采用IMS-RT-PCR方法快速检测肉制品中大肠杆菌O157

建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)与实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-PCR)技术相结合快速检测肉制品中肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157的方法。利用改良热酚-水法提取EHEC O157的O-特异性多糖(O-specific polysaccharides,O-SP)作为筛选抗原,制备抗EHEC O157 O-SP单克隆抗体。将PM 3-50纳米磁珠经3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化后,与抗EHEC O157 O-SP单克隆抗体结合,得到偶联量为150μg/mg的免疫磁珠。免疫磁珠的最高捕获量为13748.33 CFU/0.2 mg,在肉制品中特异性捕获的最低检测限为2.2 CFU/m L。根据EHEC 0157血清型的特异性基因rfb E(Gen Bank登录号:S83460)设计引物和荧光探针,将IMS与RT-PCR相结合进行检测EHEC O157。当肉制品中EHEC O157含量≥1 CFU/g(2.5 g样本),免疫磁珠能捕获,并通过EC肉汤培养基增殖3h后,RT-PCR即可成功检测,全程只需6-7 h。IMS-RT-PCR相结合的检测方法,在大大缩短了检测时间的基础上,再次降低了EHEC O157的检测限,在防范肉制品源性致病性EHEC O157传染方面具有重要意义。     

微生态制剂在猪病中的应用

１９０７年，俄国的细菌学家梅尼奇柯夫发现在牛奶中加入乳酸菌制剂制成的酸牛奶对人体有益，能帮助消化，治疗腹泻。经过半个多世纪至今，这一发现引起众多科学家对有益微生物研究的兴趣。１９７７年，联邦德国VokerRusch博士首先提出“微生态学”这一术语，并在德国建立第一个微生态学研究所，微生态学以生态学中独立学科迅速发展起来，并越来越显出它的重要性。近年来，我国对微生态学基础理论和应用研究也取得了较大的社会、经济效益。动物微生态制剂是指利用动物体内正常微生物成员及其代谢产物或生长促进物质经特殊的加工工艺而制成…     

武汉理工大学图书馆图书利用统计及分析

以武汉理工大学图书馆2007年馆藏图书借阅数据为实例,利用SPSS的聚类技术进行数据预处理,然后作聚类分析,探讨了读者借阅图书的主要倾向,并分析了该校图书馆读者群的分类情况。有利于优化图书馆馆藏、提高资源配置利用率及服务质量。     

短期昼间亚高温胁迫对番茄光合作用的影响

为探讨番茄在日光温室的春末夏初的亚高温情况下,是否会对光合作用造成影响。采用模拟气候室,来观察不同情况下的温度对番茄光合作用会有怎样的影响。     

复合抗菌肽对山羊瘤胃发酵和酶活性的影响

本试验旨在探讨复合抗菌肽对饲喂不同精料饲粮山羊瘤胃发酵和酶活性的影响。选取18只4月龄雄性山羊,随机分3组,每组6只。对照组(Ⅰ组)、高精料组(Ⅱ组)、高精料抗菌肽组(Ⅲ组)分别饲喂300、600和600 g/(只·d)精料,同时Ⅲ组在精料中添加3.0 g/(只·d)复合抗菌肽。试验期为60 d。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组瘤胃液乙酸、总挥发性脂肪酸(T-VFA)、甲烷(CH4)、氨态氮(NH3-N)、尿素氮、微生物蛋白(MCP)浓度与(乙酸+丁酸)/丙酸及木聚糖酶、脂肪酶活性极显著或显著增加(P0.01或P0.05),羧甲基纤维素酶(CMCase)、β-葡萄糖苷酶和淀粉酶活性极显著或显著降低(P0.01或P0.05),丙酸、丁酸浓度及果胶酶、中性蛋白酶活性无显著变化(P0.05)。2)与Ⅱ组相比,Ⅲ组瘤胃液丙酸、丁酸、NH3-N浓度及CMCase、果胶酶、中性蛋白酶及脂肪酶活性无显著变化(P0.05),乙酸、T-VFA、CH4、尿素氮浓度与(乙酸+丁酸)/丙酸及木聚糖酶活性极显著或显著降低(P0.01或P0.05),MCP浓度及β-葡萄糖苷酶、淀粉酶活性极显著或显著增加(P0.01或P0.05)。由此说明,复合抗菌肽可调节山羊瘤胃发酵模式,提高饲料利用率,是理想的饲料添加剂。     

