琯溪蜜柚BAC文库的构建和汁胞粒化相关基因的筛选

【目的】构建琯溪蜜柚BAC文库,利用该文库筛选与汁胞粒化相关的基因。【方法】用温和的物理方法获得高分子量DNA,部分酶切后进行回收、连接、转化,超低温保存阳性克隆。构建DNA样品混合样,PCR法筛选文库,生物信息学分析DNA序列。【结果】改进了适合琯溪蜜柚BAC文库构建的方法;构建的琯溪蜜柚BAC文库含有26112个单克隆,空载率小于1%,叶绿体DNA的污染率不超过1%,插入片段平均大小大约120kb,覆盖8倍的琯溪蜜柚基因组。利用与琯溪蜜柚汁胞粒化相关的EST序列设计PCR引物筛选文库,得到一段大小为1088 bp的DNA序列,该序列含有两段大小分别为122bp和172bp的内含子,经同源比对发现,该序列中部分序列与蓖麻(Ricinus communis)、杨树(Populus trichocarpa)多铜氧化酶(multicopper oxidase)cDNA序列分别有85%和71%的同源性;与毛叶番荔枝(Annona cherimola)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)果胶酯酶(pectinesterase)cDNA序列分别有76%和73%的同源性。【结论】本研究构建的BAC文库适用于琯溪蜜柚功能基因组的研究,从BAC文库筛选获得的DNA序列与汁胞粒化相关的基因有高度同源性。     

金柑的采后贮藏生理变化

以尤溪金柑为试验材料,研究其采后贮藏过程中可滴定酸、Vc及可溶性糖含量变化,贮藏90 d后统计好果率和失重率。结果表明,4个试验点的金柑经保鲜剂处理的好果率均明显高于未处理。随着贮藏时间的延长,金柑果皮和果肉中的可滴定酸和Vc含量呈明显下降的趋势;果糖、葡萄糖含量总体呈下降的趋势,但变化幅度不大;果皮中蔗糖含量前60 d逐渐升高,随后急速下降;果肉中蔗糖含量前30 d急剧下降,随后缓慢下降。     

果蔬采后处理课程教学改革实践

通过分析果蔬采后处理课程的特点,针对教学过程中发现的内容多、课时少,课堂效果不佳,实验教学内容综合性与实践性弱等问题,从教学内容、教学方法与手段、考核方式等方面进行了改革与实践,以培养学生的学习兴趣,紧跟科学发展前沿,提高创新能力和综合素质为出发点,优化了该课程教学的新内容体系和教学模式。     

草甘膦和乙烯利对糖能兼用甘蔗FN95-1702的催熟增糖效应

在糖能兼用甘蔗新品种FN95-1702生长盛期分别用0.03％草甘膦和0.04％乙烯利进行叶面喷施。结果表明：0.04％乙烯利对甘蔗蔗糖分的提高迟缓稳定,能显著提高蔗茎早期的蔗汁重力纯度,能在不抑制甘蔗继续生长的条件下实现稳定的催熟增糖效应;0.03％草甘膦更能显著提高蔗茎早期的甘蔗蔗糖分,对中期的蔗汁重力纯度的提高更有效,在抑制甘蔗继续生长的条件下实现催熟增糖效应。     

火龙果和霸王花花粉生活力测定

采用TTC法和蔗糖培养基测定白玉龙、珠龙火龙果和霸王花花粉生活力,结果表明：白玉龙的花粉生活力显著高于珠龙和霸王花,白玉龙花粉维持生活力的时问长于珠龙和霸王花,5个试材花粉生活力以含苞待放期和盛花期最高。花粉在25％的蔗糖浓度培养基上萌发率最高,在1O％和25％蔗糖培养基上添加0．01％～0．05％硼可以提高花粉萌发率。     

(木奈)幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用山梨醇（浓度为3％）为碳源、含氮量低的WPM培养基，胚性愈伤组织的诱导效果优于蔗糖为碳源、含氮量高的MS培养基；幼胚胚性愈伤组织诱导的最适2，4-D浓度为2．0mg／L，培养基中附加5．0mg／LAgNO3有助于提高胚性愈伤组织的诱导率。     

水仙鳞茎膨大期各器官可溶性糖的含量及分布

以第3年种植的水仙品种‘金盏银台’为材料,使用乙醇沉淀法制备可溶性糖测定溶液,利用蒽酮比色法测定其鳞茎膨大期不同组织和不同部位的可溶性糖含量。研究结果表明:水仙不同组织器官可溶性糖水平为:根叶中叶尖叶基主芽鳞片。水仙叶片形成的碳水化合物能够逆浓度梯度向下运输,以供给鳞片和内球进行营养积累。不同层叶片及鳞片的可溶性糖测定发现,最外层叶片及鳞片的可溶性糖水平较其它层要低,总体上呈现出由外及里的递增趋势,说明水仙不同层叶片及鳞片为整个鳞茎的营养供给是通过由外及里,由上到下一层层供给生长需求的。     

垂直板小型分析型蛋白质双向电泳技术体系的改进

以荔枝嫩叶和成熟叶为材料,第1向以小型垂直板(作胶净面积82 mm×82 mm)电泳体系进行等电聚焦,采用1.0mm厚的凝胶,通过对聚焦时间进行改进,建立了快速的小型分析型蛋白质双向电泳技术体系.应用该体系获得了稳定、清晰的双向电泳图谱.经考马斯亮蓝R-250染色显示,在荔枝嫩叶和成熟叶片中清晰可辨的蛋白质斑点数有200多个.并对该体系的应用进行了初步讨论.     

多花水仙花色基因与遗传转化研究进展

综述近年来多花水仙在花色基因研究与遗传转化研究方面的进展,包括多花水仙花色成分、花色基因的克隆及其表达调控、花色基因的遗传转化等方面,分析该领域存在的问题,并对其应用前景进行展望。     

ISSR分子标记在芦柑提纯复壮研究中的应用

采用ISSR（Inter-simple Sequence Repeat）分子标记技术,从随机引物中筛选出能稳定扩增的14条引物,利用2条引物对供试的10个芦柑样品进行PCR扩增,获得了与母本完全一致的条带,从而可以确定鉴定样本为珠心苗。