黑龙江省三个气候区甜菜适栽品种探讨

通过1989、1990、1992年三年试验,对生产上使用的6个甜菜品种在黑龙江省西部干旱区、哈尔滨气候区、牡丹江半山间3个农业气候区的经济性状及适应性做了分析,结果表明,甜甜302和阿育2号对3个农业气候区具有较强的适应性,较其他品种块根增产幅度分别为3.83％～14.03％和2.22％～12.26;产糖量增加幅度分别为4.69％～14.02％和2.81％～11.98％.甜研302、阿育2号可作为3个气候区的主栽品种,其他品种搭配使用.     

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为了找到鬼针草叶蛋白提取最佳生长期和有效提取方法,研究了鬼针草不同生育期和不同方法对叶蛋白提取的影响.结果表踢:在鬼针草4个不同生育期中采用直接加热法提取,叶蛋白提取率和沉淀物中粗蛋白含量依次降低,营养生长期(20.2 mg/g,61.36％)＞现蕾期(15.9 mg/g,61.25％)＞盛花期(14.7 mg/g,60.97％)＞结果期(12.1 mg/g,54.22％),均以营养生长期为最高.在鬼针草的营养生长期,采用多种方法提取叶蛋白,叶蛋白提取率∶酸化加热+聚乙二醇沉淀法(29.4mg/g)＞酸化加热+乙醇沉淀法(27.9mg/g)＞酸化加热+氯化钠法(24.7mg/g)＞酸化加热法(23.1 mg/g)＞直接加热法(20.2mg/g);沉淀物中粗蛋白含量∶酸化加热+乙醇沉淀法(65.35％)＞酸化加热+氯化钠法(60.72％)＞酸化加热+聚乙二醇沉淀法(57.13％).     

中华鳖脑垂体的显微与超微结构观察

为了探讨中华鳖脑垂体的组织结构及其季节性变化,采用H.E染色、三色染色和免疫组织化学染色法在光镜下观察中华鳖脑垂体的显微结构,结合电镜对鳖脑垂体进行超微显微观察。结果发现中华鳖脑垂体同样分为神经垂体和腺垂体,但是缺乏中间部。腺垂体包括结节部和远侧部,远侧部可分头叶和尾叶两部分,头叶大于尾叶,神经部很小。腺垂体中的细胞可分为嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞,各类细胞的分布和形态有明显区别。免疫组化染色证明促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞密集分布于结节部,在远侧部也有零星分布;促性腺激素(GTH)细胞和生长激素(GH)细胞数量在繁殖季节明显多于冬季。电镜下根据细胞大小、细胞核的形状和胞质中分泌颗粒特征可将腺垂体中的细胞分为GH细胞、ACTH细胞、GTH细胞、催乳激素(LTH)细胞、促甲状腺激素(TSH)细胞和嫌色细胞。在这些细胞间有明显的细胞连接。细胞形态和数量在繁殖季节和冬季有明显变化。     

中华鳖胃肠道5-羟色胺和胃泌素内分泌细胞的免疫细胞化学研究

采用ABC免疫细胞化学法，对中华鳖（Trionyx sinensis）胃肠道5-羟色胺（5-HT）细胞和胃泌素（Gas）细胞的分布和形态进行了观测，并比较了冬眠期和活跃期的分布差异。结果显示，5-HT细胞在胃和肠道各段均有分布，在胃分布于胃腺，在肠则分布于黏膜卜皮。在胃的前部和中部，5-HT细胞位于胃腺各部，而在胃的后部，5-HT细胞则主要集中于胃腺的上部和胃小凹底部。在肠道中，由前向后5-HT细胞的分布呈递减趋势，且大部分细胞呈上窄下宽的锥体形、梨形等，顶端伸达肠腔，为开放型内分泌细胞，少数细胞为封闭型。前、中部胃腺中，Gas细胞的分布数量较多，且位于腺细胞之间，一般为开放型。后部胃腺中Gas细胞数量减少。胃黏膜上皮和肠道中未见Gas细胞的分布。与活跃期相比，冬眠期Gas细胞的分布情况变化不大，但5-HT细胞的分布数量显著减少。     

