弓形虫鸡尾酒DNA疫苗的免疫保护作用研究

研究旨在构建弓形虫鸡尾酒DNA疫苗并评价其对小鼠的免疫保护效果。研究将编码弓形虫棒状体蛋白ROP5、ROP9和ROP17的基因分别构建至真核表达载体p VAX1上,获得重组真核表达质粒p VAX1-ROP5、p VAX1-ROP9和p VAX1-ROP17,将上述质粒进行PCR和双酶切验证,并通过Western blot检测重组质粒在真核细胞中表达。将三种重组质粒按1∶1∶1的比例混合后,取100μg通过腿部肌肉注射免疫小鼠,加强免疫后,检测小鼠血清抗体、脾淋巴细胞增殖及细胞因子水平,并接种弓形虫RH强毒株进行攻毒,评价免疫后小鼠的保护效果。真核表达质粒p VAX1-ROP5、p VAX1-ROP9和p VAX1-ROP17经PCR和双酶切验证的结果显示：分别在1 686 bp、1 128 bp和1 836bp处出现特异性目的条带;Western blot检测结果发现,在约为62、41和68 kDa处出现目的条带,分别与预期目的蛋白ROP5、ROP9和ROP17的分子量大小相符。与空载体组和生理盐水组小鼠相比,疫苗免疫组小鼠产生的血清中抗体IgG和淋巴细胞产生的细胞因子IFN-γ和IL...     

都市型农业背景下农业院校研究生实践能力的培养——以兽医学为例

研究生实践能力培养为农业院校研究生步入社会、融入社会、服务社会提供了多方面的贡献。本文以兽医学研究生实践能力培养为例,从实践能力全新概念的引入,结合都市型农业背景、导师团队建设和产学研联合办学3个角度阐释兽医学研究生实践能力培养的新契机、新模式、新方法,为农业院校研究生实践能力的培养提供新的思路和方向。     

利用E.coli-App穿梭载体构建温控双基因裂解载体pMC-WK

采用PCR方法从噬菌体PhiX174基因组中扩增出裂解蛋白E基因,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出核酸酶A基因（SN）,通过15个柔性氨基酸linker将双基因串联,插入PBV220表达载体,构建温控双基因裂解系统（DLS）。PCR扩增DLS,将其与E.coli-App穿梭载体pMC-Express相连,构建重组穿梭载体pMC-WK。裂解试验表明,E-15aalinker-SN裂解较E裂解迅速而彻底,菌体裂解率达到99.999 4%;经PCR扩增出的DLS具有裂解活性。本试验成功构建了温控双基因裂解载体pMC-WK,为App菌影疫苗的研究奠定了基础。     

深化动物生理学试验教学改革提高学生创新素质

素质教育是高校教育的生命线,创新素质是大学生在人才市场上竞争的有力武器.创新素质就是要给大学生树立创新意识、培养创新精神、增强创新能力.如何利用学科和专业特点提高当代大学生的创新素质是高等教育改革的关键所在.同样,对于从事动物生理学试验教学研究的老师来说,如何更好地将试验教学与学生创新素质的提高有机结合起来是今后试验教学改革的重点.近年来,在动物生理学试验教学中,围绕这方面笔者作了一些探索,并取得一定成效.     

鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位DNA疫苗构建及其免疫原性研究

试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒（IBV）S1蛋白和鹦鹉热衣原体（Cps）主要外膜蛋白（MOMP）的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示：构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高（P<0.01）,与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGF...     

HPA轴应激应答反应产生的中枢调节机制

目前普遍接受的关于应激的定义是:应激反应是机体受到强烈刺激或有害刺激以后产生的非特异性适应反应,其主要特征为机体下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic pituitary adrenocortical axis, HPA轴)及交感肾上腺髓质系统活动增强[1].关于HPA轴功能的中枢调节研究尽管是老话题,但最近有很多新进展,本文主要就国内外近年来在这方面开展的研究作一综述.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验研究

副猪嗜血杆菌病是一种猪的传染病,主要引起断奶仔猪和保育猪发病。试验对天津某规模化猪场疑似副猪嗜血杆菌病猪采集病变明显的组织进行细菌分离培养、显微镜镜检、生化试验等实验室诊断,结合病猪的临床症状和病理变化特点,判定该细菌分离株为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果显示,该株副猪嗜血杆菌对头孢噻呋、阿米卡星等药物高度敏感。     

肉仔鸡非典型新城疫并发克雷伯氏菌病的病原分离鉴定及防治

对临床采集的肉仔鸡病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析后分离出克雷伯氏茵;结合新城疫血凝及血凝抑制试验,检测出发病鸡群血凝抑制抗体效价水平参差不齐,高的在8^log2以上,低的在3^log2以下。初步诊断该鸡场发病鸡群为非典型新城疫并发克雷伯氏菌病混合感染。同时对病因进行了分析并采取对症治疗方案,效果良好。     

牡丹鹦鹉试验性感染色巴杆菌的病理组织学观察

目前,尚未见到有关牡丹鹦鹉感染禽多杀性巴氏杆菌的病例报道.笔者于2006年5月份以5:A型禽多杀性巴氏杆菌试验性感染鹦鹉,对感染鹦鹉的发病情况和病理组织学作了较详细的试验观察和记录,现报道如下.     

东北虎巴氏杆菌毒力基因toxA的克隆及同源性分析

通过对吉林市江南公园送检东北虎病例的病原分离鉴定,分离出多杀性巴氏杆菌,为进一步加强对该病的流行病学调查,并为准确诊断和治疗该病提供依据,实验对该株巴氏杆菌毒力基因toxA进行了研究。根据巴氏杆菌毒力基因toxA序列设计合成1对引物,以临床分离的虎源巴氏杆菌为模板,通过PCR技术,扩增出toxA基因片段。将长约526bp的toxA目的基因克隆到pGEM-T载体上,通过核苷酸序列测定,结果表明toxA基因序列与发表序列(X51512)的同源性为100%。流行病学调查显示,东北虎巴氏杆菌病的病原可能来自其食物(牛、羊肉等)。因此,在饲养过程中应加强检疫,切断巴氏杆菌病食源性传播途径。