秦川牛Gli2基因重组干扰腺病毒的构建

【目的】构建秦川牛醇溶蛋白2(Gli2)基因的重组干扰腺病毒,为研究Hh信号通路在秦川牛脂肪形成过程中的功能奠定基础。【方法】构建3条短发卡RNA(shRNA):shRNA-LY1、shRNA-LY2、shRNA-LY3,利用双荧光素酶报告系统检测其干扰效率。再用干扰效率较高的shRNA-LY3构建腺病毒干扰载体pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-LY3,转染HEK 293A细胞进行腺病毒的包装并扩繁以提高病毒滴度。利用LaSRT法测定腺病毒的滴度,并将得到的病毒以不同剂量侵染秦川牛脂肪细胞,确定其最佳感染复数(MOI)。【结果】筛选得到shRNA-LY3干扰效率最高,达到85%;成功构建了秦川牛Gli2基因腺病毒干扰载体pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-LY3,包装后获得了重组干扰腺病毒Ad-shRNA-LY3;LaSRT法测得其滴度为1×10~9 PFU/mL。腺病毒对秦川牛脂肪细胞的最佳MOI为50。【结论】成功构建了秦川牛Gli2基因腺病毒干扰载体,包装后获得了高滴度的重组干扰腺病毒Ad-shRNA-LY3,其对秦川牛脂肪细胞的最佳MOI为50。     

动物免疫反应防治技术探讨

动物免疫是防控动物疫病的一项重要措施。国家对动物疫病实行"预防为主,防重于治"的方针。做好动物疫病的免疫工作,是发展畜牧业最关键、     

基于Web of Science和CNKI数据库的奶牛乳房炎研究文献计量分析

为了解奶牛乳房炎的研究进展,笔者分别以Web of Science核心合集数据库和中国期刊全文数据库(CNKI)为数据来源,对1992—2021年奶牛乳房炎研究外文文献发表量、发表国家、发表机构、作者、期刊、热门学科、关键词,以及中文文献发表量、发表机构、作者、期刊、关键词和基金项目进行计量分析。结果表明：奶牛乳房炎研究从1999年开始有外文文献记录,发表量整体呈上升趋势;美国的文献发表量一直领先,中国、德国、巴西和加拿大的文献发表量也较多。在外文文献发表量排名前20位的全球机构中,多数机构来自于欧美国家,康奈尔大学、圭尔夫大学和法国国家农业食品与环境研究院分别位居世界第1,2,3位;中国农业科学院位居世界第14位;外文文献发表量排名前3位的国内机构依次是中国农业科学院、中国农业大学和西北农林科技大学。外文文献发表量排名前10位的作者大多来自于欧美国家的高校,H.W. Barkema、Y.H. Schukken和S.De Vliegher在该领域具有较高的国际影响力;排名前10位的中国作者大多来自中国农业大学和山东省农业科学院,Han B.、Zhang Y.、Gao J.为排名前3位的...     

中国石榴产销情况

本文介绍了国内外石榴的种植情况,分析了我国石榴的产销情况及存在的问题,在此基础上提出了石榴产业发展的建议和策略。