PCR检测猪弓形虫病方法的建立

为了探索以p30基因的部分序列作为模板进行猪弓形虫病PCR检测的最佳条件,根据弓形虫p30基因序列设计引物进行PCR扩增,结果出现预期的扩增片段484bp,该PCR方法最低能检测到5个弓形虫速殖子的DNA,且与相关的2种寄生虫无交叉反应,具有高度的敏感性和特异性。     

河北省猪、奶牛弓形虫病的血清抗体检测

8月21日下午，卫生部、农业部联合发布《四川省猪链球菌病瘦情评估报告》。疫情病原及其传播途径已经查明，各项防控措施落实到位，医疗救治成效显著。经专家综合评估分析．四川省猪链球菌病疫情已经得到有效控制。     

基于ITS-1序列的5种兔球虫系统进化分析

利用核糖体DNA内转录间隔区1(ITS-1)序列对兔艾美耳球虫进行系统进化分析,并探讨生物学和形态学特征在兔球虫进化中的意义。单卵囊分离大型、黄、肠、中型及穿孔艾美耳球虫卵囊,接种无球虫兔获得纯种卵囊,CTAB法提取卵囊基因组DNA,PCR扩增ITS-1区后克隆、测序。将测序结果与GenBank发布的兔球虫ITS-1序列进行比对和遗传距离分析,绘制系统进化树。结果显示:大型、黄、肠、中型及穿孔艾美耳球虫河北株ITS-1序列分别长320、330、351、336和341bp。5种兔球虫河北株与GenBank中同种兔球虫ITS-1序列相似性分别为96.9%、97.3%、96.9%、99.1%和99.4%。兔球虫形成单系群,该单系群分为2个姐妹谱,与卵囊残体有无相对应,其它形态学和生物学特征与系统进化无相关性。研究结果表明外残体的有无可作为兔球虫进化分类的特征。     

钼镉联合胁迫对山羊组织和器官中微量元素含量的影响

36头波尔山羊随机分成4组,选用钼酸铵、氯化镉作为试验钼源、镉源。对照组口服相应剂量去离子水,试验组分为低镉低钼组(Cd 0.5mg/kg+Mo 15mg/kg)、低镉中钼组(Cd 0.5mg/kg+Mo 30mg/kg)、低镉高钼组(Cd0.5mg/kg+Mo 45mg/kg)。试验期为50d,并于第0、25、50天每组3头山羊采血并剖杀取组织样品,测定其钼、镉和铜的含量。结果显示:(1)随着试验攻毒时间的增加,心肌中的钼、镉含量与对照组相比显著升高(P0.05),且有随灌服钼的增加而升高的趋势。而铜的含量表现为部分显著下降(P0.05);(2)随着试验攻毒时间和灌服钼质量浓度的增加,肝脏、肾脏、肺脏中的钼、镉含量与对照组相比均显著升高(P0.05),而铜的含量也显著升高(P0.05);(3)随着试验攻毒时间和灌服钼浓度的增加,血清中的钼、镉含量与对照组相比均显著升高(P0.05),而铜的含量表现为部分显著升高(P0.05);(4)随着试验攻毒时间和灌服钼浓度的增加,脾脏中的钼含量与对照组相比均显著升高(P0.05),镉、铜含量部分显著上升(P0.05)。由此可见,羊长期摄入过量钼、镉可使组织器官中钼、镉蓄积量增加,同时限制了机体对铜的利用。     

绿脓杆菌ATCC27853外毒素PE40基因的扩增与测序

目的扩增绿脓杆菌ATCC27853外毒素基因PE40,并对PCR产物进行测序鉴定,为获得用于构建分子导向药物的毒素弹头基因PE40奠定基础。方法采用PCR技术,以绿脓杆菌ATCC27853基因组DNA为模板,扩增PE40基因并测序。用DNASTAR软件将测得的序列与GenBank中的国际标准产毒株PA103的PE40基因序列进行比较。结果扩增出目的基因片断,长度为1231bp。测序表明,ATCC27853与PA103核苷酸同源性为98%,产生了7个碱基的突变,突变碱基导致第364位的天冬酰胺变成丝氨酸,第506位的丝氨酸变成色氨酸,第515位的丝氨酸变成甘氨酸。但产生变化的3个氨基酸均不是文献报道中的重要活性位点。结论产生变化的3个氨基酸不会对PEA的酶活性及细胞毒性产生很大影响,绿脓杆菌ATCC27853的PE40基因可用作分子导向药物的弹头。     

