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绵羊前体脂肪细胞的原代培养及分化 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验旨在建立绵羊前体脂肪细胞的原代培养方法,探讨反刍动物脂肪沉积机理.以1日龄羔羊的肾周脂肪组织为试验材料,采用组织块法和酶消化法分离培养前体脂肪细胞,观察形态学变化,测定生长曲线,油红O染色检测细胞内脂肪含量,并用实时定量PCR法检测脂蛋白脂酶、过氧化物体增殖剂活化受体γ、脂肪酸合酶的表达量.结果表明:原代培养的细胞成分均一、增殖旺盛、分化率高,具有前体脂肪细胞的形态特征和基因表达特性,为绵羊前体脂肪细胞.本试验成功建立了绵羊前体脂肪细胞原代培养方法,并在体外重现了增殖和分化的过程. 相似文献
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【目的】本研究旨在对来源于白牦牛的牛病毒性腹泻病毒(BVDV) GSTZ株的E0基因进行分析,并利用E0基因对GSTZ进行基因分型。【方法】通过提取牛病毒性腹泻病毒(BVDV) RNA,使用RT-PCR技术扩增BVDV E0基因,将其插入到pET-28a中,构建pET-28a-E0原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆,鉴定及测序。IPTG诱导后使用BVDV阳性血清作一抗,经western blot鉴定。根据E0基因的序列进行同源性分析以及构建E0基因系统发育进化树。利用DNAstar预测E0蛋白的抗原表位。【结果】本研究表达的E0蛋白大小与预期结果相符且该蛋白具有良好的抗原性。通过对E0基因序列的同源性分析以及构建E0基因系统发育进化树,说明牛病毒性腹泻病毒GSTZ株基因型可能属于牛病毒性腹泻病毒-1a亚型,也可能是其他基因亚型发生较大突变产生变异。通过预测E0蛋白B细胞的抗原表位主要位于:7-12、22-26、62-63、94-97、101-105、115-119、127-128、138-140、185-187、215-219位氨基酸残基; T细胞潜在优势抗原区域主要位于:10-14、19-31、36-43、52-58、77-86、96-98、137-140、148-150、167-191、209-211位氨基酸残基。【结论】E0蛋白具有良好的抗原性,通过对抗原表位预测以及对GSTZ进行基因分型,为后续基因工程疫苗和BVDV检测试剂盒的开发提供了理论依据。 相似文献
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以枸杞鸡蛋为原料,生产卤味枸杞鸡蛋。以感官评分为指标,通过单因素试验和正交试验,确定卤味枸杞鸡蛋的最终配方为食盐添加量3.0%,酱油添加量4.5%,白砂糖添加量1.5%,花椒添加量0.1%,八角添加量0.08%,干姜添加量0.02%,茴香添加量0.04%,桂皮添加量0.03%,陈皮添加量0.02%,料酒添加量1.0%。用该配方生产出来的卤味"枸杞"鸡蛋呈棕黄色,卤香浓郁,咸淡适宜。 相似文献
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目的:探讨长春新碱对天祝白牦牛胚胎成纤维细胞生长的抑制作用,并用碱性磷酸酶指标判断天祝白牦牛胚胎成纤维细胞在长春新碱作用下去分化的可能性。方法:选取白牦牛胚胎成纤维细胞生长良好的24孔培养板,分别滴加浓度依次为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/mL长春新碱,每天在倒置相差显微镜下观察不同浓度的长春新碱对细胞形态的作用,并进行碱性磷酸酶染色检测。结果:适量浓度的长春新碱可以使细胞的形态发生变化(细胞变圆),而且在去除长春新碱后,细胞能正常生长。高浓度的长春新碱会使细胞死亡崩解。长春新碱并不能使白牦牛胚胎成纤维细胞中的碱性磷酸酶浓度增高。结论:长春新碱浓度为0.5μg/mL时,对白牦牛胚胎成纤维细胞的抑制作用最佳,但是它并不能使细胞中碱性磷酸酶的含量增高。 相似文献
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用LPS诱生小鼠腹腔巨噬细胞发生脂质过氧化,观察牦牛血清中分离纯化的转铁蛋白对其脂质过氧化的影响。结果表明:LPS终浓度为20μg/ml、培养时间12h时,LPS诱生小鼠腹腔巨噬细胞产生丙二醛的量显著增加,且满足实验需要。当添加不同浓度牦牛血清转铁蛋白后,丙二醛受到显著抑制,谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高且呈现剂量依赖性,但超氧化物歧化酶活性均无明显影响。提示,牦牛血清转铁蛋白具有更好的抑制脂质过氧化和提高谷胱甘肽过氧化物酶的作用。抑制脂质过氧化生成和提高谷胱甘肽过氧化物酶的作用,可能是转铁蛋白抑制细菌、抗病毒、保护与促进细胞生长等功能的作用机制之一。 相似文献
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