RUNX1对奶牛乳腺上皮细胞间质转化的调节作用

【目的】探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。【方法】通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-T细胞活力的影响;通过倒置显微镜观察经金黄色葡萄球菌处理后MAC-T细胞的形态变化。通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞后,细胞中EMT标志分子(E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin))、TGF/Smad通路信号分子(TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4)和RUNX1的表达量变化情况;并比较了分别使用RUNX1和TGF-β特异性抑制剂前后细胞EMT标志分子、TGF/Smad通路信号分子和RUNX1的表达水平变化。【结果】不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理72 h后,MAC-T细胞活力较24和48 h组均极显著下降(P<0.01),通过显微镜...     

复方中草药免疫增强剂对鸡堆型艾美耳球虫早熟株免疫的影响研究

选用两个中草药方剂,采用1.5%、2.0%两个添加水平,在相同方法、相同攻虫强度下,比较其抗鸡堆型艾美耳球虫的效果。结果表明:方剂一在2.0%的添加水平时效果显著,抗球虫指数高达196.04,其E-玫瑰花环形成率也显著提高,具有明显的免疫促进作用。     

3种兔球虫18S rDNA部分序列测定与系统发育分析

采用单卵囊分离法从河北某兔场分离大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫,接种无球虫兔后获得大量纯种卵囊,CTAB法提取孢子化卵囊基因组DNA。利用艾美耳属球虫18S rDNA保守引物,PCR扩增3种兔球虫18S rDNA片段,产物纯化后测序。将3种球虫18S rDNA测序结果与GenBank中发布的兔球虫18S rDNA序列用DNAStar软件进行比对。使用MEGA4.0软件对兔球虫18S rDNA进行同源性比较,并绘制遗传进化树。结果表明,大型艾美耳球虫扩增出大小为1 521bp的18S rDNA片段;黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫均扩增出大小为1 520bp的18S rDNA片段。序列比对结果显示,3种河北株兔球虫与GenBank中相应的3种兔球虫18S rD-NA(EF694016、EF694011、EF694012)相似性分别为99.6%、99.6%和100%。3种河北株兔球虫序列和GenBank中兔球虫18S rDNA序列(EF694007-EF694017)位于一个单系集群。     

钼对镉胁迫下山羊红细胞膜自由基代谢及脾脏组织病理学的影响

36只体质量约为20kg的山羊被随机分为4个组,每组9只,试验组灌服相同量的CdCl2和不同量的[（NH4）6Mo7·O24·4H2O],对照组灌服对应量去离子水。按每千克体质量计算,低钼组（0.5mg/kg（Cd）＋15mg/kg（Mo））、中钼组（0.5mg/kg（Cd）＋30mg/kg（Mo））、高钼组（0.5mg/kg（Cd）＋45mg/kg（Mo））,每组3个重复。于试验的第0、10、20、30、40、50天每组山羊采血,于试验的第0、25、50天每组山羊取脾脏和肝脏,测定相关指标。结果显示：（1）随着试验时间的延长,各试验组红细胞膜MDA含量呈上升趋势,GSH-Px、GST、SOD活性呈下降趋势;在第50天时,与对照组相比,各试验组红细胞膜MDA含量上升（P〈0.01）,GSH-Px、GST、SOD活性降低（P〈0.01）;（2）与对照组相比,高钼组脾脏的脾小体体积减小,可见散在的含铁血黄素沉积;（3）随着试验时间的延长,各试验组肝脏Bax基因表达量呈上升趋势;在第50天时,与对照组相比,低钼组和高钼组Bax表达量上升（P〈0.05）。结果表明,钼可导致镉胁迫下山羊红细胞膜自由基代谢紊乱,并能损害脾脏的免疫功能并且上调肝Bax基因的表达量,钼和镉体现为协同作用。     

奶牛乳房炎性无乳链球菌药敏试验及毒力基因检测

旨在调查山东某奶牛养殖场无乳链球菌的感染状况、药敏性及毒力基因携带情况.采集该牛场临床型乳房炎奶样200份,分别用5％绵羊血琼脂平板、MHA药敏琼脂培养基、16S rRNA基因引物、12种药敏片和多重PCR进行无乳链球菌的药敏性及毒力基因的检测.从中分离出42株无乳链球菌,分离率为21％.所分离出的无乳链球菌培养菌落特...     

大型艾美耳球虫早熟株的选育及18S rDNA系统发育分析

通过对6株田间大型艾美耳球虫早熟选育,经20次传代,潜在期由156h缩短至132h,连续5次无选择压力传代,其潜在期不变,说明所获得的大型艾美耳球虫早熟株遗传性状稳定;早熟株与原始株卵囊的结构有差异(早熟株每个孢子囊含有1个大折光体而原始株每个孢子囊含有2个小折光体),大小差异不显著;同时对早熟株进行了系统发育分析,进化树显示:大型艾美耳球虫早熟株、原始株及GenBank中兔大型艾美耳球虫18SrDNA序列均聚为一个分支。     

