Therefore,the two strains did not have significant differences in the invasion ability in the initial stage of infecting host cell.     

Advances on Detection Methods for Residues of Nitrofurans in Food

Nitrofurans are broad-spectrum antibiotics which have been widely used in food animals to the prevention and treatment of gastrointestinal infections.Due to abuse of drugs by criminals,animals could produce drug-resistant strains,which reduces the role of antibiotics.Meanwhile,excessive drugs residues in food has carcinogenic,teratogenic and mutagenic effects to the human body.In this paper,the damage and the detection methods of the residues of the nitrofurans in food are surveyed.The main detection methods include high performance liquid chromatography,liquid chromatography-mass spectrometry,liquid chromatography tandem mass spectrometry,enzyme-linked immunoassay,colloidal gold immunoassay and fluorescence immunity analysis method.The research status of various detection methods are summarized and the suggestions for further research are put forward.It is expected to provide reference for future research.     

救必应水提取物对产ESBLs细菌的抑菌机理研究

为了探讨救必应水提取物的抑菌作用及抑菌机理,采用2倍微量稀释法和琼脂平板稀释培养计数法,测定救必应水提取物对产ESBLs(extended spectrum β-lactamases)细菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),通过对细菌生长曲线、细菌超微结构、细胞壁和细胞膜通透性变化试验、核酸合成抑制试验研究救必应水提取物的抑菌机理。结果表明,与不添加提取物的对照组相比,救必应水提取物能够影响细菌的生长规律,使细菌破损严重,细胞壁和细胞膜通透性增加,细胞质外渗,菌液中AKP含量、可溶性蛋白含量增多、大肠杆菌DNA荧光强度明显减弱。研究表明,救必应水提取物的抑菌机理是通过细菌细胞壁和细胞膜通透性的变化,抑制细菌核酸的合成实现的。