猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化

以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。     

肾型传染性支气管炎的诊断

<正> 仪征化纤养殖场种鸡场饲养的25周龄艾维茵父母代肉鸡2446只和55周龄艾维茵父母代肉鸡3019只,在92年2月中旬后大约40天的时间内,两批鸡几乎同时发生了以排白色稀粪,伴有轻度呼吸道症状,产蛋率较大幅度下降,沙壳蛋、软壳蛋和畸形蛋明显增多的疾病。病死鸡剖检以肾肿大呈花斑状为典     

维生素A对鹅生长性能及血清生化指标的影响

本试验旨在研究不同水平维生素A对青农灰鹅生长性能、血清生化指标及组织中维生素A含量的影响。选用1日龄青农灰鹅200只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复10只鹅。各组在玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加0、1 500、3 000、6 000和12 000 IU/kg的维生素A。试验期12周。结果表明:1)饲粮添加维生素A能显著提高1～4、5～12周龄青农灰鹅平均日增重和平均日采食量(P<0.05),降低死淘率,但对料重比影响不显著(P>0.05)。2)4周龄时,添加6 000 IU/kg维生素A显著降低了血清尿酸含量(P<0.05),添加3 000和6 000 IU/kg维生素A极显著提高了血清碱性磷酸酶活性(P<0.01),但对血清总蛋白、血糖和尿素氮的含量影响不显著(P>0.05);12周龄时,添加6 000 IU/kg维生素A显著降低血清血糖和尿酸含量(P<0.05),极显著提高了血清碱性磷酸酶活性(P<0.01),但不同水平维生素A对血清总蛋白、尿素氮的含量影响不显著(P>0.05)。3)随着饲粮中维生素A添加水平的提高,血清及肝脏中维生素A含量极显著增加(P<0.01)。由此可见,本试验条件下,以生长性能作为衡量标准,1～4周龄青农灰鹅饲粮维生素A适宜添加水平为8 000 IU/kg,5～12周龄为9 000 IU/kg;以血清生化指标作为衡量标准,1～4、5～12周龄维生素A添加水平均以6 000 IU/kg为宜。     

新兴猪IL-18成熟蛋白基因的克隆与序列分析

根据GenBank上登录的猪白细胞介素18(pIL-18)基因序列，设计了1对特异引物。利用RT-PCR对从3周龄新兴仔猪脾细胞中提取的总RNA进行了扩增，获得了约500bp的片段。将该片段克隆、鉴定、测序，证实已获得了新兴猪IL-18成熟蛋白基因片段，其大小为474bp，编码157个氨基酸，与GenBank上登录的猪IL-18成熟蛋白基因序列完全一致。     

牛皮蝇蛆病的药物防治

牛皮蝇蛆病是皮蝇的幼虫寄生于牛背部皮下组织所引起的一种慢性寄生虫病,俗称“嗡眼”。患牛消瘦,发育不良,母畜泌乳量下降,役用牛使役力降低。皮革质量下降,皮张利用率和价格降低40％～50％,损失较大。     

蛋鸡暴发寄生虫病的诊治

发病情况 2008年3月6日,蒙城县漆园镇某蛋鸡场养殖户常某饲养6000只蛋鸡,280天左右,产蛋率90％左右,近些天鸡群采食下降、羽毛凌乱．产蛋有轻微的下降,蛋壳苍白,发现极个别的鸡消瘦,鸡身上有很多黑色小点样的虱子,在羽毛、翅膀下方、头部、身体及肛门等处可发现不同种类的虱子寄生。用了很多氨基甲酸酯类的药物喷洒,用药后见好转,停药又起,反反复复。治疗了一段时间,不见好转,带鸡前来就诊。     

蛋鸡暴发寄生虫病的诊治

发病情况 2008年3月6日,蒙城县漆园镇某蛋鸡场养殖户常某饲养6000只蛋鸡,280天左右,产蛋有轻微的下降,蛋壳苍白,发现极个别的鸡消瘦,鸡身上有很多黑色小点样的虱子,在羽毛、翅膀下方、头部、身体及肛门等处可发现不同种类的虱子寄生.     

不同消毒方法对种蛋消毒效果和孵化成绩的影响

禽用疫苗的生产中,病毒大多是通过鸡胚的培养来扩繁,因此生产中要使用大量的鸡胚.胚蛋的利用率是疫苗生产成本中的一个关键因素,现阶段我们采用对种蛋熏蒸消毒的方法来提高种蛋的利用率和减少种蛋在孵化过程中细菌感染的机率,起到了一定的作用,但是在生产中还是存在消毒方法单一,细菌容易产生抗药性等问题 [1～3].为了找到更适合我们实际生产的消毒液和消毒方法,进一步提高胚蛋的利用率和胚蛋表面无菌率,我们在种蛋入孵前选择不同的消毒液、不同的消毒方式、不同的消毒时间等途径进行消毒实验,希望找到合适的消毒液、消毒方法,从而达到提高疫苗生产中原料的利用率和无菌率,降低产品生产成本的目的.     

内蒙古地区奶牛乳源金黄色葡萄球菌耐药性研究

为了确定内蒙古地区奶牛中乳源金黄色葡萄球菌的耐药表型及其耐药基因的流行情况,采用生化鉴定法结合PCR方法对奶牛乳源金黄色葡萄球菌进行了分离、鉴定。采用微量稀释法测定了15种临床常用抗菌药物对21株金黄色葡萄球菌的最小抑制菌浓度(MICs)。结果显示,分离菌株对青霉素和氨苄西林的耐药率较高,分别为81%和75.5%;对头孢菌素类药物的耐药率也较高,均在60%~70%之间;对大环内酯类和四环素类抗生素的耐药率均在40%~50%之间。乳源金黄色葡萄球菌对3种氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率较低,均小于30%;对庆大霉素也比较敏感,耐药率13.2%。以上分离菌株对万古霉素全部敏感。联合用药的药敏试验结果显示,菌株对阿莫西林-克拉维酸高度敏感,耐药率仅9.5%。多重耐药表型结果显示,75.5%的菌株耐2~7种药,24.5%的菌株耐8~13种药。通过PCR方法对奶牛乳源金黄色葡萄球菌所携带的耐药表型及基因进行检测,结果表明,分离菌株中有3种四环素耐药基因组合在流行。分别是tet M+tet L1株(4.76%)和18株分离菌携带bla Z耐药基因,检出率为85.7%。由此可见,内蒙古地区奶牛乳源性金黄色葡萄球菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性,且多重耐药情况较为严重;分离菌株中有tet M、tet K、tet L和bla Z耐药基因在流行,分别编码了对四环素类和β-内酰类抗生素的耐药性。     

兔病毒性败血症Ⅰ号疫苗研究

1984年底上海郊县暴发了一种以实质器官点状或弥漫性出血以及皮下、肌肉大片出血和肝脏坏死为主要病变的急性病毒性败血症。波及市区生物、医学、科研等部门的实验兔场。经研究,证实其病原是一种病毒。为了控制本病的流行,我们用“三林”毒株,进行了疫苗的研究.经几个月的实验室试验,取得了一定的进展,同时在上海、贵