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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
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巴林右旗草地资源生产力现状、存在问题及发展对策 总被引:2,自引:0,他引:2
本文就巴林右旗草地资源利用现状及存在的问题进行了较系统的分析,认为“三大矛盾”是本旗草地畜牧业可持续发展的主要限制因素,提出了化解矛盾的思路与对策。 相似文献
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在养鸡生产上,肉用种鸡高产高效益的成功经验报道很多,而低产低效益的种鸡生产尚未见报道。为此,我们对某小型鸡场一批狄高肉用种鸡生产效益不理想的情况进行了调查,现整理出来,作为反面经验,供同行参考。 1 生产情况该场于1990年9月21日从某省家禽所引进1日龄狄高父母代肉用种鸡600套。24周龄末,母鸡成活370只,成活率61.67%。27.5周 相似文献
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在综合治理松毛虫的系统工程中,营林技术措施是最根本最重要的环节。其中培育混交林对提高林分的生态防治功能,减少和控制松毛虫的发生蔓延有着显著的作用。笔者等1986—1990年在全州(含灵田)采用纯林和混交林对比方法,试验观察了松杂混交 相似文献