猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5蛋白ORF5基因的克隆与序列分析

为揭示广东地区猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)可能的流行规律,本研究采用RT-PCR的方法扩增5株来自广东地区猪场临床样品的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)分离株的GP5蛋白ORF5基因,将其克隆、测序后与国内外部分毒株相应基因进行核苷酸序列比较。结果表明,PRRSV-2011-GD2、PRRSV-2011-GD3、PRRSV-2013-GD1、PRRSV-2013-GD2和PRRSV-2013-GD3株与美洲型参考株(VR-2332) 的核苷酸序列同源性分别为88.8%、99.5%、88.7%、88.7%和83.5%。系统进化树分析结果表明,PRRSV-2011-GD2、PRRSV-2011-GD3、PRRSV-2013-GD1、PRRSV-2013-GD2和PRRSV-2013-GD3株均属于美洲型。以上结果为更好地了解PRRSV的分子流行病学特征和抗原变异规律提供依据, 同时为研制基因工程疫苗奠定了基础。     

不同施氮量对设施黄瓜生长及产量的影响

通过田间试验研究了不同施氮量对二代日光节能温室黄瓜生长、产量及其经济效益的影响。结果表明:供试土壤速效氮、磷相对贫乏,氮素是决定黄瓜生长发育的决定性指标,对黄瓜的株高、叶绿素含量、茎粗及产量都有显著影响;黄瓜产量81%依赖于氮素施用水平;黄瓜对氮肥投入的反映表现为典型的抛物线式;温室黄瓜最高产量施氮量为720 kg/hm2,最大经济效益施氮量为695 kg/hm2。     

快速检测试纸法检测“瘦肉精”应注意的事项

<正>任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做"瘦肉精"。在国际国内通常所说的"瘦肉精"是一类叫做乙类促效剂(β-agonist)的药物,比如盐酸克伦特罗(clenbuterol)、沙丁胺醇(Salbutamol)、莱克多巴胺(ractopamine)和特布他林(Terbutaline)等,动物食品中含有此类物质对人体健康会造成危害,给动物食品安全造成严重隐     

浅析规模饲养场动物防疫条件审核监管问题

动物防疫条件审查办法规定,动物饲养场(养殖小区)、动物隔离场所、动物屠宰加工场所以及动物和动物产品无害化处理场所(简称四类场所),应当符合动物防疫条件,并取得《动物防疫合格证》接受动物卫生监督机构检查。随着我国规模化养殖生产持续发展,规模饲养场的数量不断增加,出现动物防疫条件参差不齐,存在问题比较突出的现象。规模饲养场的监管已经     

水疱性口炎病毒RT-LAMP快速检测方法的研究

根据逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)原理,针对水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G基因序列中的6个区域设计内外各1对特异引物,建立扩增VSV糖蛋白(G)基因的RT-LAMP方法。扩增产物电泳呈特异的阶梯状条带分布,扩增产物加SYBR GREEN I染色呈特征性的黄绿色,肉眼可直接观察判定。同时,还建立了可以进行定量检测的实时RT-LAMP方法。特异性试验显示,本方法可快速检验鉴别VSV与口蹄疫病毒(FMDV)和猪水泡病病毒(SVDV)。敏感性试验显示,建立的实时RT-LAMP方法检测VSVRNA的最低检测量为0.01 PFU,比实时荧光RT-PCR显著提高。建立的LAMP方法可检测p-VSVNJ质粒DNA的最低量为6.36×10-3pg/μL(1.4×103copies/μL),比PCR也显著提高。综合表明,本研究建立RT-LAMP检测VSV的方法具有特异、敏感、快速、简便的特点,具有开发应用前景。     

检测猪乙型脑炎抗体胶体金免疫层析法的建立与初步应用

利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化vero细胞培养SA14-14-2株猪乙脑病毒灭活抗原,进行胶体金点样和配比优化,制备GICA试纸条.结果最优浓缩样品配比构成是PBS 1.32 mL、灭活病毒液24 mL、30％蔗糖2.6 mL、55％蔗糖6.6 mL;用于胶体金偶联的抗原浓度约2.80 mg/mL.试纸条能明显区别阴阳性血清,阳性血清稀释1∶256能显示条带,优化后灵敏度达到1∶1024.与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、Ⅱ型圆环病毒病阳性血清不发生交叉反应.用于检测2群免疫母猪抗体阳性率分别为86％和100％,说明疫苗免疫效果较好;检测未经免疫肉猪出现阳性结果,分别达到38％和24％,说明存在病毒隐形感染.     

辣椒种植技术及病害防治探讨

作为人们餐桌上不可或缺的美食,辣椒这种农作物,其种植方式、种植技术及病虫害防治的深入研究工作备受关注。本文分析阐述辣椒种植技术及病虫害防治技术,以期促进农业市场繁盛,确保辣椒种植户的经济效益,也为百姓提供优质辣椒。     

用改良的RT-PCR技术快速检测传染性法氏囊病病毒

本研究将最新的病毒核酸纯化技术和单管ＲＴ－ＰＣＲ技术相结合,应用于ＩＢＤＶ的诊断研究,对４０余个病毒样品进行扩增反应,均取得令人满意的效果。该技术灵敏快速,从核酸纯化到电脉检测ＰＣＲ产物只需５～６ｈ,反应灵敏度比传统方法至少提高１００倍。所设计的引物对毒株的适用范围较广,对１２个ＩＢＤＶ毒株和１２个病变法氏囊样品均得到分子量一致并与设计相符的扩增产物     

大承气汤治疗家兔毛球病

家兔的毛球病在临床上较为常见,特别是在春秋换毛之际多发,以不食、喜饮水、粪球干燥、粪中带毛等为特征,严重者可造成胃肠阻塞而死亡.多年来,我们采用大承气汤治疗家兔的毛球病,疗效较好,报告如下.     

猪生殖和呼吸综合征病毒中国分离株B13株ORF5基因在杆状病毒系统中的表达

本研究将PRRSV B13株ORF5基因克隆到杆状病毒转移载体质粒pVL1393中,构建了重组转移载体质粒pVL1393-ORF5.用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV-SVI-G)基因组DNA(BaculoGold Linearized Baculovirus DNA)共转染草地夜蛾(Spodoptera frugiperda,sf9)细胞,得到重组病毒AcMNPV-OCC-- ORF5 .在感染了重组病毒的sf9细胞中成功地检测到分子量为25kD的ORF5基因表达产物,其能被猪抗PRRSV B13株多克隆血清特异识别.表明sf9细胞表达了所期望的产物,进而也说明基因片段的正确性.猪抗PRRSV VR-2332株多克隆血清对ORF5基因的表达产物无反应,而猪抗LV株多克隆血清则能特异识别,说明PRRSV中国分离株B13株在抗原性上更接近欧洲亚群分离株LV株的抗原性,进一步证实了PRRSV中国分离株B13株属于欧洲亚群.ORF5基因表达产物与天然蛋白分子量十分接近,说明杆状病毒表达系统能较适当的进行合成蛋白的加工和修饰.本研究的结果为PRRS基因工程疫苗的研究奠定了基础.