翘嘴鳜皮肤、鳞片、鳍色素细胞显微观察

采用冰冻切片和常规苏木精—伊红染色切片,在光学显微镜下观察了体质量500 g 1龄翘嘴鳜皮肤、鳞片和鳍色素细胞的组成、分布及形态特征。皮肤纵切显微观察显示,眼后头部、体侧黑斑、体侧下部皮肤主要含黑色素细胞,喉部及腹部皮肤主要含虹彩细胞。皮肤横切显微观察显示,在皮肤表面,黑色素细胞聚集呈团状或块状,黄色素细胞呈颗粒状,虹彩细胞呈长梭形。苏木精—伊红染色下,皮肤黑色素细胞呈棕黑色,虹彩细胞呈浅灰色。皮肤色素层主要分布在表皮层与真皮疏松层之间、真皮致密层与肌肉相连处,少量分布在真皮疏松层纤维组织上。鳞片显微观察显示,眼后头部、体侧黑斑、体侧下部鳞片主要含黑色素细胞、黄色素细胞;喉部及腹部为透明状,不含或含少量黑色素细胞及黄色素细胞。鳞片黑色素细胞胞体大,胞体周边分枝多且细,黄色素细胞呈颗粒状。鳍显微观察显示,鳍主要含黑色素细胞及黄色素细胞,不同部位各色素细胞占比、大小及着色存在较大的区别。翘嘴鳜在长期的进化过程中,通过黑色素细胞、黄色素细胞、虹彩细胞不同的调配比及着色深浅,从而形成了具有独特特征的条纹及图案,利于隐藏及捕食,同时具有一定的观赏性。     

牙鲆肝脏抗菌肽-2基因序列和表达分析

抗菌肽是鱼类先天免疫的组成部分,发现新的抗菌肽对于动物抗病机理的研究和寻找新药物有重要意义。经过对GenBank数据库中牙鲆EST文库进行同源比对后,筛选得到一个具有完整编码框的抗菌肽cDNA序列,结果再经过RT-PCR进行验证,命名为LEAP-2,对该序列进行注释,获得序列登录号EU586111。该抗菌肽能编码102个氨基酸的多肽,前28个氨基酸组成信号肽。推测编码蛋白质分子量为11 276.9 u,理论等电点(PI)为9.33。其蛋白质序列与另外9种鱼类的同源抗菌肽序列比较发现,同源性介于38.2%～61.7%。其中57至92位氨基酸为高度保守区,是维持其空间结构的主要区域,其中包含有4个保守的半胱氨酸,可能组成2个二硫键。荧光定量PCR分析显示,LEAP-2基因在肝脏中高表达,在牙鲆仔鱼不同发育时期中也有表达,但是表达水平存在明显差异,特别是在变态中期表达量比较高。     

尼罗罗非鱼干扰素调节因子1的表达与细胞定位

为了分析尼罗罗非鱼干扰素调节因子1(IRF1)的表达规律及其功能,克隆了尼罗罗非鱼IRF1基因c DNA全长,与其他脊椎动物IRF1基因进行比对,构建IRF家族系统进化树。然后使用Poly I∶C对尼罗罗非鱼进行体内注射诱导抗病毒免疫反应,利用荧光定量PCR技术检测处理组和对照组中尼罗罗非鱼各组织IRF1基因的表达差异。最后构建尼罗罗非鱼IRF1基因真核表达载体,对其进行细胞定位。结果表明,尼罗罗非鱼IRF1有888 bp的开放读码框,编码295个氨基酸的蛋白序列。该蛋白N端高度保守,并含有6个保守的色氨酸,具有DNA结合结构域。对蛋白相似率的计算发现尼罗罗非鱼与斑马鱼IRF1相似度为52.1%。而与大鼠IRF1的相似率最低,为36.2%。IRF家族成员蛋白序列构建的系统进化树显示,IRF家族共分为4个亚群。将p CMV3-FLAG-IRF1真核表达载体转染到Hela细胞中后,对IRF1进行细胞定位发现,尼罗罗非鱼IRF1主要分布在胞质中,胞核中有少量分布。对尼罗罗非鱼使用Poly I∶C进行体内注射诱导抗病毒应答反应,利用实时荧光定量PCR检测到各个组织中IRF1在不同时间下的表达水平有显著差异。本研究完成了尼罗罗非鱼IRF1的表达和细胞定位,对各种脊椎动物IRF家族成员进行了系统进化分析,结果有助于深入了解干扰素系统在机体免疫系统中的调控机制。