槲皮素对小鼠肝肾慢性镉中毒的保护作用

为了探究槲皮素对慢性镉中毒小鼠肝、肾是否具有保护作用,本试验选用40只2月龄的雄性健康昆明小鼠随机分为4个组,对照组隔天腹腔注射生理盐水,槲皮素组隔天灌胃槲皮素[50 mg/(kg·bw)],镉中毒组隔天腹腔注射氯化镉[1 mg/(kg·bw)],槲皮素干预镉中毒组隔天灌胃槲皮素并腹腔注射氯化镉,持续1个月后,将小鼠处死,采集小鼠血液,生物化学法检测肝肾功能生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和尿素氮(BUN)水平,并采集肝、肾组织进行宏观和微观病理学观察。结果显示：与对照组相比,镉中毒组小鼠ALT、AST活力和BUN含量均升高,但差异均不显著(P>0.05);与镉中毒组相比,槲皮素组和槲皮素干预镉中毒组小鼠ALT、AST活力和BUN含量均降低,但差异均不显著(P>0.05)。与对照相比,槲皮素组肝、肾组织的颜色和形态结构无明显变化,镉中毒组肝、肾组织外观肿大,颜色暗红,质地易碎,病理切片可见细胞排列杂乱且不规则,部分细胞核溶解,细胞质空泡化;与镉中毒组相比,槲皮素干预镉中毒组肝、肾组织外观无明显异常变化,病理切片可见肝、肾细胞结构、边界和排列...     

3种兔球虫ITS-1序列测定与系统发育分析

从河北省兔场分别单卵囊分离孢子化大型艾美耳球虫卵囊、黄艾美耳球虫卵囊及肠艾美耳球虫卵囊,接种无球虫兔后获得纯种卵囊,CTAB法提取孢子化卵囊基因组DNA。利用艾美耳属球虫18SrDNA和5．8SrDNA保守引物,PCR扩增3种兔球虫ITS-1片段,产物纯化后测序。将3种球虫ITS-1测序结果与GenBank发布的兔球虫ITS-1序列进行比对和遗传距离比较,绘制系统发育树。结果表明,大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫河北株分别扩增出424、455、434bp的ITS-1片段。大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾关耳球虫河北株与GenBank中发布的同种兔球虫ITS-1序列相似性分别为97．4％、97．9％和96．9％。系统发育树显示兔球虫ITS-1序列形成1个单系群,该单系群根据寄生部位分为2个姊妹群。     

配施木霉微生物肥对连作黄瓜的影响

研究减量化肥与哈茨木霉SQR-T037微生物肥配施对盆栽黄瓜产量、品质及土壤有效养分和可培养微生物数量的影响。试验以当地农民惯用化肥施用量的100%作为对照处理(CF),75%的农民惯用化肥量配施普通有机肥(OF)或木霉SQR-T037微生物肥(BF)作处理进行连续盆栽试验。结果表明,75%的农民惯用化肥量配施木霉微生物肥BF与100%的化肥处理CF产量相等且后期有所增产,相对配施普通有机肥处理OF则产量显著提高,同时黄瓜果实中硝酸盐含量降低45%以上,维生素C含量明显增加。此外,BF处理能有效改善土壤养分供应状况,有效磷和速效钾含量明显高于对照CF和OF处理,并显著提高黄瓜根际土壤细菌、有益菌种木霉的数量,维持放线菌数量稳定,且在施用第三季后显著减少真菌数量。因此,减少25%的化肥并配施一定量的木霉微生物肥(50g株~(-1)),不仅能保证黄瓜稳产,还能显著改善黄瓜果实品质,促进土壤中养分的高效利用,节约施肥成本,促进农业可持续发展。     

钼对镉胁迫下山羊肝线粒体自由基代谢及肝Cyt-c基因mRNA表达的影响

选用27头健康波尔山羊随机分成3组,每组9头,选用钼酸铵[（NH4）6Mo7O24·4H2O]、氯化镉（CdCl2）作为试验钼源、镉源。对照组（试验Ⅰ组）口服相应剂量去离子水,试验Ⅱ、Ⅲ组灌服1mg Cd·kg^-1·BW,同时分别灌服15、45mg Mo·kg^-1·BW。试验50d,于0、25、50d每组剖杀3头山羊取肝组织样进行相关试验,观察钼镉对山羊肝线粒体自由基代谢及Cyt-c基因表达的影响。结果显示,与对照组比较,试验Ⅱ、Ⅲ组T-AOC、SOD活性下降（P〈0.05）,MDA、NO、NOS活性或含量及Cyt-c基因mRNA表达量上升（P〈0.05）,且随着试验时间的延长,T-AOC、SOD呈下降趋势（P〈0.05）;MDA、NO、NOS活性或含量及Cyt-c基因mRNA表达量呈上升趋势,试验钼镉组比较：当镉剂量一定时,试验钼镉组随着灌服钼剂量的升高,T-AOC活性呈下降趋势,MDA、NO、NOS活性或含量及Cyt-c基因mRNA表达量呈上升趋势。结果表明,钼可导致镉胁迫下山羊肝线粒体自由代谢紊乱,造成线粒体损伤同时诱导细胞凋亡相关基因Cyt-c表达上升,钼与镉呈协同效应。