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1株非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体识别的B细胞抗原表位的鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
旨在研究非洲猪瘟病毒(ASFV) p30蛋白的B细胞抗原表位,本研究制备了p30蛋白的单克隆抗体(mAb),并以该单克隆抗体为工具进行B细胞抗原表位定位。首先,通过原核表达及Ni柱亲和纯化获得p30蛋白,将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠进行杂交瘤细胞制备,通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选出阳性杂交瘤细胞,并以细胞表达的方法制备单克隆抗体;采用间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)对单克隆抗体的特异性进行鉴定。利用IEDB表位预测软件对p30蛋白B细胞抗原表位进行预测,根据预测结果对CP204L基因进行截短表达,利用IFA、Western blot和iELISA对其抗原表位进行鉴定。最后,利用噬菌体十二肽库对制备的p30单克隆抗体进行4轮生物淘选,筛选多肽表位,并与上述基因截短表达筛选方法进行比对。特异性鉴定结果显示,该单克隆抗体能成功识别感染猪肺泡巨噬细胞的ASFV;基因截短表达筛选结果表明,其识别的抗原表位区域为84M~K142;噬菌体淘选试验结果表明,116TSSFETLFE124为本试验制备的单克隆抗体所识别的p30蛋白抗原表位核心序列,该结果进一步缩小了表位分布范围。本研究制备了p30蛋白的1株单克隆抗体,并对其抗原表位进行鉴定,为血清学诊断试剂的研发和p30蛋白功能研究奠定基础。 相似文献
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常见鱼病的诊断与防治 总被引:1,自引:0,他引:1
鱼类生活在水中,患病不易被发现,正确的鱼病诊断和防治方法对鱼类健康生长非常重要.鱼病诊断和防治方法得当可以使渔药用量少、效果好,若方法不当,不仅用量大,效果不好、无效,而且有可能造成鱼病更重、甚至死亡等.为更好地做好鱼病防治工作,笔者根据自己的生产实践,总结出了一些经验,现介绍如下. 相似文献
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半咸水虹鳟养殖自1996年在我县试养成功以来 ,养殖规模逐年扩大 ,现已发展成为一项新兴养殖产业。但是 ,鱼病引起的高死亡率给渔业生产造成了很大的损失。据统计 ,在半咸水条件下虹鳟的常见病有 :营养性疾病、体外寄生虫、水霉病和细菌性病 ,其中以营养性疾病最为常见和损失最大。以下是虹鳟的一些常见病及防治办法。一、大肚子病症状 :肚子膨胀很大 ,发展到一定程度死亡。解剖后可见大多数鱼鳔内充水 ,肾脏有结石 ,胃内有乳白色溶液 ,有时肠内有黄色粘液。防治 :(1)加大流水量 ,及时排污清池 ;(2)改变饲料配方 ,增加饲料品种如脾… 相似文献