构建畜禽养殖业环境管理体系的思路

从畜禽养殖禁养区、限养区、适养区的"三区"建设,环境影响评价和排污许可证制度,清洁生产,环境技术规范,规划管理和环境监管等方面探讨了畜禽养殖业环境管理体系构建,提出了相应的对策建议。     

现代农业庄园规划设计的实践探索——以云南省明德花椒庄园为例

现代农业庄园是符合我国农业生产、农村经济及新农村建设多元化发展需求的新产物,是未来农业发展的重要形式。本文通过对云南省明德花椒庄园规划的实例研究,总结规划中应遵循的原则和设计理念,尝试能够指导现代农业庄园的规划设计,为现代农业庄园的开发建设奠定基础。     

五味子提取物的抑菌活性研究

以水和95％乙醇提取五味子的有效活性成分,用滤纸片法和平板二倍稀释法检测这2种提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、酵母等6种菌的抑菌活性.结果表明:五味子的水和乙醇提取物对其中5种供试细菌都有明显的抑制作用,对真菌酵母抑制作用不明显;对5种供试细菌的最小抑菌浓度均不高于10 mg/mL,抑菌的pH值范围广且热稳定性强.     

新疆石榴表型性状分析及分子身份证构建

为快速鉴别石榴种质资源,解决石榴“同名异物”、“同物异名”现象,促进新疆石榴产业的发展,本研究在采集新疆石榴主产区24份种质的基础上,分析新疆石榴种质叶片及果实表型性状的变异特征,选择多态性较好的18条引物对石榴种质进行遗传多样性分析及亲缘关系鉴定,并从中选出可将24份石榴种质鉴别出来的核心引物构建新疆石榴的分子身份证。结果表明：新疆石榴的果实、叶片形状变异较大,遗传多样性较为丰富,但仅从表型性状很难将石榴种质进行精准鉴别。18条引物共扩增出240条条带,其中多态性条带199条,占比为82.92%。24份种质的平均等位基因数为1.812 5,有效等位基因数为1.287 0,Nei’s基因多样性指数为0.177 0,Shannon’s多样性指数为0.282 0;和田地区石榴种质的Nei’s基因多样性指数及Shannon’s多样性指数高于喀什地区石榴种质。在遗传相似系数为0.85时,24份石榴种质被分为6大类群,且石榴的分类结果与果实风味和地理位置的关联性不大。5条核心引物UBC73、UBC880、UBC810、UBC841、UBC35可实现24份石榴种质的鉴别,以其扩增的电泳图谱所构建的新疆石榴的分子身份证也互不相同,表明24份种质不存在“同名异物”、“同物异名”现象。本研究结果为石榴种质鉴定提供了一种新方法。     

基于MiSeq分析川中黑山羊瘤胃细菌的多样性及群落结构

采用MiSeq高通量测序技术分析川中黑山羊瘤胃细菌的多样性及菌群结构。选用3只140日龄健康公羊,其平均体质量为(15.53±0.21)kg,饲喂10 d后,于150日龄时采集瘤胃液(样品A),40 d后再次采集瘤胃液(样品F),提取瘤胃液细菌基因组DNA,对细菌16S rDNA序列V4区进行MiSeq测序。结果显示:1)从样品A与样品F中共获得高质量序列338 830条,聚类后得3 400个运算分类单位(OTU);2)样品A的α多样性指数高于样品F的,但其差异无统计学意义;3)门水平上,样品A最高相对丰度为拟杆菌门的(占总序列数的40.87%),其次为厚壁菌门的(27.19%),样品F最高相对丰度为拟杆菌门的(47.12%),其次为变形菌门的(19.99%),再次为厚壁菌门的(18.05%),样品A厚壁菌门的相对丰度极显著高于样品F的(P0.01);4)在属水平上,样品A与样品F的最高相对丰度均为普雷沃氏菌属的(样品A的为25.54%,样品F的为27.67%),样品A中月形单胞菌属、丁酸弧菌属、瘤胃球菌属、琥珀酸弧菌属、琥珀酸菌属等的相对丰度显著高于样品F的(P0.05)。试验结果表明,川中黑山羊瘤胃中相对丰度最高的菌门为拟杆菌门,相对丰度最高的菌属为普雷沃氏菌属,且两瘤胃样品中部分细菌相对丰度间的差异显著。