绿脓杆菌ATCC27853外毒素PE40基因的扩增与测序

目的 扩增绿脓杆菌ATCC27853外毒素基因PE40，并对PCR产物进行测序鉴定，为获得用于构建分子导向药物的毒素弹头基因PE40奠定基础。方法 采用PCR技术，以绿脓杆菌ATCC27853基因组DNA为模板，扩增PE40基因并测序。用DNASTAR软件将测得的序列与GenBank中的国际标准产毒株PA103的PE40基因序列进行比较。结果 扩增出目的基因片断，长度为1231bp。测序表明，ATCC27853与PA103核苷酸同源性为98%，产生了7个碱基的突变，突变碱基导致第364位的天冬酰胺变成丝氨酸，第506位的丝氨酸变成色氨酸，第515位的丝氨酸变成甘氨酸。但产生变化的3个氨基酸均不是文献报道中的重要活性位点。结论 产生变化的3个氨基酸不会对PEA的酶活性及细胞毒性产生很大影响，绿脓杆菌ATCC27853的PE40基因可用作分子导向药物的弹头。     

张家口部分兔场球虫感染情况调查及形态学观察

试验采用球虫卵囊粪便检查法对张家口市规模较大的3个兔场共900多个粪样进行检查。结果表明,幼兔球虫平均感染率为93.3%、感染强度(每克粪便中的卵囊数,OPG)范围为100～333400;青年兔球虫平均感染率为77.7%、感染强度范围为66～22000,种兔球虫平均感染率为85.7%,感染强度范围为100～28200;共鉴定出10个虫种,分别为斯氏艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、无残艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、微小艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、盲肠艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫。为有效防治兔球虫病提供了试验依据。     

肠艾美耳球虫河北株18S rDNA部分序列测定及系统发育分析

从河北某兔场单卵囊分离肠艾美耳球虫并接种无球虫兔进行增殖,CTAB法提取肠艾美耳球虫卵囊基因组DNA.利用艾美耳属球虫18S rDNA保守引物,PCR扩增肠艾美耳球虫18S rDNA片段,产物纯化后测序.测得的序列用DNAstar软件分析并与GenBank公布的11种兔球虫(EF694007-EF694017)的相应序列进行同源性分析,并绘制系统进化树.结果表明,扩增出的18S rDNA片段大小为1 521 bp.序列分析显示,肠艾美耳球虫河北株18S rDNA与GenBank公布的11种兔球虫相应序列同源性为92.6%～99.9%,肠艾美耳球虫河北株与国外肠艾美耳球虫(EF694012)18S rDNA相似性达99.9%.系统发育进化树显示,肠艾美耳球虫河北株与肠艾美耳球虫(EF694012)亲缘关系最近.     

鸡柔嫩艾美耳球虫对托曲珠利的耐药性检测

为研究鸡柔嫩艾美耳球虫对不同剂量托曲珠利的耐药性,从张家口地区规模化养鸡场采集未使用过抗寄生虫药物鸡只的粪便并进行球虫卵囊分离和复壮。试验设5个感染用药组（Ⅰ组,25 mg/L剂量;Ⅱ组,50 mg/L剂量;Ⅲ组,75 mg/L剂量;Ⅳ组,100 mg/L剂量;Ⅴ组,125 mg/L剂量）和2个对照组（Ⅵ组,感染不用药组;Ⅶ组,不感染不用药组）,Ⅰ～Ⅴ组采用托曲珠利饮水给药方式,Ⅵ组和Ⅶ组的鸡正常饲喂日粮,Ⅰ～Ⅵ组进行球虫感染,检测耐药虫株。结果显示,25 mg/L剂量组和50 mg/L剂量组的托曲珠利产生耐药,75 mg/L剂量组、100 mg/L剂量组和125 mg/L剂量组的托曲珠利不耐药。结果表明,张家口地区鸡柔嫩艾美耳球虫耐托曲珠利的浓度为50 mg/L,为张家口地区鸡球虫病的防治提供了参考。     

中西药结合对猪弓形虫病的疗效研究

［目的］评价中西药结合治疗猪弓形虫病的疗效,以提高其治愈率、降低复发率。［方法］用复方磺胺类药结合自拟抗弓形虫中药方剂对人工感染弓形虫病的猪进行治疗,检测其腹水含虫量。将感染猪病料接种小白鼠,进行动物回归试验。观察中西药结合治疗猪的临床表现并检测其血清循环抗原（CAg）水平,与中药组、西药组和对照组进行比较。［结果］中西药结合对弓形虫滋养体有100%杀灭作用。回归试验结果表明仅有1只接种脑组织的小白鼠中发现少量弓形虫。治疗猪只均未出现明显临床症状,其血清CAg峰值低于对照组且转阴速度比中药组、西药组和对照组快。［结论］中西药结合治疗猪弓形虫病具有较好的疗效。