浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备

鹅星状病毒(GAstV)是当前鹅养殖业的重要病原,易引起雏鹅内脏痛风症状和死亡,造成巨大经济损失。于浙江省内采集30份病料,进行核酸检测、病原分离和测序,并克隆其ORF2序列至pET-28a原核表达载体,转化BL21菌株后经诱导获得衣壳蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,临床死亡雏鹅剖检均发现典型内脏痛风症状,核酸检测鉴定为鹅星状病毒阳性,且出现不同基因型鹅星状病毒混合感染情况。共分离得到ZJC14和ZJLD20两个毒株,其中,ZJLD20在鹅胚和LMH细胞中均稳定增殖,但ZJC14并不能适应LMH细胞。病毒基因组测序显示,ZJC14与ZJLD20亲缘关系较远,ZJC14属于GAstV-Ⅰ基因型,而ZJLD20为GAstV-Ⅱ基因型。重组表达载体pET28a-ORF2诱导后获得纯化目的蛋白,经免疫成功制备兔源多克隆抗体,该抗体可与目的蛋白结合。此外,间接免疫荧光和Western-blot试验结果显示,ZJLD20衣壳蛋白制备的多克隆抗体可与病毒结合反应。研究成果有利于后续对该病原致病能力的研究,同时,试验制备的ORF2衣壳蛋白与多克隆抗体为鹅源星状病毒感染的诊断试剂开发奠定了基础。     

白灵菇木质素降解酶系的检测及其染料脱色能力的研究

[目的]明确白灵菇(Pleurotus ferulae)分泌木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Laccase)的规律,以及白灵菇染料脱色的能力。[方法]利用紫外可见分光光度计,检测4种培养方式下白灵菇木质素降解酶活性,并在此基础上进行了白灵菇对5种染料的脱色研究。[结果]4种培养方式下,可以检测到MnP和Laccase的活性,但并未检测到LiP。添加Mn2+和2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)对MnP和Laccase的产生有抑制作用,而添加青杨木屑可以将MnP的活性提高1.28倍,将Laccase的活性提高3.75倍;白灵菇对中性红和活性黑2种染料的最大脱色率分别为87.12%和86.13%,对活性红和刚果红的最大脱色率分别为45.91%和32.28%,而对结晶紫几乎无脱色能力。[结论]白灵菇产Laccace活性要高于MnP;与脱色活性红、刚果红、结晶紫相比,白灵菇对中性红和活性黑2种染料的脱色更为彻底。     

不同生态恢复措施下宁南典型草原小气候变化及其与土壤水分的关系

为了探讨不同生态恢复措施对宁南典型草原小气候的影响以及小气候与土壤水分的关系,通过野外测定,研究了水平沟、鱼鳞坑和封育3种恢复措施下地上20 cm气温、空气湿度、风速及地温的变化特征及其与地表水分的关系,发现地上20 cm处气温和0~20 cm土壤含水率为水平沟>鱼鳞坑>封育草地,风速则相反;地上20 cm处湿度、0~15 cm土壤温度为封育草地>水平沟>鱼鳞坑;土壤0~20 cm含水率与地上20 cm处的风速负相关,与空气相对湿度正相关。     

个人所得税改革如何体现效率和公平

经过十多年的运行,中国现行个人所得税在增加财政收入和调节社会财富差距上作出贡献后,其弊病也在不断突出。为了能让个人所得税在国民经济中近一步发挥其重要作用,个人所得税改革势在必行。本文就是围绕这个课题展开研究,通过吸收世界各国税制改革的理论与实践成果,对中国现行个人所得税进行分析,同时提出其改革方向和措施,促进中国个人所得税更加合理,更有效率,更加公平。     

Prokaryotic Expression and Bioinformatics Analysis of Nonstructure Protein 3C from Porcine Encephalomyocarditis Virus

To obtain the 3C protein of encephalomypcarditis virus (EMCV) and predict its structure,3C gene was amplified by RT-PCR with the RNA as template from HB10 strain. And the target gene inserted into pMD18-T vector. The plasmids were sequenced after verification by PCR and double enzyme digestion. The target gene was cleaved from the correct plasmid,and inserted into the pET32a vector. The recombinant pET32a-EMCV-3C was transformed into TranSetta (DE3) and then induced by IPTG. Then the size was identified by SDS-PAGE and the antigenicity was analyzed by Western blotting. According to the sequence results,the length of 3C gene was 615 bp,which encoded 205 amino acids. The results of SDS-PAGE showed that His-3C protein mainly existed in the form of inclusion body with the molecular of 40 ku. The Western blotting results verified that purified His-3C could react with rabbit anti-EMCV serum prepared with EMCV. Bioinformatics analysis indicated that 3C protein was non-secretory,and had multiple phosphorylation sites,but it had no transmembrane region. Thus,the 3C protein mainly involved in protein hydrolysis process.3C protease,as the only protease in the EMCV genome,played an indispensable role in viral replication. In this study,we successfully constructed the prokaryotic expression vector of 3C protein and predicted its structure,which provided a basis for further study of the role of 3C protein and catalytic mechanism.     

小麦茎顶端原基发育模拟模型的研究

本文系统地模拟了小麦植株茎顶端不同类型原基的发育过程，建立了叶原基分化、小穗原基分化和小花原基分化、退化、败育、受精结实及籽粒生长的子模型。模型引入每小穗分化的最大小花原基数、退化的最大小花原基数和籽粒潜在重量3个遗传参数，分别反映了不同小麦品种小花分化、退化和籽粒生长等方面的遗传差异。利用南京地区     

棉花黄萎病菌分子生物学研究新进展

本文以分子生物学研究手段为纲 ,从RFLP、RAPD、ITS等方面 ,综述了国内外在棉花黄萎病菌种内划分及致病力分化上的研究状况及最新进展     

甘蓝型油菜(Brassica napus L.)千粒重性状遗传体系分析

通过遗传差异较大的2个甘蓝型油菜（Brassica napus L.）纯系亲本组合（HSTC14×宁油7号）衍生后代的世代家系群体分析，应用主基因+多基因家系世代联合分离分析方法研究油菜千粒重的遗传体系。结果表明，甘蓝型油菜HSTC14×宁油7号组合千粒重遗传体系系由一对主基因+多基因构成，主基因中只有加性效应(d = 0.1062),不存在显     

棉花黄萎病抗性鉴定新方法——无底塑钵菌液浇根法

通过一系列的试验 ,笔者发展了一种快速鉴定棉花品种抗黄萎病性能的新方法—无底塑钵菌液浇根法 ,此法比传统的纸钵撕底醺根法更简便 ,发病较轻 ,能准确客观地反映品种的抗性     

杨树肿茎溃疡病化学防治试验

在室内药剂筛选的基础上,通过田间药剂品种、浓度、施药时期和次数的筛选,再经大面积生产防治试验证明;应用70％甲基托布津可湿性粉剂600倍、50％多菌灵可湿性粉剂600倍、10％双效灵100倍液,在插条苗于6月末至7月初、平茬苗于6月中至6月末期间喷药,每隔10—15天喷一次,共喷药四次,可以获得显著效果。平均防治效果为40.72％,平均减少损失为11.96％,平均增穗为63.22％。