藜草花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与RT-PCR检测

 The nucleotide sequence of coat protein (cp)gene of Sowbane mosaic virus (SoMV)was determined. The cp gene of SoMV consists of 726 nucleotides and encodes a putative protein of 241 amino acid re-sidues. Sequence comparison showed that SoMV was most closely related to Rubus chlorotic mottle virus compared to other sobemoviruses. A primer pair was designed for the detection of SoMV based upon the determined cp nucleotide sequence. An expected fragment with 510 bp could be obtained from SoMV, while no specific band was observed from the healthy control. The result showed that the RT-PCR assay with the primer pair was suitable for the specific detection of SoMV.     

蚕豆染色病毒CPS基因的序列测定及RT-PCR检测方法的建立

 The nucleotide sequence of small coat protein (CPS) gene of Broad bean stain virus (BBSV) was determined and compared with other comoviruses. The CPS gene of BBSV consisted of 687 nucleotides and encodes a putative protein of 228 amino acid residues. The CPS sequence of BBSV and those of other comoviruses shared identities of 36.5%-58.9% and 35.2%-70.3% at the nucleotide and amino acid levels, respectively. The RT-PCR method specific for BBSV detection was developed based on the determined CPS sequence. The RT-PCR assay presented here allows, for the first time, rapid and specific detection of BBSV.     

荔枝害虫群落结构及其动态研究

以栽培品种ＮＣ８９为对照,通过室内饲养和组织切片,系统研究了转双基因抗虫烟草对烟夜蛾和小地老虎幼虫的抗性表现。结果表明,转双基因抗虫烟草对烟夜蛾幼虫具有稳定的杀虫作用,取食后２－３ｄ死亡,死亡率达１００％,不同龄期间表现一致;对小地老虎幼虫个有一定的杀虫作用,其抗性随龄期的增加而减弱,１龄死亡率为４８％,２龄为２８％,３龄以后死亡率为０,但对各龄幼虫的生长发育均具有明显的抑制作用。     

实时荧光PCR检测马铃薯白线虫技术研究

马铃薯胞囊线虫是马铃薯上最重要的有害生物之一,也是我国特别关注的重要植物检疫性线虫.针对马铃薯白线虫ITS序列,我们设计了引物和TaqMan探针,使用15种马铃薯胞囊线虫群体和4种其它胞囊线虫样品进行验证,可高度灵敏地检测单个马铃薯白线虫的胞囊或幼虫,最高检测灵敏度达到10fs;同时开展了混合样品和未知样品的检测,证明了引物的专化性和TaqMan探针特异性.该检测方法可自动化检测马铃薯白线虫并进行定量,适合进行标准化的常规检测.     

北京局加强配餐料的检疫监管

北京地区宾馆、饭店使用的进境动植物产品来源有两个渠道,一是直接通过审批从国外进境;二是从国内沿海地区批发商处购买,后者常夹带一些疫区产品。因此,给监管工作增加了难度。在对12家宾馆、     

基于CLIMEX与GARP的三叶草斑潜蝇在中国的潜在分布预测

运用适生性分析软件CLIMEX与GARP对三叶草斑潜蝇Liriomyza trifolii(Burgess)在我国的潜在分布区进行预测。CLIMEX预测结果显示,全国638个气候站点中有415个站点的生态气候指数Ei﹥0,分布于30个省(或地区),在这些地区三叶草斑潜蝇存在定殖的潜在性。同时,GARP预测认为三叶草斑潜蝇的适生区主要覆盖我国东北地区、华北地区、华中地区和华南地区。将两个软件预测结果进行叠加分析显示预测结果基本吻合。潜在适生区叠加区域位于东北地区、华北地区、华中地区以及华南的部分地区,这些地区属于三叶草斑潜蝇的高度危险区域。     

