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HAN Ya-ling ZHAO Xin YAN Cheng-hui KANG Jian ZHANG Xiao-lin DENG Jie XU Hong-mei LIU Hai-wei 《园艺学报》2008,24(8):1483-1489
AIM: In order to explore the regulatory mechanisms of the human cellular repressor of E1A-stimulated genes (hCREG1) in vascular smooth muscle cells (VSMCs)-HITASY and in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), we clone and construct hCREG1 promoter vector to detect its expression in different vascular cells. METHODS: With the results of biological information, the fragments including -3 677 bp, -2 310 bp and -945 bp upstream sequences of hCREG1 were amplified respectively using human genomic DNA template by PCR. The products were inserted into pMD18-T vector, and then were subcloned into pEGFP-1 report vector to obtain the pEGFP-hCREG1-promoter vectors. The pEGFP-hCREG1-P3677, pEGFP-hCREG1-P2310 and pEGFP-hCREG1-P945 vectors were transfected into HITASY cells and HUVECs transiently and the expression of green fluorescent protein (GFP) was detected respectively by Western blotting and fluorescent microscope. RESULTS: It was confirmed that all three PCR fragments inserted into vectors were corrected by sequencing analysis. However, the expression of GFP was different significantly in both types of vascular cells. The expression of GFP in HUVECs was higher than that in HITASY cells. Meanwhile, the expression of GFP in HITASY cells with 0.5% FBS was increased obviously compared to that in HITASY cells with 10% FBS. CONCLUSION: The reporter vectors of hCREG1 promoter are constructed successfully in which the core promoter region might be located in -945 bp-0 bp of 5′ upstream sequences. This study will provide an experimental basis for exploring the regulation of hCREG1 expression. 相似文献
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通过培育不同树形,并对郁闭的龙眼果园进行疏枝、间伐试验。结果表明,建立高光效树体结构,减少郁闲果园株数,能有效改善果园通风透光条件、提高产量和果实品质;林华果场试验因疏枝改造后树高降低,冠径扩大,单株产量比对照增加121kg,果实品质显著提高;密龙果场试验园间伐后,虽然总产量略有降低,但是667m2产值比对照增加687.8元。通过调查不同果园的龙眼产量和树体结构,得到龙眼产量与树体结构相关性回归方程为Y=-60.98+0.28X1+3.90x2+2.29X3。 相似文献
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3个玉米自交系对盐胁迫的生理响应及耐盐性评价 总被引:2,自引:0,他引:2
以自交系M-2导入系、Hr30导入系和Mo17导入系为试验材料,研究不同浓度NaCl(0、100 mmol·L~(-1)、150 mmol·L~(-1)、200 mmol·L~(-1)、250 mmol·L~(-1))对3个玉米幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、可溶性蛋白等生理指标的变化规律的影响,并采用主成份分析与隶属函数相结合的方法对其耐盐性进行综合评价,旨在为玉米耐盐性筛选及抗盐新品种的选育奠定基础。结果表明,3个自交系的株高、生物量、叶绿素含量、净光合速率(Pn)以及可溶性蛋白质的含量大体上随着盐浓度的增加而呈下降的趋势;根长、相对电导率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性和根冠比大体上呈先上升后下降的趋势。利用主成份分析归纳出株高、净光合速率(Pn)、丙二醛(MDA)等9个与耐盐密切相关的生理指标,运用模糊数学隶属函数分析得出,3个玉米自交系的耐盐性强弱依次为M-2导入系Hr30导入系Mo17导入系。 相似文献
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为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。 相似文献
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2010年3月、2011年12月分别从北京平谷、延庆疑似鸡传染性鼻炎的病鸡体内各分离到1株细菌,根据发病鸡群的临床症状、细菌分离培养、形态观察、过氧化氢酶试验、革兰氏染色结合动物回归试验、免疫攻毒试验和PCR等方法初步鉴定为副鸡禽杆菌(Apg);同时将分离菌株送匈牙利诗华研发中心进行分型鉴定,确定为B型副鸡禽杆菌,根据分离地点将分离菌株命名为B型副鸡禽杆菌(平谷株和延庆株).通过GenBank与已经发表的Apg基因序列进行同源性比对分析,结果显示,平谷株、延庆株基因序列同源性达到99.6%,而与参考株Modesto的基因核苷酸序列同源性达到98.3%、98.8%. 相似文献
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风险(risk)是由一种或多种危害因子而引发危害事件的一种可能性或概率。危害因子可能属于物理的、化学的、微生物的范畴,病原微生物中的细菌、病毒、寄生虫等都可成为引发危害事件的风险因子。评估某一因子是否对人或其他生物构成威胁以及所危害的程度显得至关重要。事实上,存在于环境中的危险因子及其多种可能的传播途径都会引发多种危害性事件。因此,要想充分了解并揭示由危害因子引发危害的概率,以及其随后对人类健康造成的危害并非易事。风险评估则是对不良结果或不期望事件发生几率进行描述及定量的系统过程,现已被视为一种用于揭示存在于环境中的各种危害及其对人类健康造成的影响的方法。论文主要对食源性寄生虫风险评估的方法进行全面阐述。 相似文献