美国对主要外来实蝇种类的监测与扑灭

1 美国主要外来实蝇种类1.1 地中海实蝇 Ceratitis capitata(Wiedemann)起源于西非原始森林。由于其适应性强,随国际间的人类活动交流而传播到世界各地,是最著名的实蝇类害虫,其分布广,寄主植物超过260种。自1981年在美国加州大发生被扑灭后,又零星发生过7次,共造成损失达几亿美元。1.2 墨西哥按实蝇 Anastrepha ludens(Loew)     

有害生物风险分析与进出境水果检疫

世界贸易组织(WTO)诸多协议之一<实施卫生与植物卫生措施协定>(SPS)明确提出检疫措施要建立在有害生物风险分析(PRA)的基础之上.有害生物风险分析是评价生物学或其他科学、经济学证据,确定某种有害生物是否应予以管制以及管制所采取的植物卫生措施力度的过程.主要包括风险确定、风险评估、风险管理和风险交流四个部分.有害生物风险分析是检疫决策的主要技术依据;而且随着新的世界贸易体制的运作,进行PRA可保持检疫的正当技术性贸易措施作用,充分发挥检疫的保护功能;PRA能强化检疫对贸易的促进作用,增加本国农产品出口的市场准入机会.同时开展PRA工作也是遵守SPS协定及其透明度原则的具体体现.随着世界经济与贸易的发展,特别是全球贸易自由化的发展以及区域性经济共同体和其他政治经济组织的产生,统一的贸易原则和一体化的贸易措施逐步形成,必然对国际植物检疫产生很大的影响.因此,禁止进境的"零"允许与贸易利益产生了很大的矛盾,因此,打破"零"允许已是不可阻挡的趋势,而实施SPS协定中关于"透明度"、"风险分析"等一系列条款,正是这种趋势的过程和体现.今后,在提出任何一项检疫措施之前,进行相关的有害生物风险分析(PRA)成为必要的步骤.     

菠萝病害

凡有菠萝种植的地方,粉蚧萎蔫病Mealybug wilt就可能是主要病害。病害同菠萝灰粉蚧Dysmicoccus Nebrenipes Beardsley和菠萝红粉蚧D.brevipes Cockerell伴随发生,尽管病害确切的病因尚不清楚,但最近的一份报道指出,从萎蔫的菠萝植株中发现了病毒颗粒。很多国家防治此病害的效果极差。粉蚧萎蔫病一旦在菠萝上发生,防治困难。这是因为     

超分支滚环扩增法检测小麦矮腥黑穗菌

 【目的】建立小麦矮腥黑穗病菌（Tilletia controversa Kühn,TCK）的超分支滚环扩增（hyper- branched rolling cycle amplification,HRCA）检测体系,为小麦矮腥黑穗病的鉴定以及早期诊断提供了一种新的稳定、可靠的检测技术。【方法】锁式探针包含一个公共连接序列和在探针两端与靶DNA序列互补的2个序列。根据TCK的差异序列设计锁式探针两端序列,以此为基础建立了TCK超分支滚环扩增反应体系。以优化的HRCA反应条件为基础,确定检测体系的特异性和灵敏度。比较HRCA体系和常规PCR体系的性能,并利用这2种体系对来自中国出入检验检疫局截获的51个小麦样品进行了验证检测。【结果】HRCA体系能专一地检出小麦矮腥黑穗菌的DNA靶带,而TCT、TCL等近源种及健康小麦样品都不能扩增。HRCA检测TCK靶序列质粒DNA的下限为1 fg?μl-1,检测基因组DNA的下限为10 pg?μl-1,检测灵敏度比常规PCR检测体系高10倍。HRCA检测体系具有很好的特异性、灵敏度和准确性,更适合于TCK的检测及鉴定。【结论】稳定、灵敏、特异的小麦矮腥黑穗菌的HRCA检测体系的建立,为小麦矮腥黑穗病的早期诊断及其近源种的多靶标检测提供了同步